無論氣相還是液相做定量分析都需要用到內(nèi)標(biāo)法或者外標(biāo)法，那么，什么又是內(nèi)標(biāo)法？內(nèi)標(biāo)法具有哪些特點，原理是怎么樣？選擇內(nèi)標(biāo)法需要滿足哪些條件？等關(guān)于內(nèi)標(biāo)法的相關(guān)問題，一文給你解答清楚。
內(nèi)標(biāo)法是色譜分析中一種比較準(zhǔn)確的定量方法，尤其在沒有標(biāo)準(zhǔn)物對照時，此方法更顯其優(yōu)越性。內(nèi)標(biāo)法是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物(參見內(nèi)標(biāo)物條)加到一定量的被分析樣品混合物中，然后對含有內(nèi)標(biāo)物的樣品進(jìn)行色譜分析，分別測定內(nèi)標(biāo)物和待測組分的峰面積(或峰高)及相對校正因子，按公式和方法即可求出被測組分在樣品中的百分含量。對于內(nèi)標(biāo)法定量分析來說，內(nèi)標(biāo)物的選擇是及其重要的。它必須滿足如下的條件：
1.內(nèi)標(biāo)物與被分析物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)要相似（如：沸點、極性、化學(xué)結(jié)構(gòu)等）；
2.內(nèi)標(biāo)物應(yīng)是該試樣中不存在的純物質(zhì)；
3.它必須完全溶于被測樣品（或溶劑）中，且不與被測樣品起化學(xué)反應(yīng)；并與試樣中各組分的色譜峰能完全分離；
4.能加入內(nèi)標(biāo)物的量應(yīng)接近于被測組分；
5.色譜峰的位置應(yīng)與被測組分的色譜峰的位置相近，或在幾個被測組分色譜峰中間。且又不共溢出，目的是為了避免儀器的不穩(wěn)定性所造成的靈敏度的差異；
6.選擇合適的內(nèi)標(biāo)物加入量，使得內(nèi)標(biāo)物和被分析物質(zhì)二者峰面積的匹配性大于75%，以免由于它們處在不同響應(yīng)值區(qū)域而導(dǎo)致的靈敏度偏差。
內(nèi)標(biāo)法的具體表現(xiàn)：
1.當(dāng)配制校正因子測定用的對照溶液和含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的待測組分溶液使用同一份內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液時，則配制內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液不必精密稱(量)取。
2.采用內(nèi)標(biāo)法定量時，內(nèi)標(biāo)物的選擇是一項十分重要的工作。
理想地說，內(nèi)標(biāo)物應(yīng)當(dāng)是一個能得到純樣的已知化合物，這樣它能以準(zhǔn)確、已知的量加到樣品中去，它應(yīng)當(dāng)和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學(xué)性質(zhì)(如化學(xué)結(jié)構(gòu)、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應(yīng)特征。
3.需要指出的是，在少數(shù)情況下，分析人員可能比較關(guān)心化合物在一個復(fù)雜過程中所得到的回收率，此時，他可以使用一種在這種過程中很容易被完全回收的化合物作內(nèi)標(biāo)，來測定感興趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所說的選擇原則。
內(nèi)標(biāo)法的特點及要求：
①內(nèi)標(biāo)法的準(zhǔn)確性較高，操作條件和進(jìn)樣量的稍許變動對定量結(jié)果的影響不大。
②內(nèi)標(biāo)法的缺點是操作程序相對煩瑣，每次分析時內(nèi)標(biāo)物和試樣都要準(zhǔn)確稱量，不適合大批量試樣的快速分析，有時尋找合適的內(nèi)標(biāo)物也有困難。
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