概述

制備http://taoamoy.cn/product/goods-3762.html色譜（Prep-LC）以其高分離效率，重現(xiàn)性和低溶劑消耗而聞名，是一種純化技術(shù)。來自中國的色譜專家團(tuán)隊(duì)?wèi)?yīng)用了傳質(zhì)動(dòng)力學(xué)建模和吸附等溫線，以改善該技術(shù)的缺點(diǎn)之一，即超載導(dǎo)致的非線性，這是純化工藝發(fā)展的重要問題。

保持直率

 對(duì)于藥物提取，純化仍然是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)，因?yàn)榻Y(jié)構(gòu)相似的化合物可以共存于基質(zhì)中，特別是對(duì)于從生物發(fā)酵或多肽合成中獲得的藥物而言。Prep-LC廣泛用作分離和純化技術(shù)，但是由于過載導(dǎo)致的非線性（用于提高通量）對(duì)于開發(fā)高效的純化過程一直存在問題。 為了克服這個(gè)問題，來自中國西南醫(yī)科大學(xué)的一組研究人員選擇了羥基酪醇（與橄欖果和葉片中橄欖苦苷水解產(chǎn)生的其他成分同時(shí)生成）作為模型化合物，用于系統(tǒng)地開發(fā)純化方法。甲醇和乙醇用作有機(jī)改性劑，并在三種商用色譜柱C8TDE，C18ME和C18TDE上確定了較佳流速。曲線用van Deemter方程擬合，并對(duì)A，B和C項(xiàng)進(jìn)行了全面分析。然后研究了吸附等溫線，并提出了較為合適的基于制備液相色譜的羥基酪醇純化方法。

純化方法的開發(fā)與優(yōu)化

 使用Shimadzu Prominence-i9（LC-2030）系列儀器進(jìn)行HPLC分析，該儀器配備有脫氣器，低壓梯度儀，混合器，自動(dòng)進(jìn)樣器和柱箱，并與UV檢測(cè)器相連。在配備P680A泵，低壓梯度儀，帶有500μL樣品定量環(huán)的手動(dòng)進(jìn)樣器，TCC 100柱溫箱和PDA 100檢測(cè)器的Dionex P680A系列儀器上進(jìn)行餾分收集。色譜條件為5％甲醇或乙醇水溶液。進(jìn)樣量5μL;柱溫40°C;檢測(cè)波長為280 nm。使用三根色譜柱（C8TDE，C18ME和C18TDE）在0.1至1.5 mL/min的15種不同流速下以0.1 mL/min的增量比較羥基酪醇的傳質(zhì)動(dòng)力學(xué)。 為了精確確定變量對(duì)等效于理論塔板（HETP）的高度的影響，使用van Deemter方程，Gidddings方程，Horvath和Lin方程以及Knox方程計(jì)算了羥基酪醇的傳質(zhì)動(dòng)力學(xué)。 van Deemter方程的三個(gè)項(xiàng)，即渦流擴(kuò)散（A項(xiàng)；由于固定相色譜柱的存在而導(dǎo)致的峰展寬，與流動(dòng)相的速度無關(guān)），分子擴(kuò)散（B項(xiàng)）和傳質(zhì)阻力（C項(xiàng)） ），確定了三列中的兩種有機(jī)改性劑。隨后研究了吸附等溫線，以探討溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間處于平衡狀態(tài)的分布。將濃度較高的羥基酪醇（10–160mmol/L）的標(biāo)準(zhǔn)溶液泵入C18TDE色譜柱，并記錄穿透時(shí)間。 在這項(xiàng)工作中，發(fā)現(xiàn)在5％甲醇-水條件下C8TDE和C18ME色譜柱的較佳線速度為6.37 mm/s（0.3 mL/min），在5％乙醇條件下為4.24 mm/s（0.2 mL/min）。

 以水為流動(dòng)相。對(duì)于C18TDE色譜柱，發(fā)現(xiàn)5％甲醇-水的較佳線速度為14.85 mm/s（0.7 mL/min），而5％乙醇-水的較佳線速度為4.24 mm/s（0.2 mL/min）。發(fā)現(xiàn)C18TDE柱是最高效的色譜柱，傳質(zhì)動(dòng)力學(xué)分析表明，乙醇是分離羥基酪醇的合適溶劑，因?yàn)閹в屑状剂鲃?dòng)相的B項(xiàng)極其敏感，因此在改變其他條件時(shí)很難穩(wěn)定其性能。由于C18TDE的最小A項(xiàng)以及可接受的B和C值，因此它是較佳選擇。因此，選擇C18TDE和乙醇純化羥基酪醇是因?yàn)檫@種組合對(duì)變化不敏感，具有較佳的A，B和C項(xiàng)，并且符合Langmuir等溫線模型。羥基酪醇已成功純化，樣品量為1.6％，回收率為90.98％，純度為98.01％，以5％乙醇-水為流動(dòng)相，采用了優(yōu)化的分餾方法，流速為0.2 mL/min。

 動(dòng)力學(xué)使其線性 在制備型液相色譜中，傳質(zhì)動(dòng)力學(xué)建模和吸附等溫線的使用證明對(duì)開發(fā)和優(yōu)化羥基酪醇純化方法非常有幫助。此方法應(yīng)適用于其他制藥和生物技術(shù)產(chǎn)品的純化。未來將如何在行業(yè)中采用這種方法將是很有趣的著作權(quán)歸作

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