高效液相色譜儀中的檢測器是三大關(guān)鍵部件(高壓輸液泵、色譜柱、檢測器)之一，主要用于監(jiān)測經(jīng)色譜柱分離后的組分濃度的變化，并由記錄儀繪出譜圖來進行定性、定量分析。常用的檢測器有紫外吸收檢測器(UVD)、折光指數(shù)檢測器(RID)、電導(dǎo)檢測器(ECD)和熒光檢測器。
一、檢測器的分類
1、整體性質(zhì)檢測器
檢測從色譜柱中流出的流動相總體物理性質(zhì)的變化情況。如折光指數(shù)檢測器(RID)和電導(dǎo)檢測器(CD)，它們分別測定柱后流出液總體的折射率和電導(dǎo)率。此類檢測器測定靈敏度低，必須用雙流路進行補償測量;易受溫度和流量波動的影響，造成較大的漂移和噪聲;不適合于痕量分析和梯度洗脫。
2、溶質(zhì)性質(zhì)檢測器
此類檢測器只檢測柱后流出液中溶質(zhì)的某物理或化學(xué)性質(zhì)的變化。例如，紫外吸收檢測器(UVD)和熒光檢測器(FD)，它們分別測量溶質(zhì)對紫外光的吸收和溶質(zhì)在紫外光照射下發(fā)射的熒光強度。此類檢測器靈敏度高，可單流路或雙流路補償測量，對流動相流量和溫度變化不敏感。但不能使用對紫外線有吸收的流動相。它們可用于痕量分析和梯度洗脫。
二、按適用性分類
1、擇性檢測器
它對不同組成的物質(zhì)響應(yīng)差別極大，因此只能選擇性地檢測某些物質(zhì)，如紫外吸收檢測器、熒光檢測器和電導(dǎo)檢測器。
2、通用型檢測器
它對大多數(shù)物質(zhì)的響應(yīng)相差不大， 幾乎適用于所有物質(zhì)。折光指數(shù)檢測器屬于通用型檢測器，但它的靈敏度低，受溫度影響波動大，使用時有一定局限性。
上面提到的UVD，RID，F(xiàn)D，ECD 4種檢測器皆屬于非破壞性檢測器，樣品流出檢測器后可進行餾分收集，并可與其它檢測器串聯(lián)使用。對熒光檢測器因測定中加入熒光試劑，其對樣品會產(chǎn)生玷污，當(dāng)串聯(lián)使用時應(yīng)將它放在最后檢測。
三、檢測器的性能指標(biāo)
性能 | 可變波長 紫外吸收 | 折光指數(shù) （示差折光） | 熒光 | 電導(dǎo) |
測量參數(shù) | 吸光度(AU) | 折光指數(shù)(RIU) | 熒光強度(AU) | 電導(dǎo)率/(μS/cm) |
池體積/μL | 1～10 | 3～10 | 3～20 | 1～3 |
類型 | 選擇性 | 通用性 | 選擇性 | 選擇性 |
線性范圍 | 105 | 104 | 103 | 104 |
最小檢出濃度/（g/mL） | 10﹣10 | 10﹣7 | 10﹣11 | 10﹣3 |
最小檢出量 | ≈1ng | ≈1μg | ≈1pg | ≈1mg |
噪聲（測量參數(shù)） | 10﹣4 | 10﹣7 | 10﹣3 | 10﹣3 |
用于梯度洗脫 | 可以 | 不可以 | 可以 | 不可以 |
對流量敏感性 | 不敏感 | 敏感 | 不敏感 | 敏感 |
對溫度敏感性 | 低 | 10﹣4℃ | 低 | 2%/℃ |
四、檢測器的性能評價
在評價檢測器時，要強調(diào)以下幾點：
1、噪聲 通常噪聲是指由儀器的電器元件、溫度波動、電壓的線性脈沖以及其它非溶質(zhì)作用產(chǎn)生的高頻噪聲和基線的無規(guī)則波動高頻噪聲似“絨毛”使基線變寬;短周期噪聲是記錄器的基線變化，呈無規(guī)則的峰或谷。噪聲的存在會降低檢測靈敏度，嚴(yán)重時使儀器無法工作。
2、基線漂移 漂移是基線的一種向上或向下的緩慢移動，可在較長時間(0.5～1.0 h)內(nèi)觀察到。它可掩蔽噪聲和小峰。漂移與整個液相色譜系統(tǒng)有關(guān)，而不僅是由檢測器引起的。
3、靈敏度(最小檢出濃度或最小檢出量) 在一個特定分離工作中，檢測器是否有足夠的靈敏度十分重要。當(dāng)比較檢測器時，常使用敏感度這一性能指標(biāo)。敏感度即指信號與噪聲的比值(信噪比)等于2時，在單位時間內(nèi)進入檢測器的溶質(zhì)的濃度或質(zhì)量。
4、線性范圍 在進行定量分析時，希望檢測器有較寬的線性范以便在一次分析中可對主要組分和痕量組分同時進行檢測。
5、檢測器的池體積 它應(yīng)小于比較早流出的死時間色譜峰的洗脫體積的1/10，否則會產(chǎn)生嚴(yán)重的柱外譜帶擴展。
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