液相色譜柱種類繁多，在選擇液相色譜柱之前，首先必須選擇HPLC的分離模式，根據(jù)使用的固定相和流動相的組合不同，可以得到下列各種各樣的分離模式。
一、反相法(RPC)
1、根據(jù)在固定相(填料)和流動相(溶劑)中分配系數(shù)不同分離
2、固定相極性比流動相低
3、采用甲醇、乙睛、THF等有機溶劑和水或緩沖溶液的混合溶液作流動相
4、流動相極性越低，洗脫力越強
二、親水性相互作用法(HILIC)
1、根據(jù)親水性相互作用進行分離
2、使用極性高的固定相
3、采用乙臘等有機溶劑和水或緩沖溶液的混合溶液作流動相
4、流動相的極性越高，洗脫力越強
5、適用于分析極性高的物質(zhì)
三、正相法(NPC)
1、樣品在固定相和流動相中分配系數(shù)不同進行分離
2、固定相極性比流動相高
3、采用己烷、異丙醇等有極性差異的有機溶劑的混合溶液作流動相
4、流動相極性越高，洗脫力越強
四、配位體交換法(LEX)
1、根據(jù)絡(luò)合原理分離
2、采用與磺基配位金屬離子的固定相
3、組合使用尺寸排阻法和親水性相互作用法分離機制
五、離子排阻法(IEX)
1、根據(jù)離子交換體和離子溶質(zhì)的靜電相互作用(排斥)進行分離
2、離子化較早洗脫，非離子化物質(zhì)較晚洗脫
3、主要適用于有機酸的分析
六、離子色譜法(IC)
1、根據(jù)離子交換體和離子溶質(zhì)的靜電相互作用(結(jié)合)分離
2、因為使用低濃度的流動相，可以使用電導檢測器
3、主要適用于無機離子的分析
七、尺寸排阻法(SEC)
1、利用高分子填料的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)或細孔的分子篩作用來分離
2、基于尺寸排阻色譜法來分離，必須在填料與樣品分子間無相互作用力的條件下測試
3、樣品中的成分按照分子尺寸從大到小的順序洗脫
4、適用于高分子化合物的分子量測定、分子量分布測定及低聚物的組成分析等
八、離子交換法(IEC)
1、根據(jù)離子交換體和離子溶質(zhì)的靜電相互作用(結(jié)合)進行分離
2、采用在分析試樣電荷差最大的pH下具有充分緩沖能力的緩沖液作流動相
3、可通過流動相的pH、鹽濃度或離子強度來調(diào)節(jié)樣品的洗脫位置
九、疏水性相互作用法(HIC)
1、根據(jù)疏水性相互作用進行分離
2、固定相鍵合疏水性基團
3、通常情況下高鹽濃度下吸附，鹽濃度降低后洗脫
4、主要適用于蛋白質(zhì)的分析
十、親和色譜法(AFC)
1、根據(jù)生物的分子識別能力來分離
2、有很高的選擇性
3、采用相互作用及配位體種類、pH、離子強度適合分析樣品的緩沖液
4、主要適用于生理活性物質(zhì)的凈化和濃縮
十一、手性分離法(CS)
1、根據(jù)手性分子識別能力的不同來分離
2、有很高的選擇性
十二、復合模式
1、支持復合分離模式分離
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