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倒置顯微鏡的原理結(jié)構(gòu)是怎樣的呢及操作規(guī)程

時(shí)間:2020-04-14    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

倒置顯微鏡的原理結(jié)構(gòu)是怎樣的呢

    倒置顯微鏡組成和普通顯微鏡一樣,只不過物鏡與照明系統(tǒng)顛倒,前者在載物臺之下,后者在載物臺之上,用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞,具有相差物鏡。


    倒置顯微鏡的原理


    組成和普通顯微鏡一樣,只不過物鏡與照明系統(tǒng)顛倒,前者在載物臺之下,后者在載物臺之上,用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞,具有相差物鏡。


    倒置顯微鏡和放大鏡起著同樣的作用,就是把近處的微小物體成一放大的像,以供人眼觀察。只是顯微鏡比放大鏡可以具有更高的放大率而已。


    物體位于物鏡前方,離開物鏡的距離大于物鏡的焦距,但小于兩倍物鏡焦距。所以,它經(jīng)物鏡以后,必然形成一個(gè)倒立的放大的實(shí)像A'B'。 A'B'靠近F2的位置上。再經(jīng)目鏡放大為虛像A''B''后供眼睛觀察。目鏡的作用與放大鏡一樣。所不同的只是眼睛通過目鏡所看到的不是物體本身,而是物體被物鏡所成的已經(jīng)放大了一次的像。

 


    結(jié)構(gòu)


    倒置顯微鏡的構(gòu)造主要分為三部分:機(jī)械部分、照明部分和光學(xué)部分。


    機(jī)械部分


    ⑴鏡座:是顯微鏡的底座,用以支持整個(gè)鏡體。


    ⑵鏡柱:是鏡座上面直立的部分,用以連接鏡座和鏡臂。


    ⑶鏡臂:一端連于鏡柱,一端連于鏡筒,是取放顯微鏡時(shí)手握部位。


    ⑷鏡筒:連在鏡臂的前上方,鏡筒上端裝有目鏡,下端裝有物鏡轉(zhuǎn)換器。


    ⑸物鏡轉(zhuǎn)換器(旋轉(zhuǎn)器):接于棱鏡殼的下方,可自由轉(zhuǎn)動,盤上有3-4個(gè)圓孔,是安裝物鏡部位,轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,可以調(diào)換不同倍數(shù)的物鏡,當(dāng)聽到碰叩聲時(shí),方可進(jìn)行觀察,此時(shí)物鏡光軸恰好對準(zhǔn)通光孔中心,光路接通。


    ⑹鏡臺(載物臺):在鏡筒下方,形狀有方、圓兩種,用以放置玻片標(biāo)本,中央有一通光孔,我們所用的顯微鏡其鏡臺上裝有玻片標(biāo)本推進(jìn)器(推片器),推進(jìn)器左側(cè)有彈簧夾,用以夾持玻片標(biāo)本,鏡臺下有推進(jìn)器調(diào)節(jié)輪,可使玻片標(biāo)本作左右、前后方向的移動。


    ⑺調(diào)節(jié)器:是裝在鏡柱上的大小兩種螺旋,調(diào)節(jié)時(shí)使鏡臺作上下方向的移動。


    ①粗調(diào)節(jié)器(粗螺旋):大螺旋稱粗調(diào)節(jié)器,移動時(shí)可使鏡臺作快速和較大幅度的升降,所以能迅速調(diào)節(jié)物鏡和標(biāo)本之間的距離使物象呈現(xiàn)于視野中,通常在使用低倍鏡時(shí),先用粗調(diào)節(jié)器迅速找到物象。


    ②細(xì)調(diào)節(jié)器(細(xì)螺旋):小螺旋稱細(xì)調(diào)節(jié)器,移動時(shí)可使鏡臺緩慢地升降,多在運(yùn)用高倍鏡時(shí)使用,從而得到更清晰的物象,并借以觀察標(biāo)本的不同層次和不同深度的結(jié)構(gòu)。


    照明部分


    裝在鏡臺下方,包括反光鏡,集光器。


    ⑴反光鏡:裝在鏡座上面,可向任意方向轉(zhuǎn)動,它有平、凹兩面,其作用是將光源光線反射到聚光器上,再經(jīng)通光孔照明標(biāo)本,凹面鏡聚光作用強(qiáng),適于光線較弱的時(shí)候使用,平面鏡聚光作用弱,適于光線較強(qiáng)時(shí)使用。


    ⑵集光器(聚光器)位于鏡臺下方的集光器架上,由聚光鏡和光圈組成,其作用是把光線集中到所要觀察的標(biāo)本上。


    ①聚光鏡:由一片或數(shù)片透鏡組成,起匯聚光線的作用,加強(qiáng)對標(biāo)本的照明,并使光線射入物鏡內(nèi),鏡柱旁有一調(diào)節(jié)螺旋,轉(zhuǎn)動它可升降聚光器,以調(diào)節(jié)視野中光亮度的強(qiáng)弱。


    ②光圈(虹彩光圈):在聚光鏡下方,由十幾張金屬薄片組成,其外側(cè)伸出一柄,推動它可調(diào)節(jié)其開孔的大小,以調(diào)節(jié)光量。


    光學(xué)部分


    ⑴目鏡:裝在鏡筒的上端,通常備有2-3個(gè),上面刻有5×、10×或15×符號以表示其放大倍數(shù),一般裝的是10×的目鏡。


    ⑵物鏡:裝在鏡筒下端的旋轉(zhuǎn)器上,一般有3-4個(gè)物鏡,其中zui短的刻有"10×"符號的為低倍鏡,較長的刻有"40×"符號的為高倍鏡,zui長的刻有"100×"符號的為油鏡,此外,在高倍鏡和油鏡上還常加有一圈不同顏色的線,以示區(qū)別。


    顯微鏡的放大倍數(shù)是物鏡的放大倍數(shù)與目鏡的放大倍數(shù)的乘積,如物鏡為10×,目鏡為10×,其放大倍數(shù)就為10×10=100。

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倒置顯微鏡 倒置顯微鏡的原理結(jié)構(gòu)是怎樣的呢_倒置顯微鏡

倒置顯微鏡的一些注意事項(xiàng)

  倒置顯微鏡和放大鏡起著同樣的作用,就是把近處的微小物體成一放大的像,以供人眼觀察。只是顯微鏡比放大鏡可以具有更高的放大率而已。

  物體位于物鏡前方,離開物鏡的距離大于物鏡的焦距,但小于兩倍物鏡焦距。所以,它經(jīng)物鏡以后,必然形成一個(gè)倒立的放大的實(shí)像A'B'。A'B'靠近F2的位置上。再經(jīng)目鏡放大為虛像A''B''后供眼睛觀察。目鏡的作用與放大鏡一樣。所不同的只是眼睛通過目鏡所看到的不是物體本身,而是物體被物鏡所成的已經(jīng)放大了一次的像。

  倒置顯微鏡的一些注意事項(xiàng):

  1、顯微鏡應(yīng)安裝在堅(jiān)固、水平的桌面上。

  2、在使用顯微鏡觀察樣品后,要對接觸樣品部分進(jìn)行清潔,防止造成污染。

  3、更換燈泡時(shí),避免被電擊和燒傷,請把主開關(guān)設(shè)在關(guān)O(off)的位置,然后斷開電源。若在使用中或使用后需要更換燈泡,請必須在燈及燈箱冷卻后進(jìn)行更換,將燈箱從聚光鏡座上面拔下,取下壞的燈泡,更換符合要求的燈泡,否則會降低儀器光學(xué)性能。

  4、在設(shè)備使用完或者出現(xiàn)不正常的時(shí)候,應(yīng)該從插座上拔掉設(shè)備電源。

  5、顯微鏡通電時(shí)千萬不要打開顯微鏡的下底板,否則顯微鏡內(nèi)部的電器元件可能會因外露而導(dǎo)致觸電危險(xiǎn)。更換顯微鏡照明燈泡或者保險(xiǎn)絲之前,一定要關(guān)閉顯微鏡主電源并將主電源線從電源插座中拔出。否則可能會導(dǎo)致觸電。

  6、請不要將乙醇、汽油、紙張等易燃物靠近燈泡,以防引起火災(zāi)。

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倒置顯微鏡 倒置顯微鏡的一些注意事項(xiàng)_倒置顯微鏡

倒置顯微鏡選擇上要考慮的因素

  我想大部分用戶都關(guān)心選擇什么樣的顯微鏡才是我真正需求的顯微鏡,現(xiàn)在我們主要爭對倒置顯微鏡來說,如果一般用戶用的樣品是在細(xì)胞培養(yǎng)板里的或者培養(yǎng)皿的(比如你問題中提到的96孔板)因?yàn)榘逵幸欢ǖ暮穸?,如果這個(gè)厚度大于你放大倍數(shù)所要求的物距,物鏡無法靠近樣品,無法觀察。這個(gè)時(shí)候你就要考慮用倒置顯微鏡了,因?yàn)榈怪蔑@微鏡的優(yōu)點(diǎn)在于,從上到下的順序依次是、樣品,載物臺,物鏡。這樣物鏡可以很接近樣品而不會受樣品厚度的限制。

  那客戶最關(guān)心倒置顯微鏡的哪些內(nèi)容呢!

  首先講講倒置顯微鏡的主要幾個(gè)部分,也是客戶在選擇上要考慮的因素

  1、光學(xué)部分

  顯微鏡質(zhì)量的核心就是其光學(xué)部分,也就是目鏡和物鏡部分。對于物鏡來說,一般可以分為幾個(gè)級別。首先是消色差物鏡,使用這種物鏡,不是成像所有的地方都清晰,只有視野中央60%左右的范圍清晰,外周40%部分會存在一定的缺陷。通常我們會把觀察部分放在視野中央,所以并不影響觀察。但是如果你想要100%視野沒有缺陷的話,就要用平場消色差物鏡,相對而言,這種的價(jià)格就會高很多,一般是用在醫(yī)療和科研方面。還有就是介于兩者之間的,也就是半平場消色差物鏡。學(xué)生用的顯微鏡選擇前面兩個(gè)級別就可以了。一般的便宜點(diǎn)的物鏡均為普通的消色差物鏡,成交價(jià)格都在9千元左右。好點(diǎn)的就復(fù)消色差物鏡或是無限遠(yuǎn)消色差物鏡,成交價(jià)格在1萬多元左右。如果是三目的價(jià)格還更高幾千元。所以用戶選購目鏡就比較簡單,就是看其視野的大小,推薦用大視野的目鏡,因?yàn)榇笠曇暗哪跨R相對與一般的具有更大開口,視覺效果更好。不過正常情況下選擇倒置顯微鏡客戶用三目的比較多。

  2、結(jié)構(gòu)材料

  比如說顯微鏡的機(jī)身結(jié)構(gòu),顯微鏡的使用壽命很長,有些可以達(dá)到10年以上,那么高質(zhì)量的零部件和嚴(yán)密的裝配就成為其使用壽命的保證。因此,應(yīng)選擇具有穩(wěn)固結(jié)實(shí)鏡架的顯微鏡,材質(zhì)建議選擇是合金的,可以減少變形。另外載物臺的大小也很重要,一般載物臺越大的顯微鏡價(jià)格相對會高一些,因?yàn)檩d物臺大一些可以放比較大的樣口,觀察的面積比較大一點(diǎn),移動它樣品比較方便觀察臨床實(shí)驗(yàn)室

  3、光源部分

  顯微鏡觀察可以有明場、暗場、偏光、相差,熒光等光源,不同功能顯微鏡分別用不同的觀察方式,而且作用也不同

  明場像(BF)、選用直射電子形成的像(透射束),像清晰。一般明場光源是最普通的光源

  暗場像(DF)、選用散射電子形成的像(衍射束),像有畸變、分辨率低。

  暗場光源很多客戶比較不明白,我在這里更加深入的說明暗場觀察針對具體暗場特性的物質(zhì)、暗視野觀察(Dark field)、暗視野實(shí)際是暗場照明發(fā)。它的特點(diǎn)和明視野不同,不直接觀察到照明的光線,而觀察到的是被檢物體反射或衍射的光線。因此,視場成為黑暗的背景,而被檢物體則呈現(xiàn)明亮的象。

  暗視野的原理是根據(jù)光學(xué)上的丁道爾現(xiàn)象,微塵在強(qiáng)光直射通過的情況下,人眼不能觀察,這是因?yàn)閺?qiáng)光繞射造成的。若把光線斜射它,由于光的反射,微粒似乎增大了體積,為人眼可見。暗視野觀察所需要的特殊附件是暗視野聚光鏡。它的特點(diǎn)是不讓光束由下至上的通過被檢物體,而是將光線改變途徑,使其斜射向被檢物體,使照明光線不直接進(jìn)入物鏡,利用被檢物體表面反射或衍射光形成的明亮圖象。暗視野觀察的分辨率遠(yuǎn)高于明視野觀察,較高達(dá)0.02—0.004偏光用于研究所謂透明與不透明各向異性材料的一種光源。凡具有雙折射的物質(zhì),在偏光觀察下就能分辨的清楚,當(dāng)然這些物質(zhì)也可用染色法來進(jìn)行觀察,但有些則不可能,而必須利用偏光。一般偏光顯微鏡全家的5~8千,貴的則兩三萬,還有購買偏光顯微鏡的建議采用單色光,因?yàn)楣獾乃俣?,折射率,和干涉現(xiàn)象由于波長的不同而有差異。一般鏡檢可使用普通光。至于相差光源前面已經(jīng)做過介紹。

  熒光光源、是利用一定波長的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光,通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像,因此熒光光源大多數(shù)還是熒光顯微鏡上用的比較多。

  4、倒置顯微鏡的目數(shù)

  倒置顯微鏡正??蛻粲萌康谋容^多,其實(shí)就是雙目的,單目的基本上在倒置顯微鏡上用的很少,應(yīng)該說幾乎沒有,因此很多國內(nèi)的廠家都只有生產(chǎn)雙目和三目和,一般雙目的倒置顯微鏡和三目的倒置顯微鏡價(jià)格相差在2千元左右。

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