酶標(biāo)儀（MicroplateReader）是對(duì)酶聯(lián)免疫檢測(cè)（EIA）實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的，反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示，通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測(cè)抗體或抗原的濃度。
酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗(yàn)、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中，特別在近幾年中，由于大量的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用，使得酶標(biāo)儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來越廣泛，同時(shí)促進(jìn)了生殖健康技術(shù)水平提高。
目前國內(nèi)許多計(jì)生站系統(tǒng)開展了酶免檢測(cè)項(xiàng)目，如：乙肝五項(xiàng)、艾滋病檢測(cè)、優(yōu)生優(yōu)育系列檢測(cè)、激素檢測(cè)等。過去多數(shù)采用目測(cè)方法，報(bào)出的結(jié)果缺乏科學(xué)的依據(jù)。例如：某弓形蟲檢測(cè)試劑盒中，臨界值規(guī)定為：陰性對(duì)照品的OD值×2.5，通過目測(cè)無法判斷標(biāo)本孔的反應(yīng)顏色是否超過臨界值。肉眼進(jìn)行兩孔之間的顏色比較可能還行，但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。
國內(nèi)多家權(quán)威機(jī)構(gòu)，如衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心和計(jì)劃生育系統(tǒng)等多次強(qiáng)調(diào)酶標(biāo)儀的重要性，并要求酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑應(yīng)使用酶標(biāo)儀判讀，酶免試劑的質(zhì)控也應(yīng)使用酶標(biāo)儀，并提供酶標(biāo)儀測(cè)定的原始數(shù)據(jù)，而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測(cè)的。同時(shí)酶免檢測(cè)的項(xiàng)目往往是一些實(shí)質(zhì)性的感染和病變（如：肝炎、艾滋病、優(yōu)生優(yōu)育等），判讀更要求嚴(yán)謹(jǐn)，由誤診引起的糾紛很難處理。另外，住院手術(shù)病人術(shù)前的丙肝、艾滋等EIA試劑檢測(cè)是避免因輸血引起感染引發(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段，正逐漸被許多單位所采用。
酶標(biāo)儀在臨床實(shí)驗(yàn)方面應(yīng)用廣泛，用于鑒別乙肝兩對(duì)半，HIV，鑒定DNA等許多方面，可以說它是臨床及醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)不可或缺的基礎(chǔ)設(shè)備。
故障一：測(cè)量的結(jié)果重現(xiàn)性不好，即使用空板測(cè)量誤差也在允許的范圍之外。
故障分析：檢查試劑發(fā)現(xiàn)沒有問題，檢查判定公式也沒有問題，檢查光路也沒有污染。幾經(jīng)周折終于發(fā)現(xiàn)卡微板的卡簧在伸縮后沒有卡到位，造成微板在測(cè)量時(shí)在機(jī)內(nèi)晃動(dòng)影響測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)。
故障二：測(cè)量結(jié)果OD值偏低。
故障分析：排除完燈的能量值偏低后，檢查發(fā)現(xiàn)濾光片上有灰塵，用蒸餾水和擦鏡紙擦洗干凈晾干后故障排除。
測(cè)試方法：酶標(biāo)儀的儀器指標(biāo)在蕞佳狀態(tài)，就儀器的精度測(cè)試和儀器的線性度介紹幾種測(cè)試方法。
精度測(cè)試：該過程可被用于檢測(cè)不同微板之間的測(cè)量精度。
使用新制備的在0.1％ TWEEN20中的橘黃色甲基填充微孔，在每個(gè)微孔中使用不同稀釋度的溶劑以便獲得一個(gè)光密度范圍，首先確保每孔注入200mL液體，使用492nm慮光片測(cè)量至少3次，對(duì)每一微孔進(jìn)行下列計(jì)算：
(1)平均OD值；(2)蕞高和蕞低值；(3)平均值。蕞高和蕞低值之間的差值和百分比。讀數(shù)范圍在0．000到2．000Abs。同一孔平均值，蕞高值和蕞低值之間的差值應(yīng)該在+／一1．0％和+／一0．010OD范圍內(nèi)。
讀數(shù)范圍在2．000到3．000Abs同一孔平均值，蕞高和蕞低值之間的差值應(yīng)在+／一1．0％ 和+／一0．005OD值范圍內(nèi)。讀數(shù)范圍在3．000Abs以上時(shí)準(zhǔn)確度不符合要求。
酶標(biāo)儀儀器線性度：儀器的線性度可使用一種溶劑的稀釋系列得到。如可在492 nIn處測(cè)量在0．1％TWEEN20中的橘黃色甲基的稀釋系列。
具體方法如下：在參考光密度計(jì)上測(cè)量被稀釋的溶劑，畫出OD值對(duì)已知濃度的點(diǎn)圖，并畫出通過這些點(diǎn)的蕞好的直線。將從系列稀釋中測(cè)得的吸光度值與該圖比較從而計(jì)算出各稀釋度的濃度。微板中每種稀釋度加入250t,-L，對(duì)每種稀釋至少使用兩個(gè)樣本，以便降低因加樣引起的誤差。 測(cè)量微板使用精確測(cè)量模式，利用測(cè)量得到的平均OD值和每個(gè)樣本的已知濃度畫一條OD濃度的曲線，從系列稀釋中測(cè)得的吸光值與該曲線比較從而計(jì)算出各稀釋度的濃度。
對(duì)光度記和本儀器，比較計(jì)算的濃度，不準(zhǔn)確度不應(yīng)大于以下，使用標(biāo)準(zhǔn)濾光片492nm時(shí)吸光度在0．000～2．000Abs+／一1％、2．000～3．000Abs+／一1．5％。使用梯度濾光片492nm時(shí)，吸光度在0．000～2．500Abs+／一2％。
酶標(biāo)儀需要用到試劑耗材，常用的微孔板是一種經(jīng)事先包埋專用于放置待測(cè)樣本的透明塑料板，板上有多排大小均勻一致的小孔，孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體，微孔板上每個(gè)小孔可盛放零點(diǎn)幾毫升的溶液。隨著檢測(cè)方式的發(fā)展，擁有多種檢測(cè)模式的單體臺(tái)式酶標(biāo)儀叫做多功能酶標(biāo)儀，可檢測(cè)吸光度（Abs)、熒光強(qiáng)度(FI)、時(shí)間分辨熒光（TRF)、熒光偏振（FP)、和化學(xué)發(fā)光（Lum)。
酶標(biāo)儀技術(shù)參數(shù)：
吸光值范圍 0.000-4.000Abs
精確度：±0.008A
重復(fù)性：≤0.2%
微孔板類型：96孔板
濾光片個(gè)數(shù)：較多可支持10個(gè)
波長范圍：330-1100nm （PT-3502A、PT-3502B、PT-3502G、PT-3502PC等）
動(dòng)力學(xué)范圍 0-4.0OD
儀器會(huì)自動(dòng)對(duì)酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位，中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測(cè)的不準(zhǔn)確。在對(duì)每一個(gè)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，儀器其實(shí)要進(jìn)行35個(gè)點(diǎn)的測(cè)量，選取最中間的5個(gè)點(diǎn)的均值為本孔的OD值。酶標(biāo)儀從原理上可以分為光柵型酶標(biāo)儀和濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型酶標(biāo)儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的任意波長，而濾光片型酶標(biāo)儀則根據(jù)選配的濾光片，只能截取特定波長進(jìn)行檢測(cè)。國產(chǎn)酶標(biāo)儀現(xiàn)在一般都屬于濾光片式的酶標(biāo)儀！
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