大豆異黃酮是大豆生長(zhǎng)過(guò)程中形成的一類(lèi)次級(jí)代謝產(chǎn)物。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),大豆異黃酮對(duì)人體具有多種生理功能,可預(yù)防骨質(zhì)疏松癥,作為雌性激素替代品改善女性更年期綜合癥、降低絕經(jīng)婦女的血脂水平,還具有抗菌、降低患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)、預(yù)防前列腺癌等多種功能,是一種很有潛力的癌癥化學(xué)預(yù)防劑。
大豆異黃酮含量的測(cè)定方法較多,如:紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法等。紙色譜法、薄層色譜法存在定量不準(zhǔn)確,分離效果差等不足;氣相色譜法操作較繁瑣,容易受雜質(zhì)干擾;HPLC法能較準(zhǔn)確地檢測(cè)幾種主要類(lèi)型的大豆異黃酮,但設(shè)備運(yùn)行費(fèi)用較高,檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng),特別是在摸索提取工藝條件過(guò)程中需要多次及時(shí)地檢測(cè)提取物只能大豆異黃酮的含量,不利于生產(chǎn)上大規(guī)模操作,因此尋找一種大豆異黃酮的快速測(cè)定方法顯得尤為重要。
儀器準(zhǔn)備
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)采用全新設(shè)計(jì)的比例監(jiān)測(cè)雙光束學(xué)系統(tǒng),具有優(yōu)良的光學(xué)性能,使用方便,是實(shí)驗(yàn)室分析必備的基本儀器之一。
樣品液的制備:
新鮮豆渣在60℃條件下鼓風(fēng)干燥48h至恒重,過(guò)20目篩,用石油醚脫脂24h,去除濾液,烘干濾渣。采用超聲波法提取豆渣中大豆異黃酮,稱(chēng)取已處理豆渣粉5.0g(過(guò)20目篩),溶于40mL80%的乙醇溶液中,提取溫度60℃,超聲提取時(shí)間為30min,提取液過(guò)濾,置于50mL容量瓶中,95%乙醇定容至刻度。
測(cè)定結(jié)果:
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)應(yīng)用于各種涉及水和廢水分析領(lǐng)域的通用儀器,應(yīng)用范圍包括市政和工業(yè)廢水、飲用水、加工過(guò)程用水、地表水、冷卻水和鍋爐補(bǔ)給水等。
豆渣是大豆加工中的副產(chǎn)物之一,產(chǎn)量豐富,目前主要是當(dāng)作飼料用或肥料處理掉,利用率極低。研究表明,豆渣中同樣含有異黃酮,作為黃酮醇類(lèi)化合物,大豆異黃酮在紫外光區(qū)有較強(qiáng)吸收?,F(xiàn)基于超聲波輔助提取法對(duì)豆渣中的大豆異黃酮提取物中的大豆異黃酮含量,以期為豆渣資源的綜合利用提供一定的參考。
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)是由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成。光源的功能是提供足夠強(qiáng)度的、穩(wěn)定的連續(xù)光譜。
紫外光區(qū)通常用氫燈或氘燈.見(jiàn)光區(qū)通常用鎢燈或鹵鎢燈。單色器的功能是將光源發(fā)出的復(fù)合光分解并從中分出所需波長(zhǎng)的單色光。色散元件有棱鏡和光柵兩種。
日常維護(hù)
要懂得分析儀器的日常維護(hù)和對(duì)主要技術(shù)指標(biāo)的簡(jiǎn)易測(cè)試方法,經(jīng)常對(duì)儀器進(jìn)行維護(hù)和測(cè)試,以保證儀器工作狀態(tài)。
1.溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。
他們可以引起機(jī)械部件的銹蝕,使金屬鏡面的光潔度下降,引起儀器機(jī)械部分的誤差或性能下降;造成光學(xué)部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕,產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等,甚至儀器停止工作,從而影響儀器壽命。
維護(hù)保養(yǎng)時(shí)應(yīng)定期加以校正。應(yīng)具備四季恒濕的儀器室,配置恒溫設(shè)備,特別是地處南方地區(qū)的實(shí)驗(yàn)室。
2.環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體也會(huì)影響機(jī)械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開(kāi)關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性,也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一。因此必須定期清潔,保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件,防塵等。
3.儀器使用一定周期后,內(nèi)部會(huì)積累一定量的塵埃,由維修工程師或在工程師指導(dǎo)下定期開(kāi)啟儀器外罩對(duì)內(nèi)部進(jìn)行除塵工作;
同時(shí)將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固,對(duì)光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔,必要時(shí)對(duì)光路進(jìn)行校準(zhǔn),對(duì)機(jī)械部分進(jìn)行清潔和必要的潤(rùn)滑,恢復(fù)原狀,再進(jìn)行一些必要的檢測(cè)、調(diào)校與記錄。
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)主要由電光系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、光電系統(tǒng)、電子系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理、輸出打印系統(tǒng)等幾個(gè)部分組成。
1、電光系統(tǒng):
電光系統(tǒng)主要由氘燈、鎢燈和相應(yīng)的電源組成。電光系統(tǒng)對(duì)整機(jī)的穩(wěn)定性有很大的影響,是儀器不穩(wěn)定的主要原因之一。
2、光學(xué)系統(tǒng):
光學(xué)系統(tǒng)包括外光路系統(tǒng)(轉(zhuǎn)向平面鏡、聚光鏡)、單色器兩個(gè)主要部分;其中,外光路和單色器各有很多類(lèi)型。單色器是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)雜散光的主要來(lái)源,是整機(jī)使用時(shí),主要分析誤差的來(lái)源之一。
3、光電系統(tǒng):
夕光電系統(tǒng)是將光信號(hào)變?yōu)殡娦盘?hào)的關(guān)鍵部件,直接影響儀器的靈敏度和適用范圍;一般有光電管、光電倍增管、硅光電池、二極管陣列等。
4、電子系統(tǒng):
電子系統(tǒng)主要由放大器、A/D變換器等組成;其中的放大器,也是影響整機(jī)靈敏度、穩(wěn)定性的主要部件。它又是儀器噪聲的主要來(lái)源部件,直接影響紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的分析誤差。
5、數(shù)據(jù)處理、輸出打印系統(tǒng):
數(shù)據(jù)處理、輸出打印系統(tǒng)是決定整機(jī)的自動(dòng)化程度的關(guān)鍵部件;特別是軟件部分,直接影響紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的質(zhì)量。