色譜柱破裂
熔融石英毛細(xì)管柱的聚酰亞胺涂層如有少許破裂它就會斷裂，聚酰亞胺涂層保護(hù)著脆弱的熔融石英毛細(xì)管，柱箱連續(xù)地加熱和冷卻，柱箱風(fēng)扇的震動，把色譜柱繞在圓形柱架上都會對毛細(xì)管造成應(yīng)力，最后在很小的弱點處會破裂，聚酰亞胺涂層形成的劃痕或磨損處會造成弱點，當(dāng)利刃或薄片觸及毛細(xì)管時常會造成劃痕，色譜柱掛鉤和標(biāo)簽、柱箱中的金屬邊緣、色譜柱切割器和實驗室實驗臺上各種類似的東西都是利刃或薄片的來源。
色譜柱自身破裂的情況很少，色譜柱制造業(yè)注意剔除任何有弱點的柱子，以免使色譜柱的完美性受到影響，大內(nèi)徑柱更容易破裂。
熱損壞
超過色譜柱的溫度上限會造成色譜柱固定相和管表面的加速損壞，這樣會造成色譜柱的過量流失，活性組分形成拖尾，柱效降低。因此，在色譜柱明顯的損壞以前于溫度極限以上運(yùn)行需較長時間，當(dāng)有氧存在時會大大加速熱損壞，在有泄漏或過加熱加溫色譜柱會加速損壞并永久性損壞色譜柱。
設(shè)定GC的最高柱溫在色譜柱高溫極限或稍高于這一極限是可以避免熱損壞的方法，這樣可避免色譜柱意外的過熱，如果色譜柱受到熱損失，它仍然還會有一定的功能。把色譜柱從檢測器上卸下來，在極限的恒溫溫度下加熱8-16小時，把色譜柱接到檢測器的一端截去10-375px，按正常情況安裝色譜柱并進(jìn)行老化。但是這一色譜柱不能恢復(fù)到原來的性能，可是常常仍具有一定的功能，在熱損壞之后色譜柱的壽命會縮短。
氧損壞
在近于室溫下不會對色譜柱有損害，柱溫升高時會嚴(yán)重?fù)p壞色譜柱。通常對于極性固定相，發(fā)生嚴(yán)重?fù)p壞時的溫度和氧濃度都很低。長時間暴露在氧氣中是有問題的。短時間地暴露在氧氣中如注射空氣或拿掉隔墊螺帽時不會有什么問題。
在載氣通道上有泄漏的地方（如氣路、接頭、進(jìn)樣器）往往是進(jìn)入氧氣的源頭。當(dāng)色譜柱加熱時，就會很快損壞固定相，這就會過早地引起色譜柱的過度流失、活性化合物有拖尾、降低柱效。在不太嚴(yán)重的情況下色譜柱還會有一定的分離功能，但是性能已經(jīng)下降了。在嚴(yán)重的情況下這支色譜柱就完全不能使用了。
讓系統(tǒng)避免和氧接觸和避免泄漏是不受到氧損壞較為有效的方法，對GC系統(tǒng)的良好維護(hù)包括定期對管線和壓力調(diào)節(jié)器進(jìn)行檢漏、定期更換隔墊，使用高純度載氣、安裝氧捕集以及不要等載氣鋼瓶用空了再進(jìn)行更換。
化學(xué)損壞
有相當(dāng)少數(shù)化合物會使固定相遭到破壞，不揮發(fā)性化合物（高分子量或高沸點）進(jìn)入色譜柱常常會降低色譜柱的性能，但是不會破壞固定相。這些沉積的殘留物可以用溶劑沖洗色譜柱而除去以恢復(fù)色譜柱的性能。
要避免進(jìn)入色譜柱的主要化合物是無機(jī)或礦物堿和酸，這類酸包括鹽酸、硫酸、硝酸和磷酸。堿包括氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化銨。這些酸和堿不揮發(fā)，積累在色譜柱前端。如果使其停留在那里就會破壞固定相，使色譜柱過早地大量流失、使活性化合物拖尾、柱效降低。其征兆和熱損失及氧損壞類似。
由于化學(xué)損失奪發(fā)生在色譜柱的前端，所以處理或把色譜柱前端切掉0,5—1m可消除任何色譜方面的故障，在比較嚴(yán)重的情況下，可以截去5m或更長的一段。如果使用保護(hù)柱就會減小色譜柱被損壞的長度，但是需要處理保護(hù)柱，酸或堿常常會破壞熔融石英管的去活表面，因而會引起活性化合物的峰型變壞。
色譜柱被污染
有兩種基本類型的污染物：不揮發(fā)性污染和半揮發(fā)性污染物，不揮發(fā)性污染物或殘留物不能從色譜柱里洗脫出來，而是累積在色譜柱里，這樣它就成為涂漬了殘留物的色譜柱，因而影響溶質(zhì)的分配，即溶質(zhì)溶入和蒸發(fā)出固定相的正常分配，而且殘留物還會和活性化合物相互作用，引起峰的吸附問題（甚至造成拖尾或減少峰面積）。活性溶質(zhì)是指那些含有羥基或氨基和一些硫醇基及醛的物質(zhì)，半揮發(fā)性污染物或積累在色譜柱中的殘留物，最終會洗脫出去。但需要幾個小時或幾天才完全洗脫出來，和不揮發(fā)性殘留物一樣，它們也會引起峰形變壞和峰面積減小的問題，此外，常常引起很多基線的問題（不穩(wěn)定、漂移、噪音、鬼峰等）。
污染物的來源
污染物的來源有許多，其中進(jìn)樣是主要的來源。萃取自最差基體的樣品，生物液體和組織、土壤、廢水等類似的含有大量半揮發(fā)和不揮發(fā)物質(zhì)的基體，甚至使用仔細(xì)及徹底的萃取方法，樣品也會含有少許這些物質(zhì)并帶到注射樣品中。幾次到幾百次進(jìn)樣會造成殘留物的積累故障，進(jìn)樣技術(shù)如柱上進(jìn)樣、不分流進(jìn)樣和大口徑柱直接進(jìn)大量樣品到色譜柱中，這些進(jìn)樣方法常常會造成色譜柱的污染。
保養(yǎng)措施
最大限度地減少半揮發(fā)性和不揮發(fā)性樣品殘留物是減少污染問題的可以方法，然而污染物的存在常常是不知道的。嚴(yán)格和徹底的凈化樣品是防止污染問題的可以辦法，使用保護(hù)柱可以減輕或推遲色譜柱受到污染的損害。如果色譜柱被污染了，可以的辦法是用溶劑進(jìn)行清洗除去污染物。建議不要使用長時間加熱的方法來處理受到污染的色譜柱。
高效液相色譜儀是進(jìn)行定量分析，雜質(zhì)檢查等分析工作中主要的精密儀器，色譜柱是液相色譜儀的zui核心部件。
在這里，介紹一下色譜柱使用中的注意事項及使用心得。
1、柱頭類型和不銹鋼毛細(xì)管接頭的匹配
色譜柱是消耗品，不是儀器原配的情況很多，如果接頭和柱頭深度匹配將會產(chǎn)生漏液或者死體積過大的現(xiàn)象。
接頭比柱頭深度長，不易擰緊而漏液；接頭比柱頭深度短，柱頭內(nèi)留有空隙而產(chǎn)生死體積，使譜帶展寬和峰拖尾。
2、溶劑的匹配轉(zhuǎn)換
色譜柱內(nèi)保存溶劑和儀器系統(tǒng)內(nèi)存留溶劑，如果和流動相不匹配，使用前需進(jìn)行轉(zhuǎn)換。
特別是流動村j含緩沖鹽時，如保存溶劑足純有機(jī)相或有機(jī)相比例高，直接將新柱接人使用，會導(dǎo)致緩沖鹽在柱內(nèi)結(jié)晶析出，造成柱頭堵塞。建議儀器和色譜柱經(jīng)常使用，用10％的有機(jī)溶劑保持即可。
3、流動相及待測樣品的過濾
日常分析工作中，我們使用的流動栩和待測樣品應(yīng)用0．45pm濾膜過濾后再連接或注入到色譜儀上。
對于有機(jī)相比例高的流動栩可以一起過濾出來備用，但是有機(jī)相比例小的流動相一定要現(xiàn)用現(xiàn)濾，分析結(jié)束時一定要先用10％的有機(jī)溶劑沖洗管路及色譜柱，為有機(jī)相少的流動相容易滋生細(xì)菌，造成色譜柱堵寒，影響色譜柱性能。
4、色譜柱分析時應(yīng)進(jìn)行平衡和老化
進(jìn)行的方法是運(yùn)行幾次完整的分析程序(包括進(jìn)樣)，直到觀察到峰形、保留時間和峰面積穩(wěn)定為止。對某些特定的待測物，如分子量大于1000的，閃擴(kuò)散速度慢，老化時間相應(yīng)要長，可采取大濃度進(jìn)樣或在同一個洗脫周期內(nèi)連續(xù)進(jìn)樣多針的方式加快老化。
5、pH使用范圍
一般認(rèn)為硅膠基質(zhì)柱子的pH使用范足2-8，如果選用的是高品質(zhì)硅膠，加上高密度鍵合和雙封尾，使pH耐受范同zui大提高到lO。
注射用頭孢拉定流動村1pH值為8，對色譜柱傷害很大，需要選擇pH值耐受性高的色譜柱。
6、峰形異常
峰形對稱性的優(yōu)劣對峰面積和分離度有很大的影響，從而影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。先檢查樣品足否過載，由于樣品過載引起的峰形后拖不能通過改變色譜條件消除。
如果發(fā)現(xiàn)過載，需降低進(jìn)樣量(包括進(jìn)樣體積或濃度)，進(jìn)樣量越小，峰形越好，例子如頭孢尼西鈉的測定。其次，硅醇基次級保留引起部分峰拖尾。
這種情況發(fā)生，選擇高密鍵合和徹底的雙蜂尾工藝的色譜柱能改善峰形。另外，溶解樣品的溶劑洗脫能力比流動相強(qiáng)會發(fā)生峰前延，所以樣品zui好選用流動相溶解。
7、色譜柱保存
短期保存(隔夜或隔周末)用所用的流動相(不含緩沖鹽)保存為佳，以盡量減少下次使用的平衡時間。
一般只建議在長期保存反相柱的時候用純醇或乙腈，使用80％左右有機(jī)相保存也屬好的選擇，且足以避免長菌。
強(qiáng)烈建議在柱身上貼標(biāo)簽標(biāo)明保存溶劑。離子交換柱和水性凝膠柱等適合保存在水溶液中的色譜柱，可加0．05％化鈉溶液防止K菌。正相柱無論是短期還足長期，都推薦保存住所用流動相巾。
色譜柱是色譜儀器中重要組成部分之一，它是分離不可缺少的一部分。因此不同的樣品分類，用到不同的色譜柱。
色譜柱可簡單分為以下幾類：
a、根據(jù)分離方式分為：
(1)正相色譜柱：SIL--磷脂、NH--糖、維生素E，CN--甾類激素。
(2)反相色譜柱：ODS(C18)、(C8CNTMSPheny1)低分子量化合物。
(3)離子交換色譜柱等。
b、根據(jù)所有的擔(dān)體材料分為三種：
(1)硅膠型：機(jī)械強(qiáng)度高，易制成小顆粒，理論塔板數(shù)高。
(2)聚合物型：在廣泛的PH值范圍內(nèi)穩(wěn)定。
(3)羥基磷灰石型：對蛋白質(zhì)等生物高分子樣品有特殊的選擇性。
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