電泳技術(shù)是分子生物學(xué)研究不可缺少的重要分析手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳兩大類,自由界面電泳不需支持物,如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類電泳目前已很少使用。而區(qū)帶電泳則需用各種類型的物質(zhì)作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠-G薄層等,分子生物學(xué)領(lǐng)域中常用的是瓊脂糖凝膠電泳。
下面簡(jiǎn)單介紹其使用方法及注意事項(xiàng)
1.首先用導(dǎo)線將電泳槽的兩個(gè)電極與電泳儀的直流輸出端聯(lián)接,注意極性不要接反。
2.電泳儀電源開關(guān)調(diào)至關(guān)的位置,電壓旋鈕轉(zhuǎn)到最小,根據(jù)工作需要選擇穩(wěn)壓穩(wěn)流方式及電壓電流范圍。
3.接通電源,緩緩旋轉(zhuǎn)電壓調(diào)節(jié)鈕直到達(dá)到的所需電壓為止,設(shè)定電泳終止時(shí)間,此時(shí)電泳即開始進(jìn)行。
4.工作完畢后,應(yīng)將各旋鈕、開關(guān)旋至零位或關(guān)閉狀態(tài),并撥出電泳插頭。
注意事項(xiàng):
1.電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應(yīng)先斷電,以免觸電。同時(shí)要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2.儀器通電后,不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。
3.由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,電泳時(shí)所通過的電流量也不同,其泳動(dòng)速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。
4.在總電流不超過儀器額定電流時(shí)(最大電流范圍),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5.某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時(shí),允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機(jī),但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開機(jī),否則電壓表指針將大幅度跳動(dòng),容易造成不必要的人為機(jī)器損壞。
6.使用過程中發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,以免發(fā)生意外事故。
電泳儀的輸出為何達(dá)不到設(shè)定值?
?、匐娪緝x的輸出狀態(tài)遵守“循歐姆定律”:電壓U=電流I×(電泳槽)電阻R相對(duì)不變的情況下,U、I、P(功率P=電流I×電壓U)中任意一個(gè)參數(shù)恒定,其他參數(shù)也隨之恒定;而任意一個(gè)參數(shù)變化,其他參數(shù)也隨之正比變化
?、谌绻娪緝x的輸出電壓U達(dá)不到預(yù)置值,應(yīng)首先觀察I或P是否已經(jīng)恒定,或者已經(jīng)達(dá)到電泳儀所規(guī)定的最大I或P(JY電泳儀均有明確指示燈標(biāo)志)。如果尚未達(dá)到極限值,將已經(jīng)恒定I或P的設(shè)置調(diào)大(有必要的話至極限值),才能夠提高電壓輸出;
?、廴绻娪緝x的電流I達(dá)不到預(yù)置值,可調(diào)整電壓U或功率P;
?、苋绻娪緝x的功率P達(dá)不到預(yù)置值,可調(diào)整電壓U或電流I。
所謂電泳,是指帶電粒子在電場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng),不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場(chǎng)中運(yùn)動(dòng)速度不同,根據(jù)這一特征,應(yīng)用電泳法便可以對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組份分析或單個(gè)組份提取制備,這在臨床檢驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)研究中具有極其重要的意義。電泳儀正是基于上述原理設(shè)計(jì)制造的。
基本電泳儀電源傳承了3500型和600型電源的優(yōu)秀品質(zhì),是小型垂直電泳槽和水平電泳槽的較佳組合。其具有的500ma大大電流和150w大功率,將使用范圍再度延伸和擴(kuò)大。經(jīng)濟(jì)實(shí)用的特性贏得了國(guó)內(nèi)外用戶的青睞。
電泳儀電源的使用方法:
首先用導(dǎo)線將電泳槽的兩個(gè)電極與電泳儀的直流輸出端聯(lián)接,注意極性不要接反。
電泳儀電源開關(guān)調(diào)至關(guān)的位置,電壓旋鈕轉(zhuǎn)到最小,根據(jù)工作需要選擇穩(wěn)壓穩(wěn)流方式及電壓電流范圍。
接通電源,緩緩旋轉(zhuǎn)電壓調(diào)節(jié)鈕直到達(dá)到的所需電壓為止,設(shè)定電泳終止時(shí)間,此時(shí)電泳即開始進(jìn)行。
工作完畢后,應(yīng)將各旋鈕、開關(guān)旋至零位或關(guān)閉狀態(tài),并撥出電泳插頭。
操作注意事項(xiàng)
電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應(yīng)先斷電,以免觸電。同時(shí)要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
儀器通電后,不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。
由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,電泳時(shí)所通過的電流量也不同,其泳動(dòng)速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。
在總電流不超過儀器額定電流時(shí)(最大電流范圍),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時(shí),允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機(jī),但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開機(jī),否則電壓表指針將大幅度跳動(dòng),容易造成不必要的人為機(jī)器損壞。
使用過程中發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,以免發(fā)生意外事故。
目前市面上的電泳儀規(guī)格非常多,我們要如何選購(gòu)一款適合自己的電泳儀呢?
下面來一起看下這些選購(gòu)技巧吧!
第一要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇相應(yīng)規(guī)格型號(hào)的電泳儀,才能確保經(jīng)濟(jì)、耐用、簡(jiǎn)單、合理。
第二目前市面上的電泳儀電源,按電壓分為高壓1500~5000V、中壓500~1500V、低壓500V以下三種;
按電流分為大電流500mA~2000mA、中電流100~500mA、小電流100mA以下三種;
按功率分為大功率200~400W、中功率60~200W、小功率60W以下三種。
因?yàn)楦?、中、低壓電泳儀內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征不同,由于高壓電泳儀常附加有多項(xiàng)功能;
而且高壓電泳儀絕不能空載運(yùn)行(容易造成人身傷害、內(nèi)部器件損壞),導(dǎo)致操作上難易程度的不同等。
第三從電壓的角度來看,用于核酸(瓊脂糖)水平電泳、PCR電泳、DNA回收、印跡轉(zhuǎn)移等實(shí)驗(yàn)只需最高電壓300V;
用于蛋白垂直電泳、種子純度電泳、醋酸纖維膜電泳等需要使用最高電壓600V左右的電泳儀;
用于DNA測(cè)序(SSR分子標(biāo)記)、等點(diǎn)聚焦電泳、雙向電泳等要求最高電壓3000V;用于DNA測(cè)序電泳(AFLP分子標(biāo)記)要求最高電壓3800V。
第四、輸出的所有參數(shù)根據(jù)其型號(hào)的不同都有一個(gè)特定的工作范圍,如果實(shí)際需要超過這一范圍,就應(yīng)當(dāng)選擇能夠滿足使用的另外型號(hào)的電泳儀電源。
因?yàn)楦?、低壓電泳儀內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征不同,由于高壓電泳儀常附加著多功能;
而且高壓電泳儀決不能空載運(yùn)行(容易造成人身傷害內(nèi)部器件損壞),導(dǎo)致操作上難易程度的不同等。因此,選用合適規(guī)格的電泳儀很重要。
第五、用戶如果需要一臺(tái)電泳儀電源帶幾個(gè)電泳槽工作時(shí),首先要確定總電流不要超過儀器的最大范圍;
其次各電泳儀之間是并聯(lián)的,因而每個(gè)電泳儀的電壓都是相同的,總電流為各電泳儀電流之和。
使用時(shí)注意不能超出電泳儀電源額定的范圍。
以上就是電泳儀選購(gòu)技巧的全部?jī)?nèi)容,不知道對(duì)您是否有所幫助!