造成柱壓升高的原因很多。一般是由于柱床內(nèi)產(chǎn)生了異常的占位性物體，造成流體阻力加大所引起的。
1、流動相過濾不良
因機械性雜質(zhì)堵塞進(jìn)口濾片，導(dǎo)致壓力升高。這往往是由于流動相沒有過濾，或雖已過濾但濾膜孔徑過大或濾片損壞，使固體雜質(zhì)滯留于濾板上所造成的。濕度傳感器探頭,不銹鋼電熱管PT100傳感器,鑄鋁加熱器,加熱圈流體電磁閥
2、霉菌生長
霉菌在流動相中、管路中或柱子進(jìn)口處繁殖、生長堵塞濾板，導(dǎo)致壓力升高。這種現(xiàn)象在夏季，尤其是使用磷酸鹽緩沖液為流動相時更易發(fā)生。在夏季使用磷酸鹽緩沖液時一般要現(xiàn)配現(xiàn)用。即使保存在冰箱中，一般也不要超過兩天。否則，即使不堵塞濾板，也會因細(xì)菌或霉菌孳生產(chǎn)生代謝物而造成對樣品分析的干擾。
3、非特異性吸附
當(dāng)溶質(zhì)在柱子上有較強的非特異性吸附，且當(dāng)前所用的流動相難以將它們洗脫時，累積的未洗脫溶質(zhì)也會造成阻力增大和壓力升高。
4、更換流動相時置換不徹底
當(dāng)改換流動相體系時，不徹底的更換使不同性質(zhì)、互不混溶的流動相存在于一個體系之中，也會造成壓力升高。
5、鹽晶體的析出
使用緩沖液或添加有緩沖液的流動相后，緩沖液中的無機鹽成份可能會殘留在體系之中。它們會因在新流動相體系中的溶解度降低而析出，造成流體阻力加大、壓力升高。
6、樣品的沉淀
當(dāng)樣品所使用的溶劑與流動相不一致時，樣品進(jìn)入柱中有時可能因溶解度降低而沉淀出來，造成壓力升高。
7、壓力脈沖
運行過程中，有時會產(chǎn)生系統(tǒng)內(nèi)壓力的突然升降。例如，轉(zhuǎn)動進(jìn)樣閥時動作過緩，造成液流堵塞后再瞬間釋放;開機瞬間壓差較高等。如此所形成的壓力脈沖會造成多孔填料的崩壞和柱床結(jié)構(gòu)的微小變化。填料微屑的長期積累也可能會使柱床阻力增大。
液相色譜柱，是一種用于液體色譜分析儀器的部件。那么我們該如何的去選擇液相色譜柱呢?
下面我們就一起來看看吧。
在選擇色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質(zhì)，他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等，液相色譜柱決定最終分離效果，所以在選擇色譜柱時候有必要考慮清楚自己的需求。
首先液相色譜柱目前來說分為正反相色譜柱，正相有SI等，反相有C18等。正相主要分離極性物質(zhì)，反相主要分離非極性物質(zhì)，氨基柱等主要分離二者之間的。
明確了色譜柱大概功能之后，確認(rèn)下自己樣品信息，基本就有點眉目了，方向?qū)α耍Ｏ碌氖虑榫褪羌?xì)節(jié)了如：鍵合相、粒徑、孔徑、碳載量等
1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測，即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
2.如果樣品極性太強，或酸性太強;可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，HILIC(親水色譜)，也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長；
對流動相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實驗，另外離子對試劑很難洗下來，基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)
3.若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì)，且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等)；
他們都會減少堿性化合物的拖尾，一般會選擇中性或偏堿的條件下做，因為這樣可增加堿性樣品的保留
4.如果堿性化合物的極性太強，或堿性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點是方法開發(fā)簡單；
缺點是目前實現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少，價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用；
這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱(缺點是不能用來分析其它樣品，對流動相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。
色譜柱是液相色譜儀的核心，在我們使用液相色譜儀的時候，保證液相色譜柱的柱效，延長色譜柱的使用壽命是很重要的事情，當(dāng)我們使用的時候色譜柱如果出息壓力過高或者過低等問題都是屬于柱壓問題。液相色譜柱如果壓力過高是因為柱子里面產(chǎn)生了雜質(zhì)，造成液體的流動力加大而所造成。下面為大家總結(jié)的幾個液相色譜柱的問題。
1、流動相的前處理：
流動相或楊平中雜質(zhì)堵塞色譜柱進(jìn)口濾片，導(dǎo)致壓力升高。這是由于流動相可能沒有過濾，或過濾不徹底，使固體雜質(zhì)滯留于濾板上所致。另一個方面也可能沒有使用預(yù)保護(hù)柱所致。
2、樣品的沉淀：
當(dāng)流動相與溶解樣品的溶劑不一致時，樣品進(jìn)入色譜柱時，可能因溶解度降低而沉淀出來吸附于柱內(nèi)，造成壓力升高。
3、晶體的析出：
使用含有緩沖液的流動相時，緩沖液中的無機鹽可能會殘留在體系之中，它們會因在新流動相中的溶解度降低而析出阻塞而壓力升高。
4、細(xì)菌或霉菌孳生：
流動相中、管路中或柱子進(jìn)口處繁殖、生長霉菌堵塞濾板，導(dǎo)致壓力升高。所以在使用磷酸鹽緩沖液時一般要現(xiàn)配現(xiàn)用。
5、溶質(zhì)吸附：
一些溶質(zhì)在色譜柱上有較強大的吸附力，洗脫時流動相也難以清除掉，累積的未洗脫溶質(zhì)也會造成阻力增大從而造成壓力升高。
6、流動相更換過度較快：
當(dāng)改變流動相體系時，不徹底的更換使不同性質(zhì)、互不混溶的流動相存在于同一個體系之中，也會造成壓力升高。
7、壓力脈沖：
運行過程中，有時會產(chǎn)生整個液相色譜儀系統(tǒng)內(nèi)壓力的突然升降。如泵壓力變化，此所形成的壓力脈沖會造成多孔填料的崩壞和柱床結(jié)構(gòu)的微小變化，填料微屑的長期積累也可能會使柱床阻力增大，造成壓力升高。
以上幾種出現(xiàn)壓升高的原因，下文提出的解決方法：
處理對于緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內(nèi)的情況先用40～50℃的純水,低速正向沖洗柱子,待柱壓逐漸下降后,相應(yīng)提高流速沖洗,柱壓大幅度下降后,用常溫純水沖洗,之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘；如果柱壓還是降不下來，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上，用流動相沖洗柱子。這時，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以盡量少用。
對于樣品污染沉積的情況,由樣品的沉積引起污染的C18柱,和純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定),再用換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。
液相色譜柱壓過低的現(xiàn)象一般是由于色譜系統(tǒng)泄漏造成的，其處理方法：尋找各個接口處，特別是色譜柱兩端的接口，把泄漏的地方旋緊即可。
另外還有一中可能是柱壓不穩(wěn)，忽高忽低，更嚴(yán)重一點會導(dǎo)致泵無法吸上液體，原因就是泵里進(jìn)了空氣。
處理方法：打開Purge閥，用3-5ml/min的流速沖洗，如果不行，則要用專用針筒在排空閥處借助外力吸出氣泡。
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