液相色譜儀出現(xiàn)進(jìn)樣閥引起的樣品殘留峰時(shí)，可以做如下操作：
進(jìn)樣空白溶液注射會(huì)產(chǎn)生前一次樣品溶液注射的峰，首先沖洗針管。然后按照樣品分析的方式采用部分充填或完全充填方式注射空白溶液。
1、如果波峰消失，是由于針管被前一種樣品溶液污染。在進(jìn)樣時(shí)隨著注射器的插入針管被帶入定量環(huán)。沖洗步驟已對(duì)針管進(jìn)行了清潔。解決辦法是如果污染再次出現(xiàn)，確認(rèn)針的插入方式是否正確，對(duì)針管進(jìn)行定期沖洗。
2、如果波峰仍存在，是在放空管處有前一次注射殘留下的樣品溶液，在注射前被虹吸入定量環(huán)。放空管調(diào)整不當(dāng)時(shí)就會(huì)在進(jìn)樣時(shí)產(chǎn)生這種現(xiàn)象，且注射器不在針管中。解決辦法是將放空管調(diào)整至于針管同一水平位置。手柄保持在進(jìn)樣位置，直到要進(jìn)行下一次注射，并在切換至取樣位置前進(jìn)行沖洗。
3、如果對(duì)放空管進(jìn)行調(diào)整后峰依然存在，就要排除進(jìn)樣閥以外可能導(dǎo)致殘留的因素。沖洗針管：用0.1mL~1mL的流動(dòng)相及針管清潔器，當(dāng)手柄處于進(jìn)樣位置時(shí)才可進(jìn)行沖洗，液體就可以繞過定量環(huán)，直接流出放空管。這樣可以對(duì)針管在全長(zhǎng)度內(nèi)進(jìn)行完全清潔，包括導(dǎo)針、管道和針密封。清潔器能夠做到這樣是因?yàn)閷?dǎo)針前段密封住了。而完全插入的針無法對(duì)上述任一部分進(jìn)行清潔。
在例行操作中，將手柄切換至進(jìn)樣位置后，拔出注射器，手柄位置不變以確保流動(dòng)相對(duì)定量環(huán)進(jìn)行連續(xù)沖洗。一般不需要在每次注射后都進(jìn)行沖洗，必要時(shí)可在進(jìn)行下一次分析前沖洗。通常每注射10次或20次后進(jìn)行沖洗就可以了。這樣，使針管內(nèi)充滿液體，液體對(duì)進(jìn)樣閥進(jìn)行清洗并稀釋樣品溶液的污染。
1、分析對(duì)象的區(qū)別
GC：適于能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點(diǎn)較低的樣品；但對(duì)高沸點(diǎn)、揮發(fā)性差、熱穩(wěn)定性差、離子型及高聚物的樣品，尤其對(duì)大多數(shù)生化樣品不可檢測(cè)占有機(jī)物的20%
HPLC：適于溶解后能制成溶液的樣品（包括有機(jī)介質(zhì)溶液），不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，對(duì)分子量大、難氣化、熱穩(wěn)定性差的生化樣品及高分子和離子型樣品均可檢測(cè)用途廣泛，占有機(jī)物的80%
2、流動(dòng)相差別的區(qū)別
GC：流動(dòng)相為惰性，氣體組分與流動(dòng)相無親合作用力，只與固定相有相互作用。
HPLC：流動(dòng)相為液體，流動(dòng)相與組分間有親合作用力，能提高柱的選擇性、改善分離度，對(duì)分離起正向作用。且流動(dòng)相種類較多，選擇余地廣，改變流動(dòng)相極性和pH值也對(duì)分離起到調(diào)控作用，當(dāng)選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動(dòng)相也可以增大分離選擇性。
3、操作條件區(qū)別
GC：加溫操作
HPLC：室溫；高壓（液體粘度大，峰展寬?。?/p>
液相色譜儀的應(yīng)用，可用于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差以及具有生理活性物質(zhì)的分析。一般來說，沸點(diǎn)在450℃以下，相對(duì)分子質(zhì)量小于450的有機(jī)物可用液相色譜儀分析，但這些物質(zhì)只占有機(jī)物的15%～20%，其余的80%～85%有機(jī)物原則上都可采用高效液相色譜儀分析。
色譜柱的使用和維護(hù)，色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要，稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。
在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護(hù)色譜柱。調(diào)節(jié)流速太快，避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩。
反沖色譜柱，一般說來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí)，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速降低柱效，預(yù)柱和保護(hù)柱，選擇使用適宜的流動(dòng)相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。
有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時(shí)，預(yù)柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi)，需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
液相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)，由輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等組成。
工作原理，利用混合物各組分在固定相和流動(dòng)相中溶解、分配或吸附等化學(xué)作用性能的差異，使各組分在作相對(duì)運(yùn)動(dòng)的兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達(dá)到相互分離。
從液相色譜儀工作流程中看到，色譜柱是實(shí)現(xiàn)分離的核心部件，要求柱效高、柱容量大和性能穩(wěn)定。柱性能與柱結(jié)構(gòu)、填料特性、填充質(zhì)量和使用條件有關(guān)。
色譜填料：經(jīng)過制備處理后，用于填充色譜柱的物質(zhì)顆粒，通常是5-10粒徑的球形顆粒。
色譜柱管：內(nèi)部拋光的不銹鋼管。典型的液相色譜分析柱尺寸是內(nèi)徑4.6mm，長(zhǎng)250mm。
色譜柱：也稱固定相，是將色譜填料填充到色譜柱管中所構(gòu)成的，色譜柱的填充，干法填充：在硬臺(tái)面上鋪上軟墊，將空柱管上端打開垂直放在軟墊上，用漏斗每次灌入50-100mg填料，然后垂直臺(tái)面墩10-20次。
濕法填充：又稱淤漿填充法，使用專門的填充裝置。
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