高效氣相色譜儀柱溫選擇的原則是在保證難分離物質(zhì)有良好分離的前提下(分離度滿足要求),盡可能采用較高柱溫,以縮短分析時(shí)間,保證峰型對(duì)稱。固定液用量選擇時(shí),一般而言,載體的表面積越大,固定液用量可以更高,這樣允許的樣品進(jìn)樣量越多。
一、樣品沸點(diǎn)在100~200℃:
1、柱溫:樣品平均沸點(diǎn)的三分之二
2、固定液含量:10%~15%
二、樣品沸點(diǎn)在200~300℃:
1、柱溫:低于樣品沸點(diǎn)100℃
2、固定液含量:5%~10%
三、樣品沸點(diǎn)>300℃:
1、柱溫:低于樣品沸點(diǎn)100~200℃
2、固定液含量:1%~3%
四、氣體:
1、柱溫:室溫
2、固定液含量:固體吸附劑
高效氣相色譜儀的不分流進(jìn)樣并不是絕對(duì)不分流,而是分流與不分流相結(jié)合。不分流進(jìn)樣的操作參數(shù)有進(jìn)樣口溫度、載氣流速、進(jìn)樣量、進(jìn)樣速度、溶劑和柱溫等。
一、進(jìn)樣口溫度:
進(jìn)樣口溫度可以比分流進(jìn)樣時(shí)稍低些,因?yàn)椴环至鬟M(jìn)樣時(shí)樣品在氣化室的滯留時(shí)間長(zhǎng),氣化速度稍慢些不會(huì)影響分離結(jié)果。進(jìn)樣口溫度的底限是能保證待測(cè)組分在瞬間不分流時(shí)完全氣化,否則過(guò)低的進(jìn)樣口溫度會(huì)造成高沸點(diǎn)組分的損失,影響分析靈敏度和重現(xiàn)性。當(dāng)然,過(guò)高的進(jìn)樣口溫度會(huì)造成樣品分解。因此要根據(jù)樣品的具體情況優(yōu)化進(jìn)樣口溫度。當(dāng)改變進(jìn)樣口溫度后,必須重新優(yōu)化設(shè)置瞬間不分流時(shí)間。
二、載氣流速:
從減小初始譜帶寬度的角度考慮,不分流進(jìn)樣的載氣流速應(yīng)高些,其上限應(yīng)以保證分離度為準(zhǔn)。分流出口的流量(開(kāi)啟分流閥后)一般為30~60mL/min。只要開(kāi)啟分流閥的時(shí)間設(shè)置正確,分流出口的流量在此范圍內(nèi)變化對(duì)分析結(jié)果的影響很小。
三、進(jìn)樣量和進(jìn)樣速度:
進(jìn)樣量一般不超過(guò)2μL。進(jìn)樣量大時(shí)應(yīng)選用容積大的襯管。
進(jìn)樣速度應(yīng)快些,可以用自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣。若采用手動(dòng)進(jìn)樣,進(jìn)樣速度的重現(xiàn)性會(huì)影響分析結(jié)果。
四、溶劑:
不分流進(jìn)樣對(duì)溶劑的要求比較嚴(yán)格。
1、進(jìn)樣口溫度、初始柱溫、瞬間不分流時(shí)間和進(jìn)樣體積都與溶劑沸點(diǎn)有關(guān)。一般來(lái)說(shuō),使用高沸點(diǎn)溶劑比低沸點(diǎn)溶劑有利,因?yàn)槿軇┓悬c(diǎn)高時(shí)容易實(shí)現(xiàn)溶劑聚焦,且可使用較高的初始柱溫,還可降低進(jìn)樣器針尖歧視和氣化室壓力的突變。
2、溶劑極性一定要與樣品極性相匹配,保證溶劑在所有被測(cè)樣品組分之前出峰,否則早流出的組分峰會(huì)被溶劑的大峰掩蓋。同時(shí)溶劑要與固定相匹配,才能實(shí)現(xiàn)有效的溶劑聚焦。
五、柱溫:
初始柱溫盡可能低些,可以低于溶劑沸點(diǎn)10~20℃。
高效氣相色譜儀色譜柱與色譜系統(tǒng)的連接處是靠密封墊密封。理想的柱密封墊應(yīng)能提供無(wú)泄漏的密封效果,適合各種外徑的色譜柱、不用過(guò)分?jǐn)Q緊、與色譜柱或接頭不粘連和耐溫度變化。
一、柱密封墊類型:
1、100%石墨墊:
質(zhì)軟易成形,密封性優(yōu)良。
通常用于毛細(xì)管柱,適用于FID和NPD,但不能適用于GC-MS。
2、100%Vespel密封墊:
由耐高溫的聚亞酰胺制成,質(zhì)硬,氧滲透性最低,與金屬或玻璃連接氣密性可以,可重復(fù)使用。但溫度反復(fù)升降后易泄漏。
3、Vespel-石墨墊:
由石墨與Vespel混合材料制成,氧擴(kuò)散率低。但不能重復(fù)使用。
適用于FID、NPD、對(duì)氧敏感的檢測(cè)器(如ECD)和GC-MS。
二、柱密封墊損壞的后果:
1、氧滲入系統(tǒng),使本底噪音增大。
2、氧的催化作用造成柱流失。
3、使樣品降解。
4、使樣品流失。
5、保留時(shí)間重復(fù)性差。
三、柱密封墊安裝要點(diǎn):
1、不要擰太緊,先用手指擰柱帽,再用扳手?jǐn)Q緊。
2、保持清潔。
3、用前先將密封墊烘干。
4、避免各種污染。
5、更換進(jìn)樣口和檢測(cè)器部件時(shí),要更換密封墊。