一、去除樣品和流動相中的固體顆粒
樣品和流動相中含有的固體顆粒物質(zhì)會堵塞色譜柱篩板，篩板被堵住不僅會引起柱壓的升高，而且也會引起柱效下降，因為篩板的堵塞會引起液流不均，導(dǎo)致色譜峰型拖尾、變寬，從而使柱效下降。
二、流動相的pH應(yīng)在使用的范圍內(nèi)
由于填料中存在Si-C和Si-O鍵，流動相超過其pH范圍將會導(dǎo)致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂，使柱效下降，使用壽命變短。由于流動相的pH控制不當(dāng)而對色譜柱造成的損害，通常很難使色譜柱恢復(fù)，因此必須認真對待，嚴格控制流動相的pH值。
三、使用保護柱或在線過濾器
樣品和流動相經(jīng)過濾后并不能完全消除固體顆粒物質(zhì)，因為泵的磨損、密封圈和管路的老化也會產(chǎn)生固體顆粒物質(zhì)，這些固體顆粒被流動相帶入色譜柱，堵塞篩板，導(dǎo)致柱壓升高、柱效下降。保護柱和在線過濾器上都有篩板，其孔徑與色譜柱孔徑相同，因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達色譜柱，有效防止色譜柱篩板的堵塞。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例，因此，除對樣品和流動相進行過濾外，建議您在色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器。
如果確認色譜柱柱壓升高是由于進樣端篩板被堵引起的，可選擇以下方式進行補救：
1、先在色譜柱前加上保護柱或在線過濾器，然后用甲醇、水=20/80ml/min反向沖色譜柱180min。
2、先在色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器，然后反向使用。
四、正確使用緩沖鹽
緩沖鹽通常易溶于水，難溶于有機溶劑，因此緩沖鹽使用不當(dāng)會使其析出，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙，使填料板結(jié)，柱壓上升;同時阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展，使色譜柱的保留能力下降，柱效降低。緩沖鹽析出后，去除非常困難，因此，正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱使用壽命非常重要。
正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話：使用前要過濾，使用后要沖洗。具體方法如下：
1、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min;使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0.2ml/min流速沖洗色譜柱過夜。
2、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前，用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min，再用該過渡流動相以1.0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩，以避免梯度過程中緩沖鹽析出。
注意：過渡流動相是指有機相和水相的組成與分析流動相相同，區(qū)別只是過渡流動相不含緩沖鹽。
3、緩沖鹽析出的補救方法：
1)方案1：用甲醇/20/80以1.0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min
2)方案2：用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜。
五、防止強保留物質(zhì)在色譜柱上存留
強保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積，對樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為，不僅引起峰型變寬、拖尾，使柱效下降，同時也會引起保留時間的變化，累積到一定程度時還會導(dǎo)致柱壓升高。由于強保留物質(zhì)和大分子化合物對色譜分離的影響是一個累積效應(yīng)，需要一定的時間才會體現(xiàn)出來，但對許多藥品特別是復(fù)雜樣品而言，很難判斷其是否是含有強保留物質(zhì)，因此要防止強保留物質(zhì)的累積，需要在每天的日常維護清洗色譜柱。
清洗方法：
1、未使用緩沖鹽：每天分析完成后，先用上述方法除去緩沖鹽。
2、使用過緩沖鹽：分析完成后，先用上述方法除去緩沖鹽。
氣相色譜柱的分離效果主要取決于其固定相，柱長度，柱內(nèi)徑，液膜厚度這幾個因素，從原理上講，這幾個因素相同的柱子，其分離效果是完全一樣的。
1)柱長度的選擇
分辨率與柱長的平方根成正比。在其他條件不變的情況下,為取得加倍的分辨率需有4倍的柱長。較短的柱子適于較簡單的樣品,尤其是由那些在結(jié)構(gòu)、極性和揮發(fā)性上相差較大的組分組成的樣品。
一般來說：
15m的短柱用于快速分離較簡單的樣品，也適于掃描分析；
30m的色譜柱是常用的柱長，大多數(shù)分析在此長度的柱子上完成；
50m、60m或更長的色譜柱用于分離比較復(fù)雜的樣品。
應(yīng)該注意，柱長增加分析時間也增加。
2)柱內(nèi)徑的選擇
柱徑直接影響柱子的效率、保留特性和樣品容量。小口徑柱比大口徑柱有更高柱效，但柱容量更小。
0.25mm：具有較高的柱效，柱容量較低。分離復(fù)雜樣品較好。
0.32mm：柱效稍低于0.25mm的色譜柱，但柱容量約高60%。
0.53mm：具有類似于填充柱的柱容量，可用于分流進樣，也可用于不分流進樣，當(dāng)柱容量是主要考慮因素時（如痕量分析），選擇大口徑毛細管柱較為合適。
3)液膜厚度的選擇
液膜厚度影響柱子的保留特性和柱容量。厚度增加，保留也增加。
0.1～0.2m：薄液膜厚度的毛細管柱比厚液膜的毛細管柱洗脫組分快，所需柱溫度低，且高溫下柱流失較小，適用高沸點的化合物的分析。
0.25～0.5m：常用的液膜厚度。
厚液膜：對分析低沸點的化合物較為有利。
4)固定相的選擇
不同的固定相對不同的分析物的影響不同，根據(jù)相似相溶原理，性質(zhì)越相近，固定相對其的流動阻力越大，其保留時間越長．色譜柱就是通過這個原理將不同性質(zhì)的混合物相互分開的。
目前，離子色譜用的分析柱主要由一定內(nèi)徑的柱管加上不同類型的填料所組成，針對離子色譜流動相比較多的采用酸、堿、鹽的特點，目前，多數(shù)離子色譜柱管材料由PEEK材料所組成，隨著離子色譜對柱效要求的提高，離子色譜所用的填料顆粒也越來越小，同時也對柱管所能夠承受的壓力要求越來越高，新型的離子色譜柱要求能夠承受40MPa的壓力。
此外，對特定的分離方式色譜柱，色譜柱內(nèi)徑可采用9mm規(guī)格，而對于一些用于半制備用途的離子色譜柱，也可采用大內(nèi)經(jīng)規(guī)格。
一般離子色譜柱內(nèi)徑約為4mm或4.6mm，這樣的色譜柱比較適合于常規(guī)1ml/min流量的分析，針對特定的痕量分析和聯(lián)用技術(shù)的需要，新型的離子色譜柱液采用微孔型離子色譜柱，微孔型離子色譜柱內(nèi)徑約為2mm，需要的流量只要常規(guī)離子色譜的1/4，但對于同樣的進樣量，檢測信號可以提高4倍，而所用流動相大大減少，是離子色譜今后一個發(fā)展方向。
離子色譜儀色譜柱的構(gòu)造分析_上一篇：熒光白度儀的性能如何及選購指南
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