制備液相色譜中，有三個可以觀察到的狀態(tài)：柱壓、檢測器基線、譜圖。通過觀察和記錄這三個狀態(tài)可以監(jiān)測儀器是否正常。若某個狀態(tài)出現(xiàn)異常，故障排查和解決方案如下。
1、柱壓波動
1）吸液管路進氣泡
?、偃軇┎蛔?，吸濾頭吸入空氣，添加溶劑并排氣泡。
?、谖鼮V頭臟了或堵塞，用異丙醇（或5%稀硝酸）清洗。
?、廴軇┲杏袣馀荩ㄓ绕鋬煞N以上溶劑混合），超聲（或抽濾）脫氣。
2）泵流量不穩(wěn)
?、?font color="#0268CA">單向閥堵塞，大流速purge，若不能解決，則需拆下單向閥（異丙醇）超聲清洗清洗或更換單向閥。
?、谥芊馊δp，更換密封圈。
?、郾妙^污染，柱塞桿往復活動受阻，清洗泵頭。
3）柱床塌陷，維修或更換色譜柱。
4）流動相混合后吸放熱導致溫度變化，以致柱壓波動，如乙腈和水混合吸熱，甲醇和水混合放熱。若影響實驗結果，則增加柱溫箱或流動相預混。
2、柱壓升高或超壓。
逐段排查堵塞的位置：
1）先拆下色譜柱，接上兩通運行，若是色譜柱堵塞：
?、龠M樣后樣品析出，用合適的溶劑反沖色譜柱。
②緩沖鹽析出，用大比例水相的流動相沖洗色譜柱。
?、蹤C械雜質堵塞篩板，異丙醇小流速反沖色譜柱。
④色譜柱污染嚴重，需維修或充填。
2）混合器堵塞，維修或更換。
3）六通閥堵塞，將泵液管路接到連接色譜柱的閥口處，將閥扳至load狀態(tài)，用易溶樣品的溶劑小流速沖洗。
4）壓力傳感器故障，維修或更換。
3、檢測器基線波動
1）基線有規(guī)律波動，且幅度較大，則可能有氣泡持續(xù)進入流通池。排查氣泡來源并用異丙醇沖洗檢測器或色譜柱。
2）基線小幅度規(guī)律波動，可能是檢測器燈能量不足（能量下降后，低波長下靈敏度先下降。
3）基線漂移。
?、倭鲃酉嘣诖藱z測波長下有吸收。更換流動相或改變波長。
②色譜柱或檢測池污染。以異丙醇沖洗色譜柱或檢測池，或將檢測池中透鏡玻片取出清洗。
4、譜圖重現(xiàn)性差
1）檢查方法設置，包括流速、梯度、波長。
2）檢查流動相配置是否有誤，A、B兩相是否放反。
3）檢查柱壓與之前是否有差異，若有變化，則前面1和2進行排查。
4）進樣前色譜柱是否完全平衡好。
5）樣品溶解方法。
輸液泵是HPLC系統(tǒng)中重要的部件之一。泵的性能好壞直接影響到整個系統(tǒng)的質量和分析結果的可靠性。輸液泵應具備如下性能：
?、倭髁糠€(wěn)定，其RSD應＜0.5%，這對定性定量的正確性至關重要；
?、诹髁糠秶鷮?，分析型應在0.1~10ml/min范圍內(nèi)連續(xù)可調，制備型應能達到100ml/min；
?、圯敵鰤毫Ω?，一般應能達到150~300kg/cm2；
?、芤焊兹莘e??；⑤密封性能好，耐腐蝕。
泵的種類很多，按輸液性質可分為恒壓泵和恒流泵。恒流泵按結構又可分為螺旋注射泵、柱塞往復泵和隔膜往復泵。恒壓泵受柱阻影響，流量不穩(wěn)定；螺旋泵缸體太大，這兩種泵已被淘汰。目前應用較多的是柱塞往復泵。
柱塞往復泵的液缸容積小，可至0.1ml，因此易于清洗和更換活動相，特別適合于再循環(huán)和梯度洗脫；改變電機轉速能方便地調節(jié)流量，流量不受柱阻影響；泵壓可達400kg/cm2。其主要缺點是輸出的脈沖性較大，現(xiàn)多采用雙泵系統(tǒng)來克服。雙泵按連接方式可分為并聯(lián)式和串聯(lián)式，一般說來并聯(lián)泵的流量重現(xiàn)性較好（RSD為0.1%左右，串聯(lián)泵為0.2~0.3%），但出故障的機會較多（因多一單向閥），價格也較貴。
早期使用隔膜和停流進樣器，裝在色譜柱進口處?，F(xiàn)在大都使用六通進樣閥或自動進樣器。進樣裝置要求：密封性好，死體積小，重復性好，保證中心進樣，進樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。HPLC進樣方式可分為：隔膜進樣、停流進樣、閥進樣、自動進樣。
1．隔膜進樣。
用微量注射器將樣品注進專門設計的與色譜柱相連的進樣頭內(nèi)，可把樣品直接送到柱頭填充床的中心，死體積幾乎即是零，可以獲得較佳的柱效，且價格便宜，操縱方便。但不能在高壓下使用（如10MPa以上）；此外隔膜輕易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應，使進樣重復性只能達到1~2%；加之能耐各種溶劑的橡皮不易找到，常規(guī)分析使用受到限制。
2．停流進樣。
可避免在高壓下進樣。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新啟動時往往會出現(xiàn)“鬼峰”；另一缺點是保存時間不準。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中，效果較好。
3．閥進樣。
一般HPLC分析常用六通進樣閥（以美國Rheodyne公司的7725和7725i型常見），其關鍵部件由圓形密封墊（轉子）和固定底座（定子）組成。由于閥接頭和連接管死體積的存在，柱效率低于隔膜進樣（約下降5~10%左右），但耐高壓（35~40MPa），進樣量正確，重復性好（0.5%），操縱方便。
4．自動進樣。
用于大量樣品的常規(guī)分析。
制備液相色譜儀的介紹_
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