幾乎所有液相色譜儀接頭故障都是可以避免的，按下列要求可以有效地預(yù)防接頭的故障。
1、使用液相色譜儀儀器設(shè)計(jì)時(shí)的部件。
不同廠家連接管伸出刃環(huán)的長度不完全相同，混用容易導(dǎo)致漏液、螺紋損壞、色譜柱進(jìn)出口及檢測器進(jìn)液口螺母破壞等，連接管在螺母中沒有良好密封也會導(dǎo)致漏液、死體積增加等。建議可以不要互換使用不同廠家生產(chǎn)的接頭和刃環(huán)。
2、按要求組裝和擰緊接頭，不可擰得過緊。
低壓接頭的故障主要有接頭松動、管頭損壞、螺紋“滑絲”、擰過頭。低壓接頭用手上緊，加上鎖緊螺絲可減少以上故障的發(fā)生，一旦發(fā)現(xiàn)低壓接頭損壞，應(yīng)重新?lián)Q新的。高壓接頭的故障與低壓接頭差不多，污染和裝置不當(dāng)也常有發(fā)生，
3、使用合適的工具。
在擰緊接頭的時(shí)候一定要仔細(xì)，過緊可能會損壞螺紋、刃環(huán)等，引起漏液，最糟糕的是會使接頭斷在螺母內(nèi)部。使用手?jǐn)Q緊接頭，不需要任何工具就可以密封。旋緊接頭時(shí)可以要用死扳手，不用活扳手，保證不損壞接頭。
4、接頭的清潔。
組裝與拆卸接頭時(shí)要檢查在密封面上有無微粒和無機(jī)鹽晶體。這些污染物影響密封性能，更嚴(yán)重的會使螺絲咬死。
液相色譜儀的日常維護(hù)與注意事項(xiàng)
一、日常維護(hù)：
1.定期清洗單向閥：將單向閥卸下，一般先用純凈水超聲10分鐘，然后用異丙醇超聲，10分鐘；也可直接用異丙醇超聲10分鐘。
2.定期清洗吸濾頭：將吸濾頭卸下，一般先用純凈水超聲10分鐘，然后用異丙醇超聲10分鐘；也可直接用異丙醇超聲10分鐘。
3.定期沖洗檢測池：把色譜柱卸下，在流速1.0ml/min的狀態(tài)下先用純凈水沖洗30分鐘，然后再用30%
磷酸（色譜級）沖洗30分鐘左右，再用超純水沖洗至流出液為中性，最后用甲醇沖洗，待用。
二、注意事項(xiàng)：
1.開始進(jìn)樣前30分鐘開氘燈即可，節(jié)約燈的能量和使用時(shí)間。
2.流動相的使用和注意事項(xiàng)：
?、偎昧鲃酉啾仨氼A(yù)先濾過和脫氣，流動相一般貯存于玻璃不銹鋼容器內(nèi)。貯存容器一定要蓋嚴(yán)，防止溶劑揮發(fā)引起組成變化。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉，應(yīng)盡量新鮮配制使用，不要長期貯存。容器應(yīng)定期清洗，特別是盛水、緩沖液和混合溶液的瓶子，以除去底部的雜質(zhì)沉淀和可能生長的微生物。
?、谂渲屏鲃酉嘤盟铻橥薰萍儍羲蚪?jīng)超聲過濾后的純化水，流動相配制好后先用直徑為5cm，孔徑為0.45ｕm的濾膜，通過沙芯過濾器的過濾，然后在超聲儀上超聲。
?、鄄坏脤⒀b流動相的容器直接放置與超聲儀內(nèi)，需放與篩網(wǎng)上進(jìn)行超聲。
3.六通閥的使用和維護(hù)注意事項(xiàng)：
?、贅悠啡芤哼M(jìn)樣前必須用濾膜過濾，以減少微粒對進(jìn)樣閥的磨損。
?、谵D(zhuǎn)動閥芯時(shí)不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動相受阻，使泵內(nèi)壓力劇增，甚至超過泵的最大壓力；再轉(zhuǎn)到進(jìn)樣位時(shí)，過高的壓力將使柱頭損壞。
?、蹫榉乐咕彌_鹽和樣品殘留在進(jìn)樣閥中，每次分析結(jié)束后應(yīng)沖洗進(jìn)樣閥。通常可用水沖洗，或先用能溶解樣品的溶劑沖洗，再用水沖洗。
4.色譜柱柱壓升高的主要因素：
?、貺C-10AT/20AT/10ATPlus泵的單向閥堵塞。
?、谏V柱的入口篩板堵塞。
?、畚鼮V頭堵塞。
?、躊EEK管接口處堵塞。
5.色譜柱柱壓不穩(wěn)的因素：
①泵內(nèi)有空氣。
?、诒?span title="密封墊" target="_blank">密封墊損壞。
?、廴軇┲械臍馀荨?/p>
?、芟到y(tǒng)檢漏，找出漏點(diǎn)。
6.樣品峰保留時(shí)間漂移的主要因素：
?、偈覂?nèi)溫度變化過大。
②流動相成分發(fā)生變化。
③色譜柱未平衡好。
?、鼙弥杏袣馀?。
⑤該流動相是否適宜此樣品的檢測。
7.基線漂移的主要因素：
?、僦鶞夭▌印?/p>
?、诹鲃酉嗖痪鶆?。
?、哿魍ǔ乇晃廴净蛴袣怏w。
?、軝z測器出口阻塞。
⑤流動相配比不當(dāng)或流速變化。
?、蘖鲃酉辔廴?、變質(zhì)。
?、呤褂醚h(huán)溶劑。
8.檢測器靈敏度不夠的主要因素：
?、贅悠愤M(jìn)樣量不足。
?、诓ㄩL設(shè)置不正確。
?、蹤z測器池窗污染。
?、軝z測池中有氣泡。
?、蓦妷翰环€(wěn)。
⑥流動相流速不合適。
9.色譜柱的使用和維護(hù)注意事項(xiàng)：
①避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動。柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
②應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?/p>
③一般說來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí)，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。
?、苓x擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。
⑤避免將復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi)，需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。
?、藿?jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。
?、弑４嫔V柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置至次日或更長時(shí)間。
?、嗌V柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是濾片被堵塞，這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗；另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi)，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。
?、嵋怨枘z為基質(zhì)的填料，只能在pH2~9范圍內(nèi)使用。每次分析檢測完成后，可以用洗脫能力強(qiáng)的洗脫液沖洗，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。
10.樣品必須用直徑為2.5cm，孔徑為0.45ｕm的濾膜針式過濾。如有明確要求需用離心過濾的，經(jīng)離心過濾后取上清液即可。
在液相色譜儀分析中，根據(jù)流動相和固定相相對極性的不同，可分為正相色譜和反相色譜。所謂正相色譜是指固定相極性大于流動相極性的情況，反之，固定相的極性小于流動相的極性，則稱為反相色譜。
正相分析的場合：
假設(shè)使用的溶劑是15%二氯甲烷/己烷混合溶液，樣品在二氯甲烷中更易溶解。如果樣品可以在流動相中完全溶解自然沒有問題。
如果樣品不能溶解在溶劑中，選擇100%二氯甲烷作為溶劑的情況下可能會產(chǎn)生故障。
在一般情況下，經(jīng)常使用混合溶劑作為流動相。哪種組合最易于樣品溶解可以從樣品的洗脫時(shí)間上看出。在選擇溶解樣品的溶劑之前，把流動相的組成在5~10%變化范圍內(nèi)各種樣品的洗脫時(shí)間作比較，選擇樣品最容易溶解的溶劑。因?yàn)?，樣品和溶劑、流動相互相溶解是分析的前提條件。
反相分析的場合：
假設(shè)使用的溶劑是50%的乙腈，使用的樣品在乙腈中比在水中更易溶解。當(dāng)然，可以的方法是使樣品完全溶解于流動相中。
然而，如果樣品不能溶解在流動相中，如何選擇溶劑呢？100%的乙腈溶液？或者濃度50%以下的乙腈水溶液？這種情況下，第一個(gè)選擇就是濃度50%以下的乙腈水溶液。第二個(gè)選擇就是100%的水溶液，可以100~500微升注入。最差的選擇是100%乙腈溶液。因?yàn)榧词箻悠吠耆芙庠诹?00%的乙腈溶液中，隨著流動相的加入，可能乙腈溶液被稀釋導(dǎo)致樣品析出。輕則造成上述a,b兩種故障，重則向c,d發(fā)展。最嚴(yán)重則發(fā)生f的故障，那就只能更換色譜柱了。
然而，混合樣品的情況下可能發(fā)生g的故障。判斷樣品會不會在色譜柱內(nèi)部析出可以通過以下步驟。減少樣品較易溶解的，溶劑量，然后試著增加注入量。也就是說，如果是要求注入在100%乙腈溶液中溶解的樣品20ul，可以試著注入在20%乙腈中溶解的樣品125ul。如果上述的故障消失了，則說明使用100%乙腈作為溶劑是不合適的，樣品會在色譜柱內(nèi)析出。
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