色譜柱在使用中常見的問題就是柱壓升高,如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加,屬于正?,F(xiàn)象。但柱壓在使用過程中突然升高(系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外,以下列舉了部分常見原因及解決辦法:
1、色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染;
可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,將其放在10%的稀硝酸內(nèi)超聲清洗10分鐘,后再用純水超聲10分鐘,重新裝入色譜柱。
2、色譜柱頭的填料被樣品污染;
如確定色譜柱頭的填料被污染,將柱頭螺絲卸下,挖出柱內(nèi)前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔細修復后,重新安裝上柱頭螺絲。
3、色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑,形成結(jié)晶析出;解決方法:如確定定是鹽結(jié)晶,用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解,再換高濃度甲醇。
步驟1:檢查氣體過濾器、載氣、進樣墊和襯管等
檢查進樣墊和氣體過濾器,保證輔助氣和檢測器用氣通暢有效。如果以前做過沸點較高的化合物,需要將進樣口襯管清洗或更換。
步驟2:將螺母和卡套裝在柱上,并將色譜柱兩端口小心切平
在色譜柱的一端裝上相應(yīng)的螺母和卡套,此時色譜柱端口無前后之分,色譜柱支架的支撐部分應(yīng)總是朝向著柱箱門。安裝好螺母和卡套后,將色譜柱端口切平,并用放大鏡進行檢查,以確認切口和管壁成直角,并且沒有殘留的碎屑,沒有毛邊或不平的切割面。
步驟3:將色譜柱連于進樣口上
通常來說,色譜柱的頂端應(yīng)保持在進樣口襯管的中下部,當進樣針穿過隔墊完全插入進樣口后,如果針尖與襯管中的色譜柱頂端相差1-2cm,這就是較為理想的狀態(tài)。從色譜柱架上取出需要連接的足夠的長度,并按步驟2切割柱子,連接到進樣口。避免用力彎曲壓擠毛細柱,并小心不要讓標記牌等有鋒利邊緣的物品與色譜柱接觸磨擦,以防柱身斷裂或受損。將色譜柱正確地嵌入進樣口后,用手把連接螺母擰上,用手擰緊后用扳手再擰1/4-1/2圈。
步驟4:接通載氣
載氣必須為高純氮氣(或氦氣),純度達99.999%,使用極性柱時(如FFAP、PEG-20M等),可以載氣加脫氧管進一步脫氧,這樣可延長柱子的使用壽命。
當色譜柱與進樣口連接好后,接通載氣。調(diào)節(jié)柱前壓力以得到合適的載氣流速。將色譜柱的另一端(空端),插入裝有己烷的樣品瓶中,正常情況下,我們可以看見瓶中穩(wěn)定持續(xù)的氣泡。如果沒有氣泡,就要重新檢查一下載氣裝置和流量控制器等是否安裝完全或設(shè)置正確,并檢測一下整個氣路有無泄漏。等所有問題解決后,將色譜柱端口從瓶中取出,擦試干凈,保證柱端口無溶劑殘留,再進行下一步安裝。
步驟5:將色譜柱連于檢測器上
其安裝和所需注意的事項與以上色譜柱與進樣口聯(lián)接(步驟3)部分所講述的大致相同。安裝時要注意色譜柱末端要高于尾吹點,或按照色譜儀說明書安裝。
步驟6:進行氣體檢漏
在色譜柱加熱前,要對GC系統(tǒng)進行檢漏。建議使用1:1的異丙醇/水的混合溶液進行檢查。
步驟7:色譜柱的老化
色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后,就可以對色譜柱進行老化了。將色譜柱程序升溫至最高使用溫度的30℃以下,恒溫30分鐘。這樣柱子內(nèi)吸附的組份會被吹出,以免影響您的分析。
最后,將色譜柱的溫度降低至所需要的溫度,即可進行實際樣品的分析。
通用型反相液相色譜柱是一種常用的色譜柱產(chǎn)品,主要由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成,被廣泛用于多個領(lǐng)域中。在通用型反相液相色譜柱的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性,延長柱子的使用壽命非常重要。使用時間后就會出現(xiàn)柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時間改變等變化,如不采取措施,將會縮短色譜柱的使用壽命,影響工作效率,并造成一定的經(jīng)濟損失。
結(jié)構(gòu):
空柱由柱接頭、柱管及濾片組裝而成。
在兩端柱接頭內(nèi),柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片(或濾網(wǎng)),用于封堵柱填料不被流動相沖出柱外而流失。空柱各組件均為316不銹鋼材質(zhì),能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內(nèi)不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。
特點:
?、庞捎谛滦透咝⒘9潭ㄏ嗵盍系氖褂?,分離能力高;
?、朴捎谝合嗌V柱具有高效,并且流動相可以控制和改善分離過程的選擇性,選擇性高;
?、菣z測靈敏度高;
?、扔捎诟邏狠斠罕玫氖褂?,相對經(jīng)典液相色譜,分析速度快。
另外,通用型反相液相色譜柱適用于分析高沸點不易揮發(fā)、受熱不穩(wěn)定、分子量大和不同極性的有機物,尤其是生物活性物質(zhì)的天然產(chǎn)物和高分子化合物等。