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液相色譜儀柱平衡慢的解決辦法及維修保養(yǎng)

時間:2020-04-21    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

液相色譜儀柱平衡慢的解決辦法

  液相色譜儀分析中柱平衡慢的常見原因是組分在舊的或新的流動相中對柱吸附強(qiáng)度差異較大。要進(jìn)行一種特殊的分析,或者從一種方法改為另一種方法,需要很長時間平衡。可考慮采用專用柱用于特殊的方法,不用時將柱拆下來,注滿適當(dāng)?shù)娜軇┗蛄鲃酉?,密封保管,不再做其它的分析?br/>  1、胺改良劑
  胺改良劑如三乙胺,通常加在反相或離子對流動相中,以減少樣品中破性組分的拖尾。常用1mmol/L~10mmol/L的濃度,平衡時間較長。如果一開始就用高濃度的胺,可使柱很快達(dá)到平衡。
  2、離子對試劑
  季胺類離子對試劑,如四丁基銨離子(TBA)沖掉比較慢。用50~100倍柱體積的流動相通過柱后,酸性組分的保留仍然變化??梢缘霓k法用中間洗液:含100mmol/L~200mmol/L緩沖液或鹽的甲醇-水。顯然,要最后去掉痕量的TBA,需用強(qiáng)流動相,加緩沖液是為了競爭在酸性硅酸基質(zhì)上的TBA,產(chǎn)生離子交換作用。
  從反相柱上洗去長鏈陰離子對試劑,非常慢,想要完全除去是不可能的,甚至用100%的甲醇也不行。分析陽離子溶質(zhì)其保留一直不斷漂移,一定要用長鏈離子對時,可以選用專用柱。
  3、硅膠柱
  用硅膠柱作正相分離,常發(fā)生保留突然改變,或增加或減少。其原因是流動相改變時相應(yīng)的改變了水的含量,使硅膠柱的含水量變化。用水脫活,硅膠柱保留時間會減少很多。
  4、四氫呋喃作流動相
  在反相流動相中,加四氫呋喃(THF)不會影響到柱平衡。THF的性質(zhì)類似于甲醇或乙腈,但對某些種類的樣品也有偶然例外,如分離水溶性的維生素,從含THF變成無THF的流動相,約需半天時間才能使柱平衡,這也證實該效應(yīng)對其它類別的樣品的影響。

標(biāo)簽: 液相色譜儀
液相色譜儀 液相色譜儀柱平衡慢的解決辦法_液相色譜儀

液相色譜儀日常保養(yǎng)

  1、液相色譜儀的日常操作條件:溫度:10-40℃;相對濕度<80%;可以是恒溫、恒濕,遠(yuǎn)離高電干擾、高振動設(shè)備。

  2、泵的保養(yǎng):

 ?。?)使用流動相盡量要清潔;

 ?。?)進(jìn)液處的沙芯過濾頭要經(jīng)常清洗;

  (3)流動相交換時要防止結(jié)晶;

  (4)避免泵內(nèi)堵塞或有氣泡;

  3、檢測器(UV)的保養(yǎng):

 ?。?)紫外燈的保養(yǎng):在2小時以上不用是關(guān)閉,節(jié)省能量。

 ?。?)樣品池要沖洗、保養(yǎng)。

  4.進(jìn)樣器的保養(yǎng):

 ?。?)每次分析結(jié)束后,要反復(fù)沖洗進(jìn)樣口,防止樣品的交叉污染;

 ?。?)平時應(yīng)注意用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進(jìn)樣分析狀態(tài)清洗;如出現(xiàn)漏液現(xiàn)象,原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染,一般須申請維修或更換配件。

  5、色譜柱的保養(yǎng):

 ?。?)色譜柱在任何情況下不能碰撞、彎曲或強(qiáng)烈震動;

 ?。?)當(dāng)色譜柱和色譜儀聯(lián)結(jié)時,閥件或管路一定要清洗干凈;

 ?。?)要注意流動相的脫氣、PH;

 ?。?)避免使用高粘度的溶劑作為流動相;

 ?。?)進(jìn)樣樣品要提純;

  (6)嚴(yán)格控制進(jìn)樣量;

 ?。?)每天分析工作結(jié)束后,要清洗進(jìn)樣閥中殘留的樣品;

 ?。?)每天分析測定結(jié)束后,都要用適當(dāng)?shù)娜軇﹣砬逑粗?/p>

 ?。?)若分析柱長期不使用,應(yīng)用適當(dāng)有機(jī)溶劑保存并封閉;

  6、工作站:出現(xiàn)死機(jī)可重起計算機(jī);不正常運(yùn)行時,首先可更換電腦測試其硬件故障;或在本機(jī)上重新插拔接口、重新安裝軟件。

  7、流動相的抽作要求:二次蒸餾水,緩沖鹽一定要過濾;流動相脫氣至關(guān)重要(可采用抽濾,超聲波脫氣等方法)。緩沖鹽的使用:流動相含有鹽分時,做完實驗后一定要進(jìn)行流路沖洗;首先用水沖洗,打開排液閥用PURG鍵轉(zhuǎn)換出原有含鹽的流動相,然后關(guān)閉排液閥打開泵沖洗全部流路45分鐘以上,如此更換流動相為水和甲醇混合液沖洗全部流路30分鐘(此步驟一般可省去,根據(jù)實驗而論),最后更換純甲醇沖洗全部流路45分鐘以上。

  8、吸濾頭:特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗;清洗不成功則需要換。

  9、過濾器:當(dāng)色譜峰出現(xiàn)異常情況時,有可能是此部件被污染,拆下用異丙醇超洗或更換過濾墊片。

  10、單向閥:如遇到泵壓不穩(wěn)或流動相不能抽取,則可能是單向閥出現(xiàn)問題,卸下用異丙醇超聲波清洗,清洗時須按其安裝的方向放置在小燒杯中,切記不可與安裝方向倒置超洗!

  11、泵頭:泵頭漏液或出現(xiàn)其它故障一般要申請維修(如漏液,或更換柱塞桿及其密封墊等)

  12、排液閥:此處不能完全密封或漏液時一般是其中的墊片污染或磨損,可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。

標(biāo)簽: 液相色譜儀
液相色譜儀 液相色譜儀日常保養(yǎng)_液相色譜儀

高效液相色譜儀的正確安裝方法

  高效液相色譜儀采用了高壓輸液泵、高效微粒固定相和高靈敏度檢測器,HPLC在分析速度、分離效率、檢測靈敏度和操作自動化方面,都達(dá)到了可與GC相比的程度,并保持了樣品適用范圍廣、流動相種類多和便于制備的柱層析優(yōu)點,在生物工程、制藥工業(yè)、食品工業(yè)、環(huán)境監(jiān)測和石油化工等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用。儀器系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中做相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。

  高效液相色譜儀的正確安裝事項如下:

  1、要注意防止灰塵玷污光學(xué)元件

  該儀器很多檢測器都是屬于光學(xué)類的分析儀器,這些光學(xué)元件很容易受到灰塵玷污,光學(xué)元件一旦被玷污,就會引起很多麻煩。與光學(xué)元件受潮后效果一樣,主要是使光學(xué)元件的反射率降低,從而影響儀器的靈敏度。另外,還會使得雜散光增大,噪聲增大,減低檢測器的靈敏度,使得分析測試的誤差增大。因此,安放本該儀器的房間要干凈、通風(fēng)、防塵,同時還要注意防止震動。

  2、要注意防止干擾

  要注意防止電、磁場的干擾。電、磁場的干擾是影響高效液相色譜儀穩(wěn)定性的重要因素。一般來講,安放該儀器的房間,應(yīng)該遠(yuǎn)離電場、磁場干擾。

  3、要注意防濕防潮

  本儀器是光、機(jī)、電、計算機(jī)四位一體的、技術(shù)密集的高科技產(chǎn)品,它的每一個部分都不允許受潮。否則,將會使有關(guān)的元器件損壞或性能變壞,影響儀器的穩(wěn)定性。

  注:使用高效液相色譜儀時,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,最后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,廣泛的應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,適于分析高沸點不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。

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高效液相色譜儀 高效液相色譜儀的正確安裝方法_高效液相色譜儀

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