在化學(xué)、工業(yè)行業(yè)中高效液相色譜儀被廣泛使用,用戶在使用中偶爾也會出現(xiàn)一些問題,下面小編就一些常見液相色譜儀的故障問題為用戶進(jìn)行總結(jié)分析。
第一、液相色譜儀中有氣體冒出
如果液相色譜儀有氣泡流出,不管是通過關(guān)閉色譜儀泵或者是打開色譜儀下閥,都沒解決氣泡產(chǎn)生的問題,有可能是機(jī)器的過濾器長期的受到了腐蝕的影響,使霉菌等物質(zhì)阻塞了液相色譜儀。
故障解決辦法:一般情況下用超聲波來清洗5-10分鐘左右,或者是可以將過濾器浸泡在硝酸鈉溶液當(dāng)中輕微的搖晃,然后用清水進(jìn)行沖洗就可以了。進(jìn)行完上述操作后,如果色譜儀還是會有氣泡的話,只能證明過濾器內(nèi)部被腐蝕的非常嚴(yán)重,則要用色譜用甲醇在沖洗半個小時然后超聲波清洗半小時后用清水清理干凈泄壓閥關(guān)閉就可以
第二、液相色譜儀出現(xiàn)無指示的故障
色譜儀當(dāng)出現(xiàn)無指示的故障時,主要原因是泵的墊圈有了的磨損和大量的氣體進(jìn)入到了泵體當(dāng)中。
故障解決辦法:檢查是色譜儀墊圈出了問題,更換一個墊圈即可。如果是出現(xiàn)了第二種問題,在液相色譜泵的作用下在泵的出口處將空氣盡快的抽出。如果問題還是無法解決這個時候就可以,拆下色譜儀當(dāng)中的單向閥,進(jìn)行超聲波的清洗過程。
以上的這些就是液相色譜儀中常見的一些小問題了,如果自己無法解決的話,就找專業(yè)的技術(shù)人員進(jìn)行處理。
高效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。
儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù);
在兩相中做相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
液相色譜儀系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi);
由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程;
各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀。
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。
與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,HPLC所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。
隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題zui有前途的方法。
由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域。
液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。
然后在這個基礎(chǔ)上,我們再去比較這些主要指標(biāo)。
1.噪音
是指由儀器的電器元件、溫度波動、電壓的線性脈沖以及其他非溶質(zhì)作用產(chǎn)生的高頻噪聲和基線的無規(guī)則波動。噪音的大小直接關(guān)系到儀器的檢測靈敏度,噪音越大,檢測的靈敏度就越低。對于檢測低含量的樣品就要求儀器的噪音越小越好,否則噪音過大將會導(dǎo)致基線不穩(wěn),甚至影響分析結(jié)果。
2.最小檢測濃度(最小檢測限)
是反映儀器靈敏度的重要參數(shù)。CL=2×Nd×C/H(CL:最小檢測濃度Nd:噪音C:樣品濃度最小檢測濃度H:樣品峰高)由上式可見,最小檢測濃度是和噪音成正比的,噪音越大,最小檢測濃度就越大,靈敏度就越低。某些廠家回避了這個指標(biāo),說明他們不愿在最小檢測濃度的基礎(chǔ)上去比較噪音。
3.漂移
是指儀器穩(wěn)定后一段時間內(nèi)基線漂離原點(diǎn)的距離,通常用來衡量儀器穩(wěn)定快慢。高品質(zhì)的儀器能在較短的時間內(nèi)達(dá)到穩(wěn)定,從而在一定程度上提高了分析效率。
4.定性定量重復(fù)性
主要是考核儀器穩(wěn)定性的指標(biāo),這對于分析樣品來說是非常重要的。好的儀器其穩(wěn)定性應(yīng)該是十分優(yōu)秀的,這就要求多次進(jìn)樣保留時間及含量的一致性,這樣做出來的結(jié)果才能使人信服。
有的朋友會認(rèn)為這些指標(biāo)好像都是檢測器的。對的,但是就前面所說條件是要放在整個回路和系統(tǒng)里去看去比較。例如:泵的脈動會直接影響噪音指標(biāo),泵的流量準(zhǔn)確度、精確度指標(biāo),以及密封性不好也會影響相關(guān)指標(biāo)。所以要系統(tǒng)地看指標(biāo)。
液相色譜儀的最小檢測濃度和流通池的光程(體積)之間的關(guān)系與含義
某些國產(chǎn)儀器在公布其技術(shù)指標(biāo)時,大多只寫了“噪音和漂移”的指標(biāo)。用戶覺得指標(biāo)都差不多,但卻忽略了另外二個較為重要的指標(biāo):“最小檢測濃度和光程”,這二個指標(biāo)有什么作用呢?它們代表了什么含義?
這里來解釋一下:
最小檢測濃度是考驗儀器的靈敏度。最小檢測濃度數(shù)值大,儀器的靈敏度就小,不能反應(yīng)真正的噪音和漂移水平。例如:我公司的最小檢測濃度小于1×10-8g/ml(萘/甲醇溶液),而某些儀器是:4×10-8g/ml(萘/甲醇溶液)。這就說明我們的儀器靈敏度大,可以檢測更微量的樣品。同樣如我公司儀器把最小檢測濃度調(diào)較得和其它產(chǎn)品是一樣,也就表明我們可以做得比其它產(chǎn)品噪音和漂移低4倍。
最小檢測濃度=2×儀器的噪音×進(jìn)樣的樣品濃度/樣品的峰高值
那光程又代表什么?我們先看下面一個公式,比爾定律:
A=log(I0/I)=εCL
A是吸收率;I0代表參照池的光強(qiáng);I為樣品池的光強(qiáng);ε為摩爾吸光系數(shù);C是樣品濃度;L就是流通池的光程。
可以看出在同樣的“C”樣品濃度情況下,“L”流通池的光程越大,儀器的“A吸收率”也就越大。這樣可以檢測到的樣品濃度就越小。為什么有些廠家把儀器的流通池光程做得很小,有些只有:3.5mm、4.5mm或5.5mm,而不是我公司的8mm。這是因為這些廠家不能有效的降低整個系統(tǒng)的“噪音和漂移水平”,只能犧牲流通池光程,也就是犧牲了儀器的檢測靈敏度和最小檢測濃度,來達(dá)到降低“噪音和漂移水平”目的。用通俗的說法比喻:HPLC就是一臺音響,光程就是這臺音響的音量控制鍵,光程越小就是把音量調(diào)小了,耳朵對音響本身的噪音和失真(可以理解為儀器的噪音和漂移)感覺就越小。但也就說明了這些儀器整體系統(tǒng)的制造水平不高。