色譜柱在使用中常見的問題就是柱壓升高，如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加，屬于正?，F(xiàn)象。但柱壓在使用過程中突然升高（系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外，可能的原因有如下幾點：
1、色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染；
2、色譜柱頭的填料被樣品污染；
3、色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑，形成結(jié)晶析出；
4、流動相ph值過大或過小使固定相結(jié)構(gòu)破壞或溶解。
解決辦法如下：
1、如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染，可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力，或者卸下色譜柱頭，將其放在10%的稀硝酸內(nèi)超聲清洗10分鐘，后再用純水超聲10分鐘，重新裝入色譜柱。
2、如確定色譜柱頭的填料被污染，將柱頭螺絲卸下，挖出柱內(nèi)前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔細修復(fù)后，重新安裝上柱頭螺絲。
3、如確定定是鹽結(jié)晶，用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解，再換高濃度甲醇。
4、如果因ph值使用不當(dāng)，很難恢復(fù)。
液相色譜柱是一種用于液體色譜分析儀器。
液相色譜柱的日常維護：
1、每次開機時，流速和柱壓要逐漸增加，突然迅速增加，會使柱床受到?jīng)_擊，引起紊亂，產(chǎn)生空隙
2、在進樣前使色譜系統(tǒng)充分平衡，是否平衡可由基線加以判斷
3、在進樣前，檢查色譜系統(tǒng)的各個接頭，通常由此能發(fā)現(xiàn)是否有漏液現(xiàn)象。如有漏液，空氣會從漏縫進入系統(tǒng)引起基線漂移，影響峰高和峰面積的重復(fù)性
4、不要把柱接頭上得太緊，否則易損壞接頭螺紋，引起滲漏
5、不要把柱子放在有氣流的地方或直接放到陽光下，氣流和陽光都會使柱子產(chǎn)生溫度梯度造成基線漂移；如果懷疑基線漂移是由溫度梯度引起的，可以設(shè)法使柱子恒溫
6、若儀器用做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數(shù)很多，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱，這樣有助于延長柱壽命
7、如果懷疑樣品會污染色譜柱，可以用合適的溶劑幾百毫升、慢慢沖洗柱子過夜，第二天早晨再用流動相重新平衡柱子約3min、
8、在因裝卸、更換、貯存等而挪動柱子時，動作要輕，不要使其受到碰撞，以免柱床因震動產(chǎn)生空隙或通道
9、柱要加標簽，新舊分開，不要放在溫度變化很大的地方
10、液相色譜柱柱子不用或貯藏時，應(yīng)封閉并貯存在惰性溶劑中
色譜柱在使用前，可以進行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行（出廠測試所使用的條件是較佳條件），只有這樣，測得的結(jié)果才有可比性。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。
1、樣品的前處理；
a、可以使用流動相溶解樣品；
b、使用預(yù)處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)；
c、使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。
2、流動相的配制
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點：
a、流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中（或長期留在柱中）；
b、流動相與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)；
c、流動相的黏度要盡量小，以便得到好的分離效果；降低柱壓降，延長泵的使用壽命（可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度）；
d、流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。如使用UV檢測器，可以使用對紫外吸收較低的溶劑配制；
e、流動相沸點不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致實驗無法進行；
f、在流動相配制好后，一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。
3、流動相流速的選擇
因柱效是柱中流動相線性流速的函數(shù)，使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的色譜柱，要追求較佳柱效，可以使用較佳流速。對內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱，流速一般選擇1ml/min，對于內(nèi)徑為4.0mm柱，流速0.8ml/min為佳。
當(dāng)選用較佳流速時，分析時間可能延長?？刹捎酶淖兞鲃酉嗟南礈鞆姸鹊姆椒ㄒ钥s短分析時間（如使用反相柱時，可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量）。
注意：
a.含水流動相可以在實驗前配制，尤其是夏天使用緩沖溶液作為流動相不要過夜?？梢约尤氙B氮化鈉，防止細菌生長；
b.流動相要求使用0.45μm濾膜過濾，除去微粒雜質(zhì)；
c.使用HPLC級溶劑配制流動相，使用合適的流動相可延長色譜柱的使用壽命，提高柱性能。
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