通常影響色譜柱使用壽命的主要因素有以下幾點(diǎn)。
?、偕V柱破損
石英毛細(xì)管柱的聚酰亞胺層，如有少許破損就很難再保護(hù)脆弱的石英毛細(xì)管。當(dāng)柱箱連續(xù)地加熱和冷卻、柱箱風(fēng)扇的震動(dòng)和柱架等都會(huì)對毛細(xì)管造成應(yīng)力，最終在色譜柱有弱點(diǎn)處破裂。大內(nèi)徑柱更容易破裂，也就是說，在操作0.45～0.53mm內(nèi)徑柱時(shí)，要比0.18～0.32mm內(nèi)徑柱更要小心。
如果已經(jīng)斷裂的色譜柱，仍在高溫下連續(xù)運(yùn)行或是作多階溫度程序運(yùn)行，很可能損壞色譜柱，因破裂的后半段暴露在高溫的氧氣中，這樣會(huì)很快地破壞固定相；而斷裂的前半段，由于有載氣流過，氧的影響會(huì)小些。如斷裂的色譜柱沒有再加熱或只暴露在高溫或空氣中很短時(shí)間，斷裂的后半部分不會(huì)受到明顯損壞，可考慮作為它用。
?、跓釗p傷
超過色譜柱溫度上限，會(huì)造成色譜柱固定相和管表面加速損壞，色譜柱的過量流失會(huì)使活性組分拖尾，降低柱效。一般熱損壞是一個(gè)很慢的過程，但有氧存在時(shí)，會(huì)大大加速熱損壞。另外在有漏氣情況下，色譜柱過熱也會(huì)加速損壞或永久性損壞色譜柱。
?、垩鯎p傷
氧是毛細(xì)管柱的大敵，在接近室溫下，不會(huì)對色譜柱有太大損害，柱溫升高時(shí)會(huì)嚴(yán)重?fù)p壞色譜柱。對于極性固定相，即使溫度和氧濃度很低時(shí)，也會(huì)發(fā)生嚴(yán)重?fù)p壞。雖然，短時(shí)間地暴露在空氣中，如注射空氣或更換隔墊不會(huì)有太大問題，但也應(yīng)避免。
在氣路上有漏氣的地方(如氣路、接頭和進(jìn)樣器)，往往是進(jìn)入氧氣的源頭，當(dāng)色譜柱加熱時(shí)，就會(huì)很快地?fù)p壞固定相，會(huì)過早地引起固定液的過度流失，至使活性化合物有拖尾，降低柱效。在不太嚴(yán)重的情況下，色譜柱還會(huì)有一定的分離功能，但柱效已經(jīng)下降。在嚴(yán)重的情況下，色譜柱就會(huì)完全失效。
?、芑瘜W(xué)損傷
有少數(shù)化合物會(huì)使固定相遭到破壞。不揮發(fā)性化合物，進(jìn)入色譜柱常常會(huì)降低色譜柱的性能，但是不會(huì)破壞固定相，有條件時(shí)這些沉積的殘留物可以用溶劑沖洗而除去，能恢復(fù)色譜柱的性能。
要避免進(jìn)入色譜柱的主要化合物是無機(jī)和礦物堿和酸，這些礦物堿和酸不會(huì)揮發(fā)，通常積累在色譜柱的前端，如果使其停留在那里就會(huì)破壞固定相，使色譜柱過早的大量流失，使活性化合物拖尾，以及使柱效下降，其征兆和熱損壞及氧損壞類似。
由于化學(xué)損壞多發(fā)生在色譜柱的前端，所以可把色譜柱的前端切掉0.5～1m，在比較嚴(yán)重的情況下，可以截去5m或更長的一段。如果使用保護(hù)柱就會(huì)減小色譜柱被損害的長度，但是需要經(jīng)常處理或更換保護(hù)柱。酸或堿還常常會(huì)破壞石英管內(nèi)的去活表面，因而會(huì)引起活性化合物的峰形變壞。
?、菸廴?/strong>
氣相色譜中，毛細(xì)管色譜柱被污染是很普遍的問題，不幸的是，它和各種各樣常見的故障相似，常常被錯(cuò)誤的判斷為其它的故障，雖然被污染了的色譜柱并沒有損壞，但已失去效能。通常有兩種基本類型的污染物，不揮發(fā)性污染物和半揮發(fā)性污染物。不揮發(fā)性污染殘留物不能從色譜柱里洗脫出來，而是累計(jì)在色譜柱里，這樣它就成為涂漬了殘留物的色譜柱，因而影響溶質(zhì)的分配。而且殘留物還會(huì)和活性化合物相互作用，甚至造成峰的拖尾，減少峰面積。
活性溶質(zhì)是指那些含有羥基或氨基(一些硫醇基)及醛的物質(zhì)；半揮發(fā)性污染物最后會(huì)洗脫出去，但需要幾個(gè)小時(shí)或幾天時(shí)間，半揮發(fā)性污染物和不揮發(fā)性殘留物一樣，他們也會(huì)引起峰形變壞和峰面積減小。此外，還常常引起基線不穩(wěn)定(漂移、噪音增加)或出鬼峰等。
污染物的來源有許多，其中進(jìn)樣是主要的來源。生物液體和組織、土壤、廢水、地下水和類似的含有大量半揮發(fā)的和不揮發(fā)物質(zhì)的基體，甚至使用凈化方法，樣品也會(huì)含有少許這些物質(zhì)并帶到注射樣品中，幾次到幾百次進(jìn)樣就會(huì)造成殘留物的積累故障。柱上進(jìn)樣、不分流進(jìn)樣和大口徑柱直接進(jìn)樣等進(jìn)樣方法常常會(huì)造成上述色譜柱的嚴(yán)重污染。
污染物還會(huì)來源于氣體管路、凈化器、密封墊、隔墊的碎屑或其他與樣品可能接觸的物質(zhì)，如樣品瓶、溶劑、注射器、移液管等，這些類型的污染物可能會(huì)突然性的引起故障。
一﹑去除樣品和流動(dòng)相中的固體顆粒
樣品和流動(dòng)相中含有的固體顆粒物質(zhì)會(huì)堵塞色譜柱篩板，篩板被堵住不僅會(huì)引起柱壓的升高，而且也會(huì)引起柱效下降，因?yàn)楹Y板的堵塞會(huì)引起液流不均，導(dǎo)致色譜峰型拖尾、變寬，從而使柱效下降。因此，建議使用超純水和色譜純試劑，在分析樣品前對樣品進(jìn)行針筒過濾，流動(dòng)相過0.45μm濾膜。
二﹑流動(dòng)相的PH應(yīng)在使用的范圍內(nèi)
由于流動(dòng)相的PH 控制不當(dāng)而對色譜柱造成的損害，通常很難使色譜柱恢復(fù)，因此必須認(rèn)真對待，嚴(yán)格控制流動(dòng)相的PH值。
三、使用保護(hù)柱或在線過濾器
樣品和流動(dòng)相經(jīng)過濾后并不能完全消除固體顆粒物質(zhì)，因?yàn)楸玫哪p、密封圈和管路的老化也會(huì)產(chǎn)生固體顆粒物質(zhì)，這些固體顆粒被流動(dòng)相帶入色譜柱，堵塞篩板，導(dǎo)致柱壓升高、柱效下降。保護(hù)柱和在線過濾器上都有篩板，其孔徑與色譜柱孔徑相同，因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達(dá)色譜柱，有效防止色譜柱篩板的堵塞。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例，因此，除對樣品和流動(dòng)相進(jìn)行過濾外，建議您在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線過濾器。
如果色譜柱柱壓升高是由于進(jìn)樣端篩板被堵引起的，可選擇一下方式進(jìn)行補(bǔ)救：
1、先在色譜柱前加上保護(hù)柱或在線過濾器，然后用甲醇、水=20/80ml/min反向沖色譜柱180min。
2、先在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線過濾器，然后反向使用。
四﹑防止強(qiáng)保留物質(zhì)在色譜柱上存留
強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積，對樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為，不僅引起峰型變寬、拖尾，使柱效下降，同時(shí)也會(huì)引起保留時(shí)間的變化，累積到一定程度時(shí)還會(huì)導(dǎo)致柱壓升高。由于強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物對色譜分離的影響是一個(gè)累積效應(yīng)，需要一定的時(shí)間才會(huì)體現(xiàn)出來，但對許多藥品特別是復(fù)雜樣品而言，很難判斷其是否是含有強(qiáng)保留物質(zhì)，因此要防止強(qiáng)保留物質(zhì)的累積，需要在每天的日常維護(hù)中用純甲醇或乙氰清洗色譜柱。
五﹑正確使用緩沖鹽
緩沖鹽通常易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑，因此緩沖鹽使用不當(dāng)會(huì)使其析出，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙，使填料板結(jié)，柱壓上升；同時(shí)阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展，使色譜柱的保留能力下降，柱效降低。緩沖鹽析出后，去除非常困難，因此，正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱使用壽命非常重要。
液相色譜柱是液相色譜儀的核心部件，且極易因使用不當(dāng)而損壞，不互溶的流動(dòng)相，不正確的保存方式及清洗都會(huì)降低色譜柱的使用壽命。因此液相色譜柱的日常維護(hù)保養(yǎng)極為重要。
1.流動(dòng)方向已明確標(biāo)明在色譜柱上，請正確安裝色譜柱，除非您想沖洗色譜柱入口的污染物，否則，請不要反接色譜柱。
2.反相柱做完實(shí)驗(yàn)后，若使用流動(dòng)相中含有緩沖溶液鹽，請?jiān)谑褂猛戤吅笥貌缓彌_劑的80%水-有機(jī)溶劑流動(dòng)相沖洗色譜柱，后換成100%有機(jī)溶劑貯存。
3.正相色譜柱正相使用保存在純正己烷中，反相使用時(shí)需要將柱內(nèi)貯存液用異丙醇置換。
4.流動(dòng)相與樣品在使用前可以用0.45um的微孔濾膜或用預(yù)處理柱（SPE固相萃取小柱）進(jìn)行預(yù)處理，并嚴(yán)格脫氣。
5.流動(dòng)相pH需保持在2-8之間，請盡量不超過適用范圍。
6.柱溫不要大于60℃。
7.壓力最高不超過30Mpa，建議在20Mpa以內(nèi)使用。
8.使用新鮮溶劑，防止細(xì)菌增長。
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