液相色譜儀結構復雜，且不同型號的色譜儀，出故障時產生的現(xiàn)象有可能不同，以下幾項液相色譜儀常見故障排除方法僅供參考：
1、檢測器開機時屏幕顯示不正常，出現(xiàn)缺字、坐標圖形異樣、光標無法移動等象
原因：工作電源不正?；騼x器附件有強干擾源存在；
排除方法：檢查工作電源電壓，采取穩(wěn)壓措施；關機后重新開機；檢測器微機系統(tǒng)故障；
2、柱前壓力逐漸升高
原因：
?。?）流動相中存在大顆粒的物質；
?。?）樣品未經過過濾處理；
（3）柱子輸入端濾片，污染；
對應排除方法：
?。?）流動相經＜5μ的真空抽濾瓶過濾后再使用；
?。?）樣品須經濾膜過濾；
?。?）拆下柱的濾片用超聲波清洗,同時刮去柱口表面被污染的固定相；
3、輸液泵壓力指示為零(或＜0.5MPa)且柱后無液體流出
原因：
?。?）柱前導管接頭漏液；
?。?）泵柱室內有大量氣泡存在；
?。?）貯液瓶內試劑用完；
?。?）輸液泵未工作；
對應排除方法：
?。?）檢查各接口是否有漏液；
?。?）放開泵出口接頭；用“清洗”鍵沖洗泵體；
?。?）添加流動相；
?。?）按輸液泵操作方法，檢查其工作狀態(tài)；
4、組分峰極小或不出峰
原因：
?。?）波長選擇不正確；
?。?）檢測器輸出衰減太大；
?。?）進樣口漏液；
?。?）進樣閥樣品廢液管堵塞，樣品未進入定量管；
?。?）進樣后未按啟動鍵；
（6）定量管容積過小；
?。?）樣品濃度過??；
?。?）檢測器燈源老化或失效；
?。?）流動相不純；
對應排除方法：
（1）按標準重新選擇波長；
?。?）重新選擇輸出量程范圍；
?。?）修理進樣閥；
?。?）拆下六通閥上廢液管(5#,6#)重新安裝；
?。?）進樣后立即按啟動鍵；
?。?）更換大容量定量管；
?。?）濃縮樣品后再進樣；
（8）更換燈源；
?。?）選擇高純度的流動相；
5、輸液泵壓力指示超過規(guī)定的范圍，且柱后無液體流出
原因：
?。?）分離柱阻力過大(陳舊柱子)；
?。?）柱前導管堵塞；
?。?）泵柱塞內有少量氣泡存在；
?。?）柱子進口處過濾膜堵塞；
?。?）進樣閥手柄未旋到底(處于中間狀態(tài))；
?。?）導管中有顆粒狀固體堵塞；
對應排除方法：
?。?）更換柱子；
?。?）從柱后開始逐級向上拆開接頭檢查；
?。?）拆開泵接頭，用“清洗”檔趕盡氣泡。；
?。?）拆開柱前接頭、更換或清洗過濾膜；
?。?）左右旋動六通閥至極限位置；
?。?）逐級檢查，并更換導管；
6、基線大幅度波動(即紫外檢測器的輸出電平值極不穩(wěn)定)
原因：流通池內留有大量的氣泡；流通池漏液；紫外檢測器有故障
對應排除方法：排除氣泡；檢修流通池；停止恒流泵工作，檢查紫外檢測器
7、溫度指示波動＞±1℃
原因：
?。?）設置溫度值過低；
?。?）柱箱密封蓋未蓋好；
?。?）溫度控制器未啟動；
?。?）柱箱升過高溫后，再設置低溫；
?。?）溫控部件有故障；
?。?）控溫鉑電阻接觸不良；
對應排除方法：
（1）設置最低溫度應室溫以上10℃；
?。?）檢查柱安裝過程；
?。?）按起始鍵(指示燈亮)；
?。?）開機后會逐漸穩(wěn)定(正?，F(xiàn)象)；
?。?）修理溫度控制器；
?。?）擰緊固定鉑電阻引線的螺釘；
高效液相色譜儀分析樣品的種類繁多、物理形態(tài)廣泛、組成及其濃度復雜多變，對分析結果的干擾因素很多，為達到分析目的，樣品要進行有效的制備。高效液相色譜儀分析樣品的制備包括預處理、提取、凈化和濃縮等過程。
一、預處理：
1、固體樣品：含水較低，粉碎過篩。含水量較高，取使用部分烘干后，粉碎過篩。
2、液體樣品：攪拌混合均勻。
3、特殊樣品：根據實驗要求進行特殊處理。
二、提?。?br/> 1、浸提法（固-液萃取法）：將樣品浸泡在溶劑中，把固體樣品中的某些組分浸出。
2、萃取法（液-液萃取法）：利用被提取組分在互不相溶的兩種溶劑中分配系數(shù)的不同實現(xiàn)分離。
三、凈化：
1、萃取法：適用于液體樣品，少量多次。
2、化學法：通過使雜質或待測物發(fā)生化學反應而改變其溶解性，使其與原體系分離。
3、層析法：利用混合物中各組分理化性質的不同，使各組分在支持物上的移動速度不同，而將各組分分離。
四、濃縮：
1、常壓濃縮：通過升高溫度，將溶劑由液態(tài)轉化成氣態(tài)被抽走，從而達到濃縮目的。適用于揮發(fā)性和沸點相對較低的樣品。
2、減壓濃縮：通過抽真空，使容器內產生負壓，在不改變樣品化學性質的前提下降低樣品的沸點，使一些高溫下化學性質不穩(wěn)定或沸點高的溶劑在低溫下由液態(tài)轉化成氣態(tài)被抽走，從而達到濃縮目的。
3、冷凍干燥：冷凍的同時抽真空減壓，使溶劑升華。適用于生物活性樣品。
4、氮吹儀濃縮：采用氮氣對加熱樣品進行吹掃，使樣品迅速濃縮，達到快速分離純化的效果。適用于農殘檢測和制藥行業(yè)等樣品的批量處理。
液相色譜儀的應用，可用于高沸點、熱穩(wěn)定性差以及具有生理活性物質的分析。一般來說，沸點在450℃以下，相對分子質量小于450的有機物可用液相色譜儀分析，但這些物質只占有機物的15%～20%，其余的80%～85%有機物原則上都可采用高效液相色譜儀分析。
色譜柱的使用和維護，色譜柱的正確使用和維護十分重要，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。
在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。調節(jié)流速太快，避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料，因此在調節(jié)流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩。
反沖色譜柱，一般說來色譜柱不能反沖，只有生產者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效，預柱和保護柱，選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。
有時可以在進樣器前面連接一預柱，分析柱是鍵合硅膠時，預柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質被溶解。
避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內，需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。
液相色譜儀的基本結構，由輸液系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據處理系統(tǒng)等組成。
工作原理，利用混合物各組分在固定相和流動相中溶解、分配或吸附等化學作用性能的差異，使各組分在作相對運動的兩相中反復多次受到上述各作用力而達到相互分離。
從液相色譜儀工作流程中看到，色譜柱是實現(xiàn)分離的核心部件，要求柱效高、柱容量大和性能穩(wěn)定。柱性能與柱結構、填料特性、填充質量和使用條件有關。
色譜填料：經過制備處理后，用于填充色譜柱的物質顆粒，通常是5-10粒徑的球形顆粒。
色譜柱管：內部拋光的不銹鋼管。典型的液相色譜分析柱尺寸是內徑4.6mm，長250mm。
色譜柱：也稱固定相，是將色譜填料填充到色譜柱管中所構成的，色譜柱的填充，干法填充：在硬臺面上鋪上軟墊，將空柱管上端打開垂直放在軟墊上，用漏斗每次灌入50-100mg填料，然后垂直臺面墩10-20次。
濕法填充：又稱淤漿填充法，使用專門的填充裝置。
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