色譜儀為進行色譜分離分析用的裝置。下面小編給大家介紹下液相色譜和離子色譜具體是指什么?
液相色譜
1.高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography簡稱HPLC)又稱高速或高壓液相色譜。該方法是吸收了普通液相層析和氣相色譜的優(yōu)點,經(jīng)過適當改進發(fā)展起來的。它既有普通液相層析的功能(可在常溫下分離制備水溶性的物質(zhì)),又有氣相色譜的特點(即高壓,高速,高分辨率和高靈敏度);它不僅適應(yīng)于很多不易揮發(fā),難熱分解物質(zhì)的定性和定量分析,而且也適用于上述物質(zhì)的制備和分離。
高效液相色譜按其固定相的性質(zhì)可分為高效凝膠色譜,疏水性高效液相色譜,反相高效液相色譜高效離子交換液相色譜,高效親和液相色譜以及高效聚焦液相色譜等類型。用不同類型的高效液相色譜分離或分析各種化合物的原理基本上與相對應(yīng)的普通液相層析的原理相似。其不同之處是高效液相色譜靈敏,快速,分辨率高,重復(fù)性好,且須在色譜儀中進行。
2.離子色譜
離子色譜是高效液相色譜的一種,是分析陰陽離子的一種液相色譜方法,該方法具有選擇性好、靈敏、快速、簡便等優(yōu)點,并且可以同時測定多種組分。
通常情況下,離子色譜可以分為三種類型:離子交換色譜、離子排斥色譜、離子對色譜。
3.離子交換色譜
離子交換色譜以離子間作用力不同為原理,主要用于有機和無機陰、陽離子的分離。
4.離子排斥色譜
離子排斥色譜基于Donnan排斥作用,是利用溶質(zhì)和固定相之間的非離子性相互作用進行分離的。它主要用于無機弱酸和有機酸的分離,也可以用于醇類、醛類、氨基酸和糖類的分離。
液相色譜儀的日常操作條件:溫度:10-40℃;相對濕度<80%;可以是恒溫、恒濕,遠離高電干擾、高振動設(shè)備,使用后液相色譜儀檢測器的保養(yǎng)對液相色譜儀的使用壽命影響至關(guān)重要。
微小的顆粒雜質(zhì)或薄膜沉積在流通池里,會導(dǎo)致基線噪聲的增加或降低靈敏度。此時必須進行清洗處理。一般常規(guī)清洗不必拆下流通池,可直接在流通池入口處(即檢測器輸入端),接上一個專用的注射器接頭,依次用去離子水、酒精和3MHNO3沖洗流通池,最后用去離子水反復(fù)沖洗數(shù)次。檢測器出口用玻璃瓶盛接流出的廢液。
若檢測器已長期使用或受到高濃度樣品的污染,經(jīng)上述方法還不能除去污垢,就得取下流通池,液相色譜儀檢測器的保養(yǎng)按以下步驟拆開進行清洗:
1)卸下紫外檢測器側(cè)面遮蓋流通池的蓋板,松開固定流通池支架的螺釘,小心地取出流通池支架。
2)拆下連接流通池輸入、輸出端的不銹鋼導(dǎo)管(或PEEK導(dǎo)管),卸下流通池體。仔細擰下石英窗和透鏡的護圈。小心取下墊圈、石英窗、透鏡、護圈,放在一個盛有乙醇的燒杯內(nèi),用超聲波清洗機處理5min~10min。
3)用蒸餾水、乙醇沖洗流通池,并用超聲波清洗,最后用去離子水沖洗數(shù)次,除去池內(nèi)雜物。
4)烘干各部件(注意:避免用手直接接觸透鏡及石英窗)。
5)重新裝配流通池體。
6)按原樣裝在流通池支架上,并接好導(dǎo)管,并進行試漏。(方法:池體輸入端與恒流泵連接,開啟恒流泵(流動相用蒸餾水),視各密封點及石英窗口是否有漏液溢出。
7)裝入紫外檢測器機箱內(nèi),蓋上蓋板,并用原螺釘、螺帽固定。
注:上述液相色譜儀檢測器的保養(yǎng)拆洗應(yīng)有經(jīng)培訓(xùn)過的專業(yè)維修人員進行。
高效液固色譜儀是利用樣品各組分在固定相和流動相中吸附-解吸作用的差異,使各組分在作相對運動的兩相中反復(fù)多次受到吸附-解吸作用而達到相互分離。
主要類型:
液固吸附色譜
1.1分離原理液固色譜是基于各組分吸附能力的差異進行混合物分離的,其固定相是固體吸附劑。
1.2固定相;吸附色譜固定相可以分為極性和非極性兩大類。
1.3流動相;流動相要求:
1.3.1選用的溶劑應(yīng)當與固定相互不相溶,并能保持色譜柱的穩(wěn)定性
1.3.2選用的溶劑應(yīng)有高純度,以防所含微量雜質(zhì)在柱中積累,引起柱性能的改變。
1.3.3選用的溶劑性能應(yīng)與所使用的檢測器相匹配,如果使用紫外吸收檢測器,就不能選用在檢測波長下有紫外吸收的溶劑;若使用示差折光檢測器,就不能用梯度洗脫。
1.3.4選用的溶劑應(yīng)對樣品有足夠的溶解能力,以提高測定的靈敏度。
1.3.5選用的溶劑應(yīng)具有低的黏度和適當?shù)偷姆悬c。
1.3.6應(yīng)盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑,以保證工作人員的安全
1.4應(yīng)用:液固色譜是以表面吸附性能力為依據(jù)的,所以它常用于分離極性不同低的化合物,也能分離那些具有相同極性基團,但數(shù)量不同的樣品。
液液分配色譜
1.1分離原理;分配色譜法的原理與液液萃取相同,都是分配定律。
1.2固定相;分配色譜固定相由兩部分組成,一部分是惰性載體,另一部分是涂漬在惰性載體上的固定液。
1.3流動相;分內(nèi)色譜中,要求流動相盡可能不與固定液互溶
1.4應(yīng)用;既能分離極性化合物,又能分離非極性化合物。由于不同極性鍵合固定相的出現(xiàn),分離的選擇性可得到很好的控制。
鍵合相色譜
1.1分離原理
1.1.1正鍵合相色譜分離遠離:使用的是極性鍵和固定性,溶質(zhì)在此類固定相上的分離機理屬于分配色譜。
1.1.2反鍵合相色譜分離原理:使用的是極性較小的鍵合固定相,其分離機理可用疏溶劑作用理論來解釋。
1.2固定相;按極性大小可分為非極性、弱極性、極性化學(xué)鍵合固定相三種。
1.3流動相
1.3.1正鍵合相色譜中,采用和反相液液分配色譜相似的流動相,流動相的主體成分為己烷或庚烷。
1.3.2反相鍵合相色譜中,流動相采用和反相液液分配色譜相似的流動相,主題為水。
1.4應(yīng)用
1.4.1正鍵合相色譜法的應(yīng)用:多用于分離各類極性化合物如染料、炸藥、多巴胺、氨基酸等;
1.4.2反鍵合相色譜法的應(yīng)用:由于操作簡單,穩(wěn)定性和重復(fù)性好,該方法已成為一種通用型液相色譜分析方法。在生物化學(xué)、醫(yī)藥研究、食品分析和環(huán)境污染分析等多個領(lǐng)域有了很大的應(yīng)用和發(fā)展。
凝膠色譜
凝膠色譜又稱分子排阻色譜,它是按照分子尺寸大小順序進行分離的一種色譜方法。凝膠色譜法的固定相凝膠是一種多孔性的聚合材料,有一定的形狀和穩(wěn)定性。根據(jù)所用流動相的不同,凝膠色譜法可以分為兩類:即用水溶劑做流動相的凝膠過濾色譜法(GFC)與用有機溶劑如四氫呋喃做流動相的凝膠滲透色譜法(GPC)。
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