紫外可見分光光度計(jì)可達(dá)到檢測質(zhì)量與成分的目的。在對不同的儀器進(jìn)行分析時(shí)，紫外可見光光度計(jì)是常規(guī)的分析儀器之一，原理就是紫外可見光度法。
紫外可見光光度計(jì)有很多的特點(diǎn)：
如第一，由于選擇性好而且靈敏度較高，維護(hù)管理很方便，所以在使用中更為常見；
第二，它的結(jié)構(gòu)較為簡單，可以很方便地進(jìn)行操作而且在成本上又不是非常貴。
以光路設(shè)計(jì)為基礎(chǔ)，對紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行分類，可以依據(jù)光路設(shè)計(jì)分為三種類型：單光束分光光度計(jì)、雙光束分光光度計(jì)以及雙波長分光光度計(jì)。
鑒于此，本文主要分析紫外可見分光光度計(jì)主要技術(shù)指標(biāo)及其檢定方法。
1.紫外可見分光光度法工作原理以及相關(guān)應(yīng)用
紫外可見分光光度法的工作原理就是利用不同物質(zhì)的分子在紫外可見光譜區(qū)上的輻射吸收的不同，利用分子的這一特性來進(jìn)行有效地區(qū)分辨別。
紫外可見分光光度法在物質(zhì)的定性定量分析以及物質(zhì)純度分析物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析等多種方面都有著廣泛的應(yīng)用，起著不可或缺的作用。
例如：此種檢測方法在食品行業(yè)中的運(yùn)用，可以對食品的質(zhì)量進(jìn)行有效地安全監(jiān)測。而對于生活質(zhì)量方面來說，食品衛(wèi)生及質(zhì)量是較為重要的一點(diǎn)，只有確保食品不會出現(xiàn)安全問題，才能夠有效地促進(jìn)國民健康生活。
現(xiàn)階段，我國出現(xiàn)的食品安全問題有以下幾種：食品造假；在食品添加對人體有害的添加劑；一些非法添加物的濫用；除了這些主要問題之外還存在食品殘留農(nóng)（獸）藥、微生物或者重金屬等有害物質(zhì)的情況，以上情況都會造成食品出現(xiàn)質(zhì)量安全問題，因此必須對食品進(jìn)行安全分析、檢測，確保食品不會出現(xiàn)質(zhì)量安全問題。
2.紫外可見分光光度計(jì)主要技術(shù)指標(biāo)
波長準(zhǔn)確度及其檢定方法
波長的實(shí)際測定值和理論值相減，就是紫外可見分光光度計(jì)的波長的準(zhǔn)確度。它在測試不同的儀器時(shí)，作用非常大，是非常關(guān)鍵的技術(shù)指標(biāo)。
在我國，計(jì)量檢定工作，波長準(zhǔn)確度是很重要的。檢定紫外可見分光光度計(jì)的波長準(zhǔn)確度有很多的方式，下面將通過兩種方法進(jìn)行壽命說明：汞燈和氖燈的利用。
汞燈
我國在對紫外分光光度計(jì)波長準(zhǔn)確度進(jìn)行檢定時(shí)，很多的生產(chǎn)廠一般都廣泛利用汞燈進(jìn)行測試。具體的操作流程就是：
將原光源拆下來，采用標(biāo)準(zhǔn)燈，對標(biāo)準(zhǔn)光源燈各條的特征譜線進(jìn)行測試，波長準(zhǔn)確度就是測量值和理論值做差。
自利用汞燈進(jìn)行測試的過程中，能量測量作為測量的方式，波段的范圍設(shè)置在245-560nm范圍之內(nèi)，空氣作為樣品的參考系，光譜帶的寬設(shè)置為2nm，再通過波長掃描。波長準(zhǔn)確度就是汞燈的各特征波長的測量值和其相應(yīng)的理論值之差。為了確保準(zhǔn)確度，可以重復(fù)進(jìn)行3次，波長準(zhǔn)確度就選擇3次的平均值。
氖燈
在對紫外可見分光光度計(jì)的波長準(zhǔn)確度進(jìn)行檢測時(shí)，通常人們在選用標(biāo)準(zhǔn)燈時(shí)用氖燈。在儀器紫外區(qū)，由于氖燈的連續(xù)光譜優(yōu)勢，就會在紫外區(qū)作為光源。
在可見區(qū)，由于光譜中波長為656.1nm和為486.0nm是很容易分離的，而且具有高的強(qiáng)度，譜線特征非常明顯，所以對儀器波長準(zhǔn)確度進(jìn)行檢定時(shí)可以利用譜線。在我國，對于儀器進(jìn)行計(jì)量檢定都會用波長準(zhǔn)確度較為高的標(biāo)準(zhǔn)燈-氖燈。
波長重復(fù)性及其檢定方法
多次測試波長之后數(shù)據(jù)符合程度，也就是多次測試波長的數(shù)據(jù)離散性就是波長的重復(fù)性(WavelengthRepeatability)。檢定波長的重復(fù)性方法，操作簡單。第一種方法，測試波長的準(zhǔn)確度之后，測試三次取平均值，波長重復(fù)性就是通過和3次測試中最小值或者最大值做的差；第二種，測試波長的準(zhǔn)確度，要經(jīng)過3次測試，波長重復(fù)性就是最大值與最小值之差。
光度準(zhǔn)確度及其檢定方法
光度的實(shí)際測定值和理論值之差就是光度準(zhǔn)確度(PhotoMtricAccuracy)。它倆之間的差越小，測量就會更準(zhǔn)確，光度的準(zhǔn)確度就會更高。一般，表示紫外可見分光光度計(jì)光度的準(zhǔn)確度有以下兩種方式：
①透射比誤差或者透射比準(zhǔn)確度（TransmittanceAccuracy)，表示用TA(或AT);②吸光度誤差（AbsorbanceError)或者是吸光度準(zhǔn)確度(Absorbd-nceAccuracy)，在表示用AA(或AA)時(shí)，要注意測量時(shí)具體的吸光度情況。
3.紫外可見分光光度法的合理化運(yùn)用
溶液中物質(zhì)含量的測定
應(yīng)用紫外可見分光光度計(jì)測定標(biāo)準(zhǔn)溶液和未知液的吸光度進(jìn)而進(jìn)行比較；也可先測出不同濃度標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在一定濃度范圍內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)曲線為直線，然后測定出未知液吸光度，即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到其對應(yīng)濃度。
化合物的鑒定
用不同波長的單色光分別通過某一濃度溶液，測定每一種單色光的吸光度，之后分別以波長和分光度作為橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)，繪制得到吸收光譜曲線。
不同食品有其特定的吸收光譜曲線，借此可以鑒定食品種類。紫外吸收光譜分析主要用于已知物質(zhì)定量分析，測定化合物中含有微量的具有紫外吸收的雜質(zhì)。
反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研宄
借助于分光光度法可得出特定化學(xué)反應(yīng)速度常數(shù)，借此從兩個(gè)或兩個(gè)以上溫度條件下的速度數(shù)據(jù)得出反應(yīng)活化能。
絡(luò)合物組成和穩(wěn)定常數(shù)的測定金屬離子可與有機(jī)物形成絡(luò)合物且在紫外可見區(qū)有吸收，據(jù)此可利用分光光度法來研宄其組成。
總之，紫外可見分光光度法是利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射的吸收來進(jìn)行分析的一種儀器分析，這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價(jià)電子和分子軌道上的電子在電子能級間的躍遷。
朗伯-比耳定律是光吸收的基本定律，是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。紫外可見分光光度計(jì)在食品檢驗(yàn)中應(yīng)用廣泛，主要包括定量、定性和結(jié)構(gòu)分析以及反應(yīng)動(dòng)力學(xué)和溶液平衡研宄。
紫外可見分光光度計(jì)是按照物質(zhì)的吸收光譜來對其成分、結(jié)構(gòu)以及相互作用進(jìn)行研究的一種儀器。紫外可見分光光度計(jì)擁有分析成本低、操作簡便、快速、準(zhǔn)確度高等眾多優(yōu)點(diǎn)，無論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域，還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理行業(yè)，都獲得了日益廣泛的應(yīng)用。
在使用紫外可見分光光度計(jì)時(shí)，必須要注意一些使用后的維護(hù)保養(yǎng)和一些基本使用注意事項(xiàng)，才能達(dá)到更好的使用效果。
1、使用的吸收池必須潔凈，并注意配對使用。量瓶、移液吸管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
2、取吸收池時(shí)，手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè)，裝盛樣品以池體的4/5為度，使用揮發(fā)性溶液時(shí)應(yīng)加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應(yīng)無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。
3、啟動(dòng)儀器之前，一定要把樣品室內(nèi)存放的防潮劑拿出，儀器進(jìn)行正常運(yùn)轉(zhuǎn)檢查的時(shí)候，千萬不能開啟樣品室蓋。
4、要求比色皿當(dāng)中的液體占總體積的66%-80%較佳，千萬不能讓液體太多，以致于液體外泄腐蝕儀器；正常檢測的時(shí)候，需要保證比色皿干凈，內(nèi)壁上液滴需要使用專業(yè)的紙進(jìn)行擦拭，千萬不能使用手進(jìn)行直接的擦拭。
5、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。
6、選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度值會偏低，狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)，對于大部分被測品種，可以使用2nm縫寬。
7、正常運(yùn)轉(zhuǎn)的時(shí)候，嚴(yán)禁把液體溶劑放置于儀器的表層上，如果出現(xiàn)液體外泄的情況，一定要保證進(jìn)行及時(shí)的清潔處理。
紫外可見分光光度計(jì)的人性化的整體設(shè)計(jì)：自動(dòng)化程度高，維護(hù)方便。
極快的掃描速度
波長移動(dòng)速度可達(dá)7000nm/min，波長掃描速度可達(dá)2500nm/min，大大提高用戶工作效率。
全自動(dòng)操作
T6系列產(chǎn)品具備自動(dòng)波長定位、自動(dòng)換燈、自動(dòng)波長校準(zhǔn)、自動(dòng)樣品池切換功能。
內(nèi)置的比色皿存放架
在樣品室一側(cè)設(shè)置了樣品池架，方便用戶的使用。
自動(dòng)的燈壽命檢測系統(tǒng)
自動(dòng)燈壽命檢測系統(tǒng)，確保儀器工作的可靠性。
方便的可清洗防塵過濾網(wǎng)
采用可清洗防塵過濾網(wǎng)設(shè)計(jì)，確保儀器內(nèi)部清潔，便于維護(hù)。
簡便的拆卸方式
儀器底部的鎖緊機(jī)構(gòu)和背后的旋鈕機(jī)構(gòu)，方便用戶的擴(kuò)展和維護(hù)。
紫外可見分光光度計(jì)的操作步驟
1開機(jī)自檢：打開主機(jī)電源，儀器開始初始化;約3分鐘時(shí)間初始化完成，初始化完成后儀器進(jìn)入主菜單界面。
2進(jìn)入光度測量狀態(tài)后按“ENTER”鍵進(jìn)入光度測量主界面;按“RETURN”鍵返回上一級菜單。
3進(jìn)入測量界面：按“START/STOP”鍵進(jìn)入樣品測定界面。
4設(shè)置測量波長：按“GOTO入”鍵，在界面中輸入測量的波長，例如需要在460nm測量，輸入460，按“ENTER”鍵確認(rèn)，儀器將自動(dòng)調(diào)整波長。
5進(jìn)入設(shè)置參數(shù)：這個(gè)步驟中主要設(shè)置樣品池。按“SET“鍵進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)定界面，按“下”鍵使光標(biāo)移動(dòng)到“試樣設(shè)定”。按“ENTER”鍵確認(rèn)，進(jìn)入設(shè)定界面。
6設(shè)定使用樣品池個(gè)數(shù)：按“下”鍵使光標(biāo)移動(dòng)到“使用樣池?cái)?shù)”，按“ENTER”鍵循環(huán)選擇需要使用的樣品池個(gè)數(shù)。(主要根據(jù)使用比色皿數(shù)量確定，比如使用2個(gè)比色皿，則修改為2)
7樣品測量：按“RETURN”鍵返回到參數(shù)設(shè)定界面，再按“RETURN”鍵返回倒光度測量界面。在1號樣品池內(nèi)放入空白溶液，2號池內(nèi)放入待測樣品。關(guān)閉好樣品池蓋后按“ZERO”鍵進(jìn)行空白校正，再按“START/STOP”鍵進(jìn)行樣品測量。
7.1如需要測量下一個(gè)樣品，取出比色皿，更換為下一個(gè)測量的樣品按“START/STOP”鍵即可讀數(shù)。
7.2如需更換波長，可直接按“GOTO入”鍵調(diào)整波長。注意更換波長后必須重新按“ZERO”進(jìn)行空白校正。
如果每次使用的比色皿數(shù)量是固定個(gè)數(shù)，下一次使用儀器可以跳過第2.5、2.6步驟直接進(jìn)入樣品測量。
8結(jié)束測量：測量完成后按“PRINT”鍵打印數(shù)據(jù)，如果沒有打印機(jī)請記錄數(shù)據(jù)。退出程序或關(guān)閉儀器后測量數(shù)據(jù)將消失。
確保已從樣品池中取走所有比色皿，清洗干凈一邊下一次使用。按“RETURN”鍵直接返回到儀器主菜單界面后再關(guān)閉儀器電源。
以上便是今天關(guān)于紫外可見分光光度計(jì)用于的樣品測量及操作步驟的指南的全部分享了，希望對大家今后使用本設(shè)備能有幫助。
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