熒光分光光度計與紫外分光光度計屬一類產(chǎn)品,結(jié)構(gòu)均由激發(fā)光源、單色器、樣品室、光電倍 增管和讀出(記錄)裝置所組成。但是它們光源是不同的,熒光分光光度計多采用高壓汞燈、氙燈和激光光源。同時,熒光測量多采用激發(fā)光和發(fā)射光成直角的光路,儀器組件的布置有所不同。
下圖為某型號熒光分光光度計的光學(xué)系統(tǒng)圖,其主要工作原理是:當(dāng)光源光束經(jīng)入射單色器色散,提取所需波長單色光照射于樣品上,由樣品發(fā)出的熒光經(jīng)發(fā) 射單色器色散后照射于光電倍增管,光電倍增管把熒光強度信號轉(zhuǎn)化成電信號并經(jīng)放器放大后記錄或讀出信號。
熒光分光光度計的光學(xué)系統(tǒng)圖
1.氙燈(150W);2.透鏡;3.光束分裂器;4.水平狹縫;5.激發(fā)單色器光柵;6.參考放電管;7.關(guān)閘;8.樣品室關(guān)閘;10.發(fā)射單色器光柵;12.光電倍增管
(1)激發(fā)光源:要比吸收法中光源強度大。
汞燈:發(fā)射強度大、穩(wěn)定,不需復(fù)雜電源,但譜線不連續(xù),數(shù)目少,主要用于濾片熒光計。
碘鎢燈:提供連續(xù)光譜300~700mn。
氙燈:發(fā)出射線的強度大,譜線連續(xù),分布于200~700 nm光域內(nèi),且在300~400nm 波段內(nèi)射線強度幾乎相等,但該燈的電源功率要求大,且電源穩(wěn)定,因此電源結(jié)構(gòu)復(fù)雜。
激光:發(fā)光強度大,能極大地提高熒光分析的靈敏度。
(2)樣品池:通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時,光源與檢測器成直角安排;測量固體時,光源與檢測器成銳角安排。低溫?zé)晒鉁y定時在一樣品池外套一個液氮的透明石英真空瓶。
(3)單色器:熒光分光計通常具有兩個濾光片:第一濾光片在光源與樣品池之間,濾去不需要的光,讓需要的激發(fā)光通過。第二濾光片在樣品池與檢測器之間,濾去溶劑散射 光、容器表面散射光、雜質(zhì)發(fā)出的光等,讓待測物質(zhì)發(fā)射的熒光通過。
熒光分光光度計通常具有兩個光柵,位置同濾光片,單色性好。
(4)檢測器:因熒光通常較弱,采用光電倍增管作檢測器,靈敏度高。選擇光電倍增管要考慮:響應(yīng)波長、靈敏度和嗓聲水平。 藍敏管對蛋白質(zhì)、核酸的測量適用,而紅敏管則適用于熒光染料檢測。
(5)顯示系統(tǒng):光度表、計算機操作系統(tǒng)等。
補充說明:與紫外分光光度計的結(jié)構(gòu)區(qū)別:
1.熒光分光光度計采用的是垂直的測量方式,以消除透射光的影響。
2.檢測器前面有無單色器,熒光分光光度計有兩個單色器又上圖可以看出,能夠獲得單色性較好的激發(fā)光并消除其他雜散光干擾。
正確了解熒光分光光度計的結(jié)構(gòu),也是能夠幫助我們更好使用和操作,一定要仔細閱讀哈~
熒光分光光度計作為分光光度計中的一種,目前被廣泛應(yīng)用在生物化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化工等部門。那么我們對于小白的我們,到底該如何選購熒光分光光度計呢?下面小編來告訴它的的選購小技巧,以方便大家更好的選購!
1、首先要考慮品牌以及代理商信譽以及售后服務(wù),不僅關(guān)系到儀器的質(zhì)量穩(wěn)定性,還關(guān)系到以后的維修服務(wù)。
2、然后要關(guān)注儀器的狹縫(光譜帶寬),狹縫還決定了儀器的分辨率,良好的分辨率可以分辨間隔很小的波峰。
3、儀器的信噪比是一項非常重要的參數(shù),它一定程度上反映儀器的檢出能力。
4、波長準確度和重復(fù)性也是一項比較重要的指標(biāo)。
5、掃描速度雖然也很重要,但這和需求有關(guān)系,如果對時間沒有太多的要求,可以不必在意。
6、綜合以上進行對比選購性價比較為高的。
以上就是熒光分光光度計選購的全部內(nèi)容,如果還想了解更多關(guān)于資訊請關(guān)注本站。
熒光分光光度計與紫外分光光度計屬一類產(chǎn)品,結(jié)構(gòu)均由激發(fā)光源、單色器、樣品室、光電倍 增管和讀出(記錄)裝置所組成。
但是它們光源是不同的,熒光分光光度計多采用高壓汞燈、氙燈和?激光光源。
同時,熒光測量多采用激發(fā)光和發(fā)射光成直角的光路,儀器組件的布置有所不同。
(1)激發(fā)光源:要比吸收法中光源強度大。
汞燈:發(fā)射強度大、穩(wěn)定,不需復(fù)雜電源,但譜線不連續(xù),數(shù)目少,主要用于濾片熒光計。
碘鎢燈:提供連續(xù)光譜300~700mn。
氙燈:發(fā)出射線的強度大,譜線連續(xù),分布于200~700 nm光域內(nèi);
且在300~400nm 波段內(nèi)射線強度幾乎相等,但該燈的電源功率要求大,且電源穩(wěn)定,因此電源結(jié)構(gòu)復(fù)雜。
激光:發(fā)光強度大,能極大地提高熒光分析的靈敏度。
(2)樣品池:
通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。
測量液體時,光源與檢測器成直角安排;
測量固體時,光源與檢測器成銳角安排。
低溫?zé)晒鉁y定時在一樣品池外套一個液氮的透明石英真空瓶。
(3)單色器:
熒光分光計通常具有兩個濾光片:第一濾光片在光源與樣品池之間,濾去不需要的光,讓需要的激發(fā)光通過。
第二濾光片在樣品池與檢測器之間,濾去溶劑散射 光、容器表面散射光、雜質(zhì)發(fā)出的光等,讓待測物質(zhì)發(fā)射的熒光通過。
熒光分光光度計通常具有兩個光柵,位置同濾光片,單色性好。
(4)檢測器:
因熒光通常較弱,采用光電倍增管作檢測器,靈敏度高。
選擇光電倍增管要考慮:響應(yīng)波長、靈敏度和嗓聲水平。
藍敏管對蛋白質(zhì)、核酸的測量適用,而紅敏管則適用于熒光染料檢測。
(5)顯示系統(tǒng):光度表、計算機操作系統(tǒng)等。