紫外可見分光光度計主要由電光系統(tǒng)、光學系統(tǒng)、光電系統(tǒng)、電子系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理、輸出打印系統(tǒng)等幾個部分組成。
(1)電光系統(tǒng)：
電光系統(tǒng)主要由氘燈、鎢燈和相應的電源組成。電光系統(tǒng)對整機的穩(wěn)定性有很大的影響，是儀器不穩(wěn)定的主要原因之一。
(2)光學系統(tǒng)：
光學系統(tǒng)包括外光路系統(tǒng)（轉向平面鏡、聚光鏡）、單色器兩個主要部分；其中，外光路和單色器各有很多類型。單色器是紫外可見分光光度計雜散光的主要來源，是整機使用時，主要分析誤差的來源之一。
(3)光電系統(tǒng)：
夕光電系統(tǒng)是將光信號變?yōu)殡娦盘柕年P鍵部件，直接影響儀器的靈敏度和適用范圍；一般有光電管、光電倍增管、硅光電池、二極管陣列等。
(4)電子系統(tǒng)：
電子系統(tǒng)主要由放大器、A/D變換器等組成；其中的放大器，也是影響整機靈敏度、穩(wěn)定性的主要部件。它又是儀器噪聲的主要來源部件，直接影響紫外可見分光光度計的分析誤差。
(5)數(shù)據(jù)處理、輸出打印系統(tǒng)：
數(shù)據(jù)處理、輸出打印系統(tǒng)是決定整機的自動化程度的關鍵部件；特別是軟件部分，直接影響紫外可見分光光度計的質量。
1、關閉儀器電源開關。
2、擰下2個3m/m螺絲，卸下光源燈室上蓋板。
3、用“板手”插入鎢鹵素燈架上的螺孔逆時針酌量旋松，向上拔出鎢鹵素燈。
4、插入新的鎢鹵素燈（到底）并少許進行固定。
5、將儀器波長調至 600nm，開啟儀器電源開關。
6、調節(jié)鎢燈上下位置少許或燈座的固定螺位置少許，使 T 值為最高并緊固。
7、使球面聚焦鏡射的黃色光斑正好照射于單色光器，入射狹縫的正中央即可。
8、固定鎢鹵素燈的兩個固定螺（酌量用力），重新裝好光源燈室上蓋板。
二、鎢鹵素燈的更換和調整流程
1、關閉儀器電源開關
2、擰下 2 個 F 3m /m 螺絲，卸下光源燈室上蓋板。
3、用小螺絲刀擰松氘燈的三根電線（認好高壓線）用絕緣尖嘴鉗取下三根線。
4、旋松（逆時針方向）氘燈架上夾緊螺絲少許向上拔出氘燈。
5、將儀器波長設定為 220nm
6、裝上新的氘燈
7、將氘燈的發(fā)射孔朝向濾色片中反光鏡一側。
8、使氘燈的發(fā)射孔與儀器底板間距調為約49mn。
9、正確連結氘燈的三根電線并固定擰緊。
10、開啟儀器電源開關
11、調節(jié)氘燈上下左右位置少許或氘燈固定架的整個位置少許，使當前 T 值為最高并緊固。
12、使球面聚集鏡射出的紫色光斑正好照射于單色光器入射狹縫的正中央即可。
13、將氘燈夾緊螺絲酌量擰緊。
14、重新裝好光源燈室上蓋板。
紫外可見分光光度計對于我們來說熟悉卻也比較難讀懂理解的。
天天有人提起他的名字卻沒多少人知道他的工作原理。
下面我們來淺談一下。
光譜工作原理：
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。
由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同；
因此，每種物質就有其特有的、固定的吸收光譜曲線；
可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。
分光光度分析就是根據(jù)物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。
它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息?？梢杂脴藴使鈭D譜再結合其它手段進行定性分析。
根據(jù)Lambert-Beer定律說明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說明光的吸收與溶液濃度成正比；
如果同時考慮吸收層厚度和溶液濃度對光吸收率的影響，即得朗伯-比耳定律。
即A=εbc，(A為吸光度，ε為摩爾吸光系數(shù)，b為液池厚度，c為溶液濃度)就可以對溶液進行定量分析。
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。
若兩者是同一物質，則兩者的光譜圖應完全一致。
如果沒有標樣，也可以和現(xiàn)成的標準譜圖對照進行比較。
這種方法要求儀器準確，精密度高，且測定條件要相同。
實驗證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同;
這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪一種溶劑。
紫外可見分光光度計的工作環(huán)境：
1）分光光度計安放在干燥的房間內，使用溫度為5-35℃，相對濕度不超過85%
2）儀器應放置在堅固平穩(wěn)的工作臺上，且避免強烈的震動或持續(xù)的震動
3）室內照明不宜太強，且應避免直射日光的照射
4）電扇不宜直接向儀器吹風，以防止光源燈因發(fā)光不穩(wěn)定而影響儀器的正常使用
5）盡量遠離高強度的磁場、電場及發(fā)生高頻波的電氣設備
6）避免在有硫化氫等腐蝕性氣體的場所使用
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