紫外可見分光光度計(jì)引用新型技術(shù)，其功能強(qiáng)大，采用單色器技術(shù)，波長范圍190-1100nm，是各種涉及水和廢水分析領(lǐng)域的通用儀器，應(yīng)用范圍包括市政和工業(yè)廢水，飲用水，加工過程用水，地表水，冷卻水和鍋爐補(bǔ)給水等。
1、單光束UV：最傳統(tǒng)的紫外，單光源發(fā)射單光束，全程密閉，通過光柵，照射樣品，最后由光電倍增管監(jiān)測器檢測。
缺點(diǎn)：測完空白再測試樣品，全波段分析時(shí)間較長（一般2min）。
2、比例雙光束UV：單光源單光束，全程密閉，通過光柵，加入棱鏡，把光分為兩束，分別照射樣品與空白，再合并光，進(jìn)入光電倍增管檢測器，通過差減法計(jì)算結(jié)果。
好處：空白樣品同時(shí)檢測。
缺點(diǎn)：靈敏度下降，全波段分析時(shí)間較長。
3、雙光束UV：單光源單光束，全程密閉，通過棱鏡分出兩道光，分別通過一光柵，分別進(jìn)入各自的光點(diǎn)倍增管檢測器。
好處：加強(qiáng)靈敏度，同時(shí)測量空白與樣品。
缺點(diǎn)：全波段分析時(shí)間較長。
4、全波段UV：單光源單光束，樣品與空白暴露在空氣中，照射樣品，開始進(jìn)入密閉箱，通過光柵，進(jìn)入DAD檢測器。
好處：空白只需要檢測一次，如果你愿意一輩子檢測這一次都可以。檢測樣品不密閉，外界光線對(duì)其無影響，使用方便且精確。分析任何波段或全波段不到1s。
缺點(diǎn)：貴（25W）。
1、保護(hù)光源
光源燈有一定的壽命，儀器不工作時(shí)不要開燈，若工作間歇時(shí)間短，可不關(guān)燈。
一旦停機(jī)，則要待燈冷卻后再重新啟動(dòng)，并預(yù)熱15min。
燈泡發(fā)黑或亮度明顯減弱或不穩(wěn)定時(shí)，就及時(shí)更換。
經(jīng)經(jīng)紫外光照射后形成結(jié)痕可用無水乙醇去除。
2、保證合適的工作環(huán)境
溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。
不適宜的溫度和濕度可引起機(jī)械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機(jī)械部分的誤差或性能下降；
造成光柵、反射鏡、聚焦鏡等光學(xué)部件的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等；
甚至使儀器停止工作，從而影響儀器壽命。
維護(hù)保養(yǎng)時(shí)應(yīng)定期加以校正溫度和濕度。
實(shí)驗(yàn)室，特別是地處南方地區(qū)的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)具備四季恒溫的儀器室，配備恒溫設(shè)備。
環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體也可以影響機(jī)械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關(guān)、按鍵、光電耦合器的可靠性，也是造成光學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一。
因此必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器內(nèi)衛(wèi)生條件，防塵。
3、定期除塵、調(diào)校
儀器使用一定時(shí)間后，內(nèi)部會(huì)積累一定量的塵埃，可以由維修工程師或在工程師指導(dǎo)下定期開啟儀器外罩對(duì)內(nèi)部進(jìn)行除塵工作，同時(shí)將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對(duì)光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔，必要時(shí)對(duì)光路進(jìn)行校準(zhǔn)，對(duì)機(jī)械部分進(jìn)行清潔和必要的潤滑，最后恢復(fù)原狀，再進(jìn)行一些必要的檢測、調(diào)校和記錄。
4、正確使用比色皿
拿比色皿時(shí)，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。
清洗比色皿時(shí)，先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。若被比色皿被有機(jī)物沾污，可用鹽酸-乙醇混合洗滌液（1:2）浸泡片刻，再用水沖洗。每次做完實(shí)驗(yàn)應(yīng)立即洗凈比色皿。
比色皿外壁的水用擦鏡紙或細(xì)軟的吸水紙吸干，以保護(hù)透光面。
測定有色溶液吸光度時(shí)，一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次，以免改變有色溶液的濃度。在測定一系列溶液的吸光度時(shí)，通常都按由稀到濃的順序測定，以減少測量誤差。
若分光光度計(jì)噪音比較大，有可能是光源燈泡使用時(shí)間超過壽命期，可更換光源燈泡。
若自檢時(shí)提示波長自檢出錯(cuò)，有可能是自檢過程中打開過儀器樣品室的蓋子，可關(guān)上儀器樣品室蓋子，重新自檢。
紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry)，又稱紫外吸收光譜法( Ultraviolet Moleculor Absorption Spectrophtometry)，它是研究分子吸收190.0~1100.0nm波長范圍內(nèi)的吸收光譜。紫外吸收光譜主要產(chǎn)生于分子價(jià)電子在電子能級(jí)間的躍遷，是研究物質(zhì)電子光譜的分析方法。通過測定分子對(duì)紫外光的吸收，可以對(duì)大量的無機(jī)物和有機(jī)物進(jìn)行定性和定量測定。
苯酚是一種劇毒物質(zhì)，可以致癌，已經(jīng)被列入有機(jī)污染物的黑名單。但在一些藥品、食品添加劑、消毒液等產(chǎn)品中均含有一定量的苯酚。如果其含量超標(biāo)，就會(huì)產(chǎn)生很大的毒害作用。苯酚在紫外光區(qū)的最大吸收波長λmax=270nm。對(duì)苯酚溶液進(jìn)行掃描時(shí)，在270nm處有較強(qiáng)的吸收峰。
定性分析時(shí)，可在相同的條件下，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品進(jìn)行波長掃描，通過比較未知樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品的光譜圖對(duì)未知樣進(jìn)行鑒定。在沒有標(biāo)準(zhǔn)樣品的情況下，可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)譜圖或有關(guān)的電子光譜數(shù)據(jù)表進(jìn)行比較。
定量分析是在270nm處測定不同濃度苯酚的標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光值，并自動(dòng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再在相同的條件下測定未知樣品的吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可得出未知樣中苯酚的含量。
儀器與試劑
1．紫外可見分光光度計(jì)
2．容量瓶（1000ml、250ml）
3．比色管（50ml）
4．吸量管（5ml、10ml）
5．苯酚（AR）
準(zhǔn)確稱取苯酚1.000g于200ml蒸餾水中，溶解后定量轉(zhuǎn)移到1000ml的容量瓶中，作為儲(chǔ)備液。
紫外可見分光光度法測定苯酚含量實(shí)驗(yàn)步驟
1．打開儀器及計(jì)算機(jī)、顯示器、打印機(jī)電源，進(jìn)入軟件操作系統(tǒng)，待儀器自檢結(jié)束，點(diǎn)擊OK，進(jìn)入操作主頁面。
2．波長掃描
(1)確定波長掃描參數(shù)：
光譜帶寬2.0nm
光度測量形式 吸光值
掃描范圍 200～500nm
掃描速度 1000nm/min
數(shù)據(jù)間隔點(diǎn) 1nm
存儲(chǔ)文件 選擇路徑和文件名
(2)做基線
將盛有參比液的比色皿分別放入?yún)⒈裙饴泛蜆悠饭饴?，開始進(jìn)行基線掃描
(3)波長掃描
將盛有樣品和參比液的比色皿分別放入?yún)⒈裙饴泛蜆悠饭饴罚c(diǎn)擊開始掃描
(4)定性分析
將試樣的波長掃描圖與已知樣的在相同條件下的波長掃描圖或已知的譜圖相比較，對(duì)試樣進(jìn)行定性分析
3．定量分析
(1) 標(biāo)準(zhǔn)系列的配制
于5支50ml的比色管中，用吸量管分別加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，用蒸餾水定容至刻度，搖勻。
(2) 確定定量分析參數(shù)
設(shè)置a：方法 對(duì)每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的重復(fù)讀取次數(shù) 1
對(duì)每個(gè)樣品的重復(fù)讀取次數(shù) 1
是否需要測量標(biāo)準(zhǔn)樣品 需要
校正曲線 線性
計(jì)算方式 用峰高計(jì)算定量的數(shù)值
b：樣品 總共測量樣品的個(gè)數(shù) 6
輸入待測樣品的名稱 苯酚
樣品標(biāo)簽從第幾號(hào)開始編輯 1
輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度值
在std欄中對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行標(biāo)識(shí)
c：質(zhì)量控制 需要質(zhì)量控制
對(duì)有問題的測量結(jié)果標(biāo)記后繼續(xù)測量
輸入允許的最大濃度
輸入允許的最低濃度
d：儀器 狹縫 2.0nm
測定形式 吸光值
強(qiáng)度倍數(shù) 1
工作波長 270nm
積分時(shí)間 5s
把空白液注入兩個(gè)比色皿內(nèi)，并分別放入?yún)⒈群蜆悠饭饴罚础皕ero”進(jìn)行調(diào)零，然后按“OK”
e：報(bào)告 需要報(bào)告 要在線報(bào)告
f：結(jié)果儲(chǔ)存 輸入選擇的路徑與文件名
(3)開始定量測量，按照提示放入各樣品
(4)觀察標(biāo)準(zhǔn)、樣品及校正曲線
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