分光光度計(jì)是一種常用的分析儀器產(chǎn)品,在運(yùn)行過(guò)程中可能會(huì)由于種種原因?qū)е路止夤舛扔?jì)產(chǎn)生故障問(wèn)題,對(duì)于分光光度計(jì)的正常使用會(huì)造成一定影響。那么分光光度計(jì)怎樣維護(hù)呢?下面小編就來(lái)具體介紹一下分光光度計(jì)維護(hù)方法。
1)若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng),需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。
2)指針式儀器在未接通電源時(shí),電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。
3)比色皿使用完畢后,請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。
4)操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈,以免影響光效率。
5)1900型等分光光度計(jì),由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測(cè)微弱光電信號(hào),而不能用來(lái)檢測(cè)強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號(hào)漂移,靈敏度下降。針對(duì)其上述特點(diǎn),在維修、使用此類儀器時(shí)應(yīng)注意不讓光電倍增管長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,因此在預(yù)熱時(shí),應(yīng)打開(kāi)比色皿蓋或使用擋光桿,避免長(zhǎng)時(shí)間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。
6)放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。
7)比色杯的配套性問(wèn)題。比色杯必須配套使用,否則將使測(cè)試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測(cè)試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下;分別向被測(cè)的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長(zhǎng)處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個(gè)池的透射比值調(diào)至100%,測(cè)量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在±0.5%的范圍內(nèi)則可以配套使用,若超出此范圍應(yīng)考慮其對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。
一、開(kāi)機(jī)預(yù)熱
儀器在使用前應(yīng)預(yù)熱30分鐘。
二、波長(zhǎng)調(diào)整
轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)旋鈕,并觀察波長(zhǎng)顯示窗,調(diào)整至需要的測(cè)試波長(zhǎng)。
注意事項(xiàng):轉(zhuǎn)動(dòng)測(cè)試波長(zhǎng)調(diào)100%T/0A后,以穩(wěn)定5分鐘后進(jìn)行測(cè)試為好(符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及質(zhì)監(jiān)局檢定規(guī)程要求)。
三、設(shè)置測(cè)試模式
按動(dòng)“功能鍵”,便可切換測(cè)試模式。相應(yīng)的測(cè)試模式循環(huán)如下:*開(kāi)機(jī)默認(rèn)的測(cè)試方式為吸光度方式
四、結(jié)果打印(721型無(wú)此功能)
在得到測(cè)試結(jié)果后按動(dòng)“打印”鍵便可打印結(jié)果(需外接標(biāo)準(zhǔn)串行打印機(jī))。
五、光源切換(適用于752、754、755B型)
因?yàn)閮x器在紫外區(qū)和可見(jiàn)區(qū)使用不同的光源,所以需要波動(dòng)光源切換桿來(lái)手動(dòng)的切換光源。建議的光源切換波長(zhǎng)為340nm,即200nm-339nm適應(yīng)氘燈,340nm-1000nm使用鹵素?zé)簟?br/> 注意事項(xiàng):如果光源選擇不正確,或光源切換桿不到位,將直接影響儀器的穩(wěn)定性。特殊測(cè)試要求除外。
六、比色皿配對(duì)性
儀器所附的比色皿是經(jīng)過(guò)配對(duì)測(cè)試的,未經(jīng)配對(duì)處理的比色皿將影響樣品的測(cè)試精度。適應(yīng)比色皿一套兩只,供紫外光譜區(qū)使用,置入樣品架時(shí),兩只石英比色皿上標(biāo)記Q或箭頭方向要一致。玻璃比色皿一套四只,供可見(jiàn)光譜區(qū)使用。
石英比色皿和玻璃比色皿不能混用,更不能和其他不經(jīng)配對(duì)的比色皿混用。用手拿比色皿應(yīng)握比色皿的磨砂表面,不應(yīng)該接觸比色皿的頭光面,即透光面上不能有手印或溶液痕跡,待測(cè)溶液中不能有氣泡、懸浮物,否則也將影響樣品的測(cè)試精度。比色皿在使用完畢后應(yīng)立即清洗干凈。
七、調(diào)T零(0%T)
1.在T模式時(shí),將遮光體置入樣品架(如圖七所示),合上樣品室蓋,并拉動(dòng)樣品架拉桿使其進(jìn)入光路。然后按動(dòng)“調(diào)0%T”鍵,顯示器上顯示“00.0”或“-00.0”,便完成調(diào)T零,完成調(diào)T零后,取出遮光體。
注意事項(xiàng):1.測(cè)試模式應(yīng)在透射比(T)模式;
2.如果未置入遮光體合上樣品室蓋,并使其進(jìn)入光路便無(wú)法完成調(diào)T零;
3.調(diào)T零時(shí)不要打開(kāi)樣品室蓋、推拉樣品架;
4.調(diào)T零后(未取出遮光體),如切換至吸光度測(cè)試模式,顯示器上顯示為“.EL”,均需按動(dòng)“調(diào)0%T”鍵。八、調(diào)100%T/0A
此參比樣品置入樣品架,并推拉樣品架拉桿使其進(jìn)入光路。然后按動(dòng)“調(diào)100%T”鍵,此時(shí)屏幕顯示“BL”延時(shí)數(shù)秒便顯示“100.0”(在T模式時(shí))或“-.000”(在A模式時(shí)),即自動(dòng)完成調(diào)100%T/0A。
注意事項(xiàng):調(diào)100%T/0A時(shí)不要打開(kāi)樣品室蓋、推拉樣品架。
熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。通過(guò)對(duì)這些參數(shù)的測(cè)定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長(zhǎng)掃描范圍一般是190~650nm,發(fā)射波長(zhǎng)掃描范圍是200~800nm??捎糜谝后w、固體樣品(如凝膠條)的光譜掃描。
熒光分光光度計(jì)的原理:
由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)過(guò)濾過(guò)和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來(lái)。
物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài),這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過(guò)程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光。
不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級(jí)的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜,因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來(lái)定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。
在溶液中,當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時(shí),其熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系,即IF=KC,利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析,與紫外-可見(jiàn)分光光度法類似,熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行。