紫外可見分光光度計的日常維護和對主要技術(shù)指標(biāo)的簡易測試方法,經(jīng)常對儀器進行維護和測試,以保證儀器工作在較佳狀態(tài)。
一、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。他們可以引起機械部件的銹蝕,使金屬鏡面的光潔度下降,引起儀器機械部分的誤差或性能下降;造成光學(xué)部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕,產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等,甚至儀器停止工作,從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應(yīng)定期加以校正。應(yīng)具備四季恒濕的儀器室,配置恒溫設(shè)備,特別是地處南方地區(qū)的實驗室。
二、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體也會影響機械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性,也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一。因此必須定期清潔,保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件,防塵等。
三、儀器使用一定周期后,內(nèi)部會積累一定量的塵埃,可以由維修工程師或在工程師指導(dǎo)下定期開啟儀器外罩對內(nèi)部進行除塵工作,同時將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固,對光學(xué)盒的密封窗口進行清潔,必要時對光路進行校準(zhǔn),對機械部分進行清潔和必要的潤滑,最后,恢復(fù)原狀,再進行一些必要的檢測、調(diào)校與記錄。
紫外可見分光光度計注意事項和問題處理
1.開機前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。
2.比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應(yīng)保持比色皿清潔,池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干,切勿用手捏透光面。測定紫外波長時,需選用石英比色皿。
3.測定時,禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上,如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K,要盡可能及時清理干凈。
4.實驗結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈,倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),蓋上防塵罩,做好使用登記,得到管理老師認(rèn)可方可離開。
紫外可見分光光度計問題處理:
1、如果儀器不能初始化,關(guān)機重啟。
2、如果吸收值異常,依次檢查:波長設(shè)置是否正確(重新調(diào)整波長,并重新調(diào)零)、測量時是否調(diào)零(如被誤操作,重新調(diào)零)、比色皿是否用錯(測定紫外波段時,要用石英比色皿)、樣品準(zhǔn)備是否有誤(如有誤,重新準(zhǔn)備樣品)。
紫外可見分光光度計使用中應(yīng)注意:
1、使用的吸收池必須潔凈,并注意配對使用。量瓶、移液吸管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
2、取吸收池時,手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè),裝盛樣品以池體的4/5為度,使用揮發(fā)性溶液時應(yīng)加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應(yīng)無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈,晾干防塵保存。
3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之間為宜。
4、測定時除另有規(guī)定外,應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照,采用1cm石英吸收池,在規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi),測幾個點的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長附近自動掃描測定,以核對供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度最大的波長作為測定波長,除另有規(guī)定外吸收度最大波長應(yīng)在該品種項下規(guī)定的測定波長±2nm以內(nèi)。
5、供試品應(yīng)取2份,如為對照品比較法,對照品一般也應(yīng)取2份。平行操作,每份結(jié)果對平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。
6、選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值會偏低,狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn),對于大部分被測品種,可以使用2nm縫寬。
紫外分光光度法是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜,來研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。
由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同;
因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
一般地,紫外可見分光光度計主要由光源系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室、檢測系統(tǒng)組成。
光源發(fā)出的復(fù)合光通過單色器被分解成單色光,當(dāng)單色光通過樣品室時;
一部分被樣品吸收,其余未被吸收的光到達檢測器,被轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?,?jīng)電子電路的放大和數(shù)據(jù)處理后,通過顯示系統(tǒng)給出測量結(jié)果。
光源:發(fā)出所需波長范圍內(nèi)的連續(xù)光譜,有足夠的光強度,穩(wěn)定。
可見光區(qū):鎢燈,碘鎢燈(320~2500nm)紫外區(qū):氫燈,氘燈(180~375nm);氙燈:紫外、可見光區(qū)均可用作光源。
單色器:將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的裝置。
棱鏡:依據(jù)不同波長光通過棱鏡時折射率不同。
光柵:在鍍鋁的玻璃表面刻有數(shù)量很大的等寬度等間距條痕(600、1200、2400條/mm)。利用光通過光柵時發(fā)生衍射和干涉現(xiàn)象而分光。
吸收池:用于盛待測及參比溶液。可見光區(qū):光學(xué)玻璃池;紫外區(qū):石英池。
檢測器:利用光電效應(yīng),將光能轉(zhuǎn)換成電流訊號。光電池,光電管,光電倍增管。
檢流計(指示器):刻度顯示或數(shù)字顯示、自動掃描記錄。
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