培養(yǎng)箱是培養(yǎng)微生物的主要設(shè)備,可用于細(xì)菌、細(xì)胞的培養(yǎng)繁殖。其原理是應(yīng)用人工的方法在培養(yǎng)箱內(nèi)造成微生物和細(xì)胞、細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的人工環(huán)境,如控制一定的溫度、濕度、氣體等。目前使用的培養(yǎng)箱主要分為三種:直接電熱式培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱和二氧化碳培養(yǎng)箱。
1.電熱式和隔水式培養(yǎng)箱
電熱式和隔水式培養(yǎng)箱的外殼通常用石棉板或鐵皮噴漆制成,隔水式培養(yǎng)箱內(nèi)層為紫銅皮制的貯水夾層,電熱式培養(yǎng)箱的夾層是用石棉或玻璃棉等絕熱材料制成,以增強(qiáng)保溫效果,培養(yǎng)箱頂部設(shè)有溫度計(jì),用溫度控制器自動(dòng)控制,使箱內(nèi)溫度恒定。隔水式培養(yǎng)箱采用電熱管加熱水的方式加溫,電熱式培養(yǎng)箱采用的是用電熱絲直接加熱,利用空氣對(duì)流,使箱內(nèi)溫度均勻。
在培養(yǎng)箱內(nèi)的正面?zhèn)让妫兄甘緹艉蜏囟日{(diào)節(jié)旋扭,當(dāng)電源接通后,紅色指示燈亮,按照所需要溫度轉(zhuǎn)動(dòng)旋扭至所需刻度,待溫度達(dá)到后,紅色指示燈螅滅,表示箱內(nèi)已達(dá)到所需溫度,此后箱內(nèi)溫度可靠溫度控制器自動(dòng)控制。
培養(yǎng)箱使用與維修保養(yǎng):
(1) 箱內(nèi)的培養(yǎng)物不宜放置過(guò)擠,以便于熱空氣對(duì)流,無(wú)論放入或取出物品應(yīng)隨手關(guān)門,以免溫度波動(dòng)。
(2) 電熱式培養(yǎng)箱應(yīng)在箱內(nèi)放一個(gè)盛水的容器,以保持一定的濕度。
(3) 隔水式培養(yǎng)箱應(yīng)注意先加水再通電,同時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查水位,及時(shí)添加水。
(4) 電熱式培養(yǎng)箱在使用時(shí)應(yīng)將風(fēng)頂適當(dāng)旋開(kāi),以利于調(diào)節(jié)箱內(nèi)的溫度。
2.生化培養(yǎng)箱
這種培養(yǎng)箱同時(shí)裝有電熱絲加熱和壓縮機(jī)制冷。因此可適應(yīng)范圍很大,一年四季均可保持在恒定溫度,因而逐漸普及。
該培養(yǎng)箱使用與維修保養(yǎng)類似電熱式培養(yǎng)箱. 由于安裝有壓縮機(jī), 因此也要遵守冰箱保養(yǎng)的注意事項(xiàng),如保持電壓穩(wěn)定, 不要過(guò)度傾斜, 及時(shí)清掃散熱器上的灰塵等。
3.二氧化碳培養(yǎng)箱
二氧化碳培養(yǎng)箱是在普通培養(yǎng)的基礎(chǔ)上加以改進(jìn),主要是能加入CO2,以滿足培養(yǎng)微生物所需的環(huán)境。主要用于組織培養(yǎng)和一些特殊微生物的培養(yǎng)。
CO2培養(yǎng)箱的安裝與調(diào)試CO2培養(yǎng)箱的正面有操作盤,盤上設(shè)有電源開(kāi)關(guān),溫度調(diào)節(jié)器(手動(dòng)式和液晶顯示盤),CO2注入開(kāi)關(guān),CO2調(diào)節(jié)旋扭,濕度調(diào)節(jié)旋扭,溫度顯示盤,CO2顯示盤和濕度顯示盤,二氧化碳樣品孔(用于抽取箱內(nèi)的樣品,以檢測(cè)箱內(nèi)的CO2是否達(dá)到顯示盤上所顯示的含量)和報(bào)警裝置(超溫報(bào)警燈)。
(1) 培養(yǎng)箱應(yīng)放置于位置比較平穩(wěn),并遠(yuǎn)離熱源的地方,以防止溫度波動(dòng)和微生物的污染。
(2) 在接通電源前,應(yīng)按照使用說(shuō)明書(shū),在培養(yǎng)箱內(nèi)加入一定的蒸餾水(所加入的水zui好加入一定量的消毒劑,詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)),以免燒壞機(jī)器。
(3) 當(dāng)水加到一定量后,報(bào)警燈亮,即停止加水,打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),即開(kāi)始加溫,將溫度控制器調(diào)到所需溫度。
(4) 當(dāng)溫度達(dá)到所需溫度時(shí),則自動(dòng)停止加熱,超過(guò)所需溫度時(shí),超溫報(bào)警燈亮,并發(fā)出報(bào)警聲。
(5) 培養(yǎng)箱所用的CO2可以用液態(tài)CO2或氣體,無(wú)論用哪種CO2給供的管子不能太變曲,以保證氣體的暢通。一般選用CO2鋼瓶,接上壓力控制表即可。
(6) CO2含量的調(diào)零 在箱內(nèi)溫度和濕度穩(wěn)定后(一般須三天),旋動(dòng)CO2 調(diào)節(jié)旋扭,使顯示盤的數(shù)字調(diào)到0.00,過(guò)5分鐘后如需要再重復(fù)調(diào)整,直到顯示盤上的讀數(shù)穩(wěn)定為止。打開(kāi)CO2注入開(kāi)關(guān)(注入燈亮),將CO2設(shè)定值調(diào)到所需濃度,使?jié)舛冗_(dá)到設(shè)定值濃度后(注入燈熄滅),并至少維持10分鐘。此后則由CO2控制器自動(dòng)調(diào)節(jié)箱內(nèi)的CO2含量。
(7) CO2培養(yǎng)箱濕度的調(diào)整 先將濕度調(diào)節(jié)旋扭按下,再將濕度調(diào)節(jié)旋扭轉(zhuǎn)動(dòng)至所需培養(yǎng)濕度,此后由濕度調(diào)節(jié)器自動(dòng)調(diào)整濕度。
目前國(guó)內(nèi)各個(gè)生產(chǎn)廠家所生產(chǎn)的培養(yǎng)箱,其工作原理、所應(yīng)用的技術(shù),甚至結(jié)構(gòu)、材料等都有很多相似之處。但是由于試驗(yàn)設(shè)備“多非標(biāo)、多品種、小批量”的生產(chǎn)方式的制約,產(chǎn)品的可靠性始終是困擾國(guó)內(nèi)、國(guó)外制造商的一個(gè)問(wèn)題。關(guān)鍵在于生產(chǎn)廠家需要管理精細(xì),工藝完備、檢測(cè)手段齊全、對(duì)質(zhì)量認(rèn)真負(fù)責(zé)。一個(gè)成熟的、高可靠性的產(chǎn)品往往需要多年改進(jìn)、完善。
今天講下二氧化碳培養(yǎng)箱的使用方法,主要是針對(duì)剛剛應(yīng)用二氧化碳培養(yǎng)箱的新手,需要注意的事項(xiàng)。
首先、 做好使用前的準(zhǔn)備工作
二氧化碳培養(yǎng)箱應(yīng)由專人負(fù)責(zé)使用,操作盤上的任何開(kāi)關(guān)和調(diào)節(jié)旋扭一旦固定后,不要隨意扭動(dòng),以免影響箱內(nèi)溫度,二氧化碳濃度,濕度的波動(dòng),同時(shí)降低機(jī)器的靈敏度。箱子的放置要水平,避免陽(yáng)光直射和灰塵等,要保證儀器周圍的氣流循環(huán),后部及側(cè)面應(yīng)留出5 cm的空隙。加裝穩(wěn)壓電源保證電源電壓波動(dòng)不超過(guò)220 V±10%。所加入的水必須是蒸餾水或無(wú)離子水,防止礦物質(zhì)儲(chǔ)積在水箱內(nèi)產(chǎn)生腐蝕作用,經(jīng)常檢查箱內(nèi)水是否足夠,水位應(yīng)加至“水位指示燈”滅燈時(shí)為止。使用前箱內(nèi)應(yīng)用消毒酒精或碘溶液徹底擦洗,防止其他微生物污染,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。在房間安裝空調(diào),使環(huán)境溫度保持在25~C左右。所使用的二氧化碳必須是純凈的,否則降低二氧化碳傳感器的靈敏度和污染二氧化碳過(guò)濾裝置。
其次、正確充氣延長(zhǎng)二氧化碳傳感器使用壽命
二氧化碳培養(yǎng)箱箱內(nèi)氣壓由二氧化碳氣體傳感器控制。二氧化碳傳感器正常反饋要求進(jìn)氣壓為Medical Equipment Vo1.22,No.4 0.06 MPa。當(dāng)箱內(nèi)氣壓降低時(shí),二氧化碳傳感器在低壓刺激下有節(jié)奏地開(kāi)閉,向箱內(nèi)慢慢充氣,當(dāng)進(jìn)氣壓達(dá)0.1 MPa時(shí),自動(dòng)停止調(diào)節(jié)。如充氣方法不當(dāng),使進(jìn)氣壓力增大,當(dāng)超過(guò)0.1 MPa甚至0.2 MPa壓力,會(huì)損傷二氧化碳傳感器。開(kāi)始這種損傷效應(yīng)不明顯,不易察覺(jué),反復(fù)錯(cuò)誤操作,二氧化碳傳感器損傷累積最終致命損壞,使氣壓調(diào)節(jié)失靈。因此,二氧 化碳傳感器壽命與二氧化碳進(jìn)氣壓大小有關(guān),只要做好進(jìn)氣壓調(diào)節(jié),就能保護(hù)二氧化碳傳感器性能。二氧化碳傳感器價(jià)格昂貴,更換不易,所以一定要做好進(jìn)氣壓調(diào)節(jié),延長(zhǎng)二氧化碳傳感器使用壽命。
第三、做培養(yǎng)時(shí)注意培養(yǎng)箱濕度
箱內(nèi)濕度對(duì)于培養(yǎng)工作來(lái)說(shuō)是一項(xiàng)非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。因?yàn)轱柡蜐穸拳h(huán)境可以避免培養(yǎng)液中二氧化碳逃逸,培養(yǎng)液中pH值穩(wěn)定,有利于細(xì)胞生長(zhǎng), 足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復(fù)速度(如在開(kāi)關(guān)門后)才能保證不會(huì)由于過(guò)度干燥而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。所以二氧化碳培養(yǎng)箱使用過(guò)程中,在箱內(nèi)托盤中放一 定量的滅菌水(3/2至全盤),使箱內(nèi)成為飽和濕度環(huán)境。如使用者忘記補(bǔ)加水,使培養(yǎng)細(xì)胞處于低濕度甚至干熱環(huán)境中,培養(yǎng)液二氧化碳?xì)怏w易揮發(fā),液體pH 值升高,影響細(xì)胞生長(zhǎng),在工作中要力求避免此問(wèn)題發(fā)生。樣本多時(shí),箱內(nèi)分區(qū)存放,培養(yǎng)物用筐或瓷盤存放,這樣存取快速,縮短開(kāi)門時(shí)間,減少箱內(nèi)氣體和濕度 變化,節(jié)省氣體,穩(wěn)定了細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境。
通過(guò)以上3點(diǎn)注意事項(xiàng),相信新手對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱的使用細(xì)節(jié)有了進(jìn)一步了解,更好的延長(zhǎng)二氧化碳傳感器使用壽命。
電熱恒溫培養(yǎng)箱,它選用的是人性化的設(shè)計(jì),自主研制的線路技能進(jìn)行溫度操控,使得設(shè)備操作徹底智能化,處理了以往PID操控技能需求屢次參數(shù)整定,溫度過(guò)沖等弊端,控溫作用極佳。雙屏高亮度寬視窗數(shù)字顯現(xiàn),示值明晰、直觀。具有因停電,死機(jī)狀況構(gòu)成數(shù)據(jù)丟掉而維護(hù)的參數(shù)回憶,來(lái)電康復(fù)功用。
電熱恒溫培養(yǎng)箱如何監(jiān)測(cè)溫度
為了確定溫度變化速率,應(yīng)把試驗(yàn)箱調(diào)節(jié)到規(guī)定溫度或把試驗(yàn)箱調(diào)到規(guī)定溫度,監(jiān)測(cè)溫度由溫度范圍10%的溫度點(diǎn)上升到90%溫度點(diǎn)的時(shí)間,使試驗(yàn)箱穩(wěn)定,將試驗(yàn)箱調(diào)節(jié)至規(guī)定溫度,監(jiān)測(cè)溫度由溫度范圍90%的溫度點(diǎn)下降到10%溫度點(diǎn)的時(shí)間,這就是我們常說(shuō)的溫度升降溫速度。
電熱恒溫培養(yǎng)箱采用自整定PID技術(shù),具有控溫迅速,精度高的特點(diǎn)。設(shè)定溫度與實(shí)際溫度均有數(shù)字顯示,操作方便,并具有溫度上限跟蹤報(bào)警功能。電熱恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)部為不銹鋼板,并有多層可以移動(dòng)并可調(diào)節(jié)高度的不銹鋼擱板。外門打開(kāi)后內(nèi)有鋼化玻璃門,便于觀察培養(yǎng)箱內(nèi)部情況。培養(yǎng)箱內(nèi)裝有微型風(fēng)扇,可以保證培養(yǎng)箱內(nèi)溫度的均勻性。