熒光分光光度計(jì)作為分光光度計(jì)中的一種,目前被廣泛應(yīng)用在生物化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化工等部門(mén)。那么我們對(duì)于小白的我們,到底該如何選購(gòu)熒光分光光度計(jì)呢?下面小編來(lái)告訴它的的選購(gòu)小技巧,以方便大家更好的選購(gòu)!
1、首先要考慮品牌以及代理商信譽(yù)以及售后服務(wù),不僅關(guān)系到儀器的質(zhì)量穩(wěn)定性,還關(guān)系到以后的維修服務(wù)。
2、然后要關(guān)注儀器的狹縫(光譜帶寬),狹縫還決定了儀器的分辨率,良好的分辨率可以分辨間隔很小的波峰。
3、儀器的信噪比是一項(xiàng)非常重要的參數(shù),它一定程度上反映儀器的檢出能力。
4、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度和重復(fù)性也是一項(xiàng)比較重要的指標(biāo)。
5、掃描速度雖然也很重要,但這和需求有關(guān)系,如果對(duì)時(shí)間沒(méi)有太多的要求,可以不必在意。
6、綜合以上進(jìn)行對(duì)比選購(gòu)性?xún)r(jià)比較為高的。
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熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。
熒光分光光度計(jì)的基本原理:
由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)過(guò)濾過(guò)和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來(lái)。物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài),這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過(guò)程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光。
不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級(jí)的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜,因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來(lái)定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。
熒光分光光度計(jì)的特點(diǎn):
靈敏度高,可以用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
熒光分光光度計(jì)的特點(diǎn):
1.熒光激發(fā)光譜
選定某一熒光發(fā)射波長(zhǎng)記錄熒光發(fā)射強(qiáng)度作為激發(fā)光波長(zhǎng)的函數(shù),即得熒光激發(fā)光譜。
2.熒光發(fā)射光譜
選擇某一固定波長(zhǎng)的光激發(fā)樣品,記錄樣品中產(chǎn)生的熒光發(fā)射強(qiáng)度與發(fā)射波長(zhǎng)間的函數(shù)關(guān)系,即得熒光發(fā)射光譜。
3.時(shí)間分辨技術(shù);
可用于對(duì)混合物中光譜重疊但有壽命差異的組分進(jìn)行分辨并分別測(cè)量。
熒光分光光度計(jì)的組成部分:
1.光源:
為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈,后者能發(fā)射出強(qiáng)度較大的連續(xù)光譜,且在300nm~400nm范圍內(nèi)強(qiáng)度幾乎相等,故較常用。
2.發(fā)射單色器:
置于樣品室和檢測(cè)器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器,常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。
3.激發(fā)單色器:
置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或第一單色器,篩選出特定的激發(fā)光譜。
4.樣品室:
通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測(cè)量液體時(shí),光源與檢測(cè)器成直角安排;測(cè)量固體時(shí),光源與檢測(cè)器成銳角安排。
5.檢測(cè)器:
一般用光電管或光電倍增管作檢測(cè)器??蓪⒐庑盘?hào)放大并轉(zhuǎn)為電信號(hào)。