配置
系統(tǒng)組成：本系統(tǒng)由DGU-20A脫氣機(jī)、2個(gè)LC-20AT溶劑輸送泵分為A，B泵、SIL-20A
自動(dòng)進(jìn)樣器（7725 手動(dòng)進(jìn)樣器）、C18 填料色譜柱、CTO-20A 柱溫箱、SPD-20A 紫外-
可見檢測(cè)器、CBM-20A系統(tǒng)控制器、LCSolution（Ver.1.21）工作站等組成。
準(zhǔn)備使用前應(yīng)根據(jù)待檢樣品的檢驗(yàn)方法準(zhǔn)備所需的流動(dòng)相，用合適的0.45μm濾膜過濾（有機(jī)相和水相分別選用各自的專用濾膜），超聲脫氣20min以上待用。根據(jù)待檢樣品的需要選用合適的色譜柱（柱進(jìn)出口方向應(yīng)與流動(dòng)相流向一致）和定量環(huán)。
配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液（也可在平衡系統(tǒng)時(shí)配制），用合適的0.45μm 的樣品過濾器過濾后待用。
檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常。
注意：真空抽濾裝置和超聲波裝置為液相色譜實(shí)驗(yàn)室必須的輔助設(shè)備。
開機(jī)和平衡系統(tǒng)接通電源，依次開啟穩(wěn)壓電源、A 泵、B 泵、柱溫箱、自動(dòng)進(jìn)樣器、檢測(cè)器、系統(tǒng)控制器，待泵和檢測(cè)器自檢結(jié)束后，打開電腦顯示器、主機(jī)，啟動(dòng)工作站軟件。
先把吸濾頭放入流動(dòng)相瓶中，打開排液閥，按purge鍵排液2～3分鐘，purge完畢后
關(guān)閉排液閥啟動(dòng)泵送液（流速開始不宜太高應(yīng)為正常分析流速的50％～80％），如有柱溫條件可同時(shí)開啟柱溫箱，平衡系統(tǒng)30 分鐘左右，此時(shí)可以同時(shí)進(jìn)行自動(dòng)進(jìn)樣器的purge 操作（時(shí)間為15～25 分鐘）自動(dòng)進(jìn)樣器清洗液一般使用與流動(dòng)相比例接近的不含緩沖鹽的試劑也可以用甲醇：水＝70：30 或甲醇：水＝1：1 代替，觀察檢測(cè)器基線平穩(wěn)后即可做樣。
注意：1.如果使用前色譜柱中保存的流動(dòng)相為純甲醇或純乙腈，而新流動(dòng)相中含有緩沖鹽時(shí)，應(yīng)先用純水沖洗色譜柱十分鐘左右再使用流動(dòng)相，以免鹽析出損壞系統(tǒng)。
2.如系統(tǒng)為正相和反相交換使用，應(yīng)先將所有管路用異丙醇清洗后再更換新流動(dòng)
相使用。
清洗系統(tǒng)和關(guān)機(jī)
數(shù)據(jù)采集完畢后， 如使用的是手動(dòng)進(jìn)樣器請(qǐng)參看下圖清洗：
具體方法：
用注射器吸20ml超純水后套上沖洗頭，將清洗頭輕輕頂在進(jìn)樣口上（不宜用力太大，否則容易損壞進(jìn)樣口），使進(jìn)樣閥保持在Inject位置，慢慢將水推入，水將通過注射針導(dǎo)入口、引導(dǎo)管、注射針導(dǎo)入管和注射針密封圈，由樣品溢出管排出。
泵頭手動(dòng)清洗：如系統(tǒng)中有泵頭自動(dòng)清洗裝置，則無需手動(dòng)清洗，否則需手動(dòng)清洗尤其使用完緩沖鹽流動(dòng)相時(shí)，清洗時(shí)使用下面工具，先用注射器吸入20毫升蒸餾水，套上針頭，插入泵頭清洗管任意一端，推入蒸餾水，另一端流入廢液杯，重復(fù)2～3次即可！
色譜柱清洗：
繼續(xù)以分析中使用流動(dòng)相沖洗10分鐘以上，待基線平穩(wěn)后關(guān)閉檢測(cè)器，沖洗色譜柱
如流動(dòng)相不含緩沖鹽，可以用甲醇：水＝70：30（或用純甲醇）直接沖洗30分鐘以上后把流速設(shè)為零，然后關(guān)閉所有儀器設(shè)備，順序?yàn)椋合韧顺龉ぷ髡拒浖?，再依次關(guān)閉系統(tǒng)控制器、檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、泵；如流動(dòng)相含緩沖鹽可先用純水沖洗20～30分鐘后再用甲醇：水＝70：30（或用純甲醇）沖洗30分鐘以上，流速設(shè)零后再關(guān)閉儀器各部分電源，然后關(guān)閉總電源離開實(shí)驗(yàn)室。
對(duì)液相色譜儀色譜工作站硬件的要求主要有以下五點(diǎn)：
1. 對(duì)工作站可靠性的要求。目前很多國產(chǎn)色譜工作站硬件在電路設(shè)計(jì)和元器件選用上存在缺陷，造成硬件的穩(wěn)定性差。有部分硬件在保修期內(nèi)反復(fù)出問題，極大的損壞了品牌形象。
2. 對(duì)量程范圍的要求。在制備色譜儀和離子色譜儀等領(lǐng)域，量程范圍通常會(huì)超過1V，達(dá)到5V或者更高。這就要求硬件具有拓展性，稍作更改既能滿足上述要求。
3. 對(duì)采樣頻率和最小分辨率的要求。毛細(xì)管電泳色譜，超高效液相色譜儀等快速分析設(shè)備的發(fā)展；痕量分析需求的增多。
4. 對(duì)兼容性的要求。當(dāng)前有些工作站硬件接上電腦后，出現(xiàn)系統(tǒng)死機(jī)，工作站死機(jī)，系統(tǒng)重啟，鼠標(biāo)亂跳等現(xiàn)象。這些現(xiàn)象需要從開發(fā)時(shí)，在源頭上規(guī)避。
5. 對(duì)通訊接口的要求。為了跟上計(jì)算機(jī)主機(jī)的變化，目前國內(nèi)各廠家都把USB通訊作為一大亮點(diǎn)。然而USB通訊本身存在信號(hào)易中斷的缺陷，目前還沒有哪個(gè)廠家真正刻服了這個(gè)缺陷，所以建議在USB通訊之外，提供串行口的選擇。當(dāng)然，選用網(wǎng)口，順應(yīng)網(wǎng)絡(luò)化數(shù)據(jù)采集和儀器控制的需求是當(dāng)前可以的選擇，這一趨勢(shì)也會(huì)隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展得以快速進(jìn)步。
液相色譜儀的應(yīng)用，可用于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差以及具有生理活性物質(zhì)的分析。一般來說，沸點(diǎn)在450℃以下，相對(duì)分子質(zhì)量小于450的有機(jī)物可用液相色譜儀分析，但這些物質(zhì)只占有機(jī)物的15%～20%，其余的80%～85%有機(jī)物原則上都可采用高效液相色譜儀分析。
色譜柱的使用和維護(hù)，色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要，稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。
在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護(hù)色譜柱。調(diào)節(jié)流速太快，避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩。
反沖色譜柱，一般說來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí)，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速降低柱效，預(yù)柱和保護(hù)柱，選擇使用適宜的流動(dòng)相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。
有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時(shí)，預(yù)柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi)，需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
液相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)，由輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等組成。
工作原理，利用混合物各組分在固定相和流動(dòng)相中溶解、分配或吸附等化學(xué)作用性能的差異，使各組分在作相對(duì)運(yùn)動(dòng)的兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達(dá)到相互分離。
從液相色譜儀工作流程中看到，色譜柱是實(shí)現(xiàn)分離的核心部件，要求柱效高、柱容量大和性能穩(wěn)定。柱性能與柱結(jié)構(gòu)、填料特性、填充質(zhì)量和使用條件有關(guān)。
色譜填料：經(jīng)過制備處理后，用于填充色譜柱的物質(zhì)顆粒，通常是5-10粒徑的球形顆粒。
色譜柱管：內(nèi)部拋光的不銹鋼管。典型的液相色譜分析柱尺寸是內(nèi)徑4.6mm，長250mm。
色譜柱：也稱固定相，是將色譜填料填充到色譜柱管中所構(gòu)成的，色譜柱的填充，干法填充：在硬臺(tái)面上鋪上軟墊，將空柱管上端打開垂直放在軟墊上，用漏斗每次灌入50-100mg填料，然后垂直臺(tái)面墩10-20次。
濕法填充：又稱淤漿填充法，使用專門的填充裝置。
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