液相色譜柱是實驗室一種常用的色譜配件,也是液相色譜儀的必不可缺的一部分,那么,我們在做樣品分析的時候,如果色譜柱出現(xiàn)柱子柱流失怎么辦呢?下面為大家講講。
首先明白液相色譜柱柱流失是不可避免的。柱流失程度與什么因素有關?
1、柱流失程度與固定相種類和色譜柱規(guī)格有關,一般固定相的量越多,柱流失則相對較高。
2、柱流失與柱溫以及載氣中氧氣的濃度有關。高溫下,固定相的分解會加快,因此,高溫時的流失會比低溫時高。氧氣是許多固定相分解的催化劑,特別是在高溫時段,強調(diào)載氣的純度和液相色譜柱安裝的氣密性,一方面就是出于氧氣會加劇柱流失的考慮。
3、此外,液相色譜柱隨著使用次數(shù)和時間的增加,固定相的穩(wěn)定性最終也會發(fā)生不可逆的變化,導致柱流失的增加。液相色譜柱柱流失嚴重情況多出現(xiàn)在進樣的溶液類型,5MS的柱子是非極性的,當使用極性溶劑時,就會發(fā)生反應而導致大量柱流失,在做測試時一定要留意樣品的性質(zhì)。
色譜柱的安裝:
1)將液相色譜裝置中的流動相完全置換后再連接色譜柱,并完全排出流路內(nèi)的空氣。
裝置內(nèi)的液體和所使用的流動相不能相溶的情況下,使用雙方都能相溶的液體做過渡。比如從水置換到氯仿的情況,就需要使用丙酮做過渡,才能完全置換。
將鹽溶液置換成有機溶劑的時候,需要通過純水、丙酮的順序來進行置換。相反,從有機溶劑轉(zhuǎn)換成鹽溶液的情況下,需要通過丙酮、純水的順序置換。
不僅僅是泵,流動相流動的所有流路都必須進行置換。例如,注入樣品的情況,軟管內(nèi)的液體也需要置換。另外,如果使用壓力計等別的軟管的情況,取下來的管子也必須由流動相洗凈后才能繼續(xù)使用。
2)色譜柱保存方法不對或者長期不使用的情況下,色譜柱的出入口可能會有空氣殘留。這種情況下,必須先把空氣完全排出后才連接到裝置中。
避免快速加熱,加熱溫度不要超過色譜柱的最高負荷溫度。
把柱子入口側的螺栓打開,然后加溫(一般加溫到手心感到溫暖的程度就足夠了),等液體滿出來以后接到裝置上。然后,打開出口處的螺栓,用泵送液,等確認出口處有液體流出后,連接到裝置中。這樣操作,就算后面再連接一根色譜柱也能完全除去空氣。
3)在泵運作的時候連接色譜柱。確保能讓流動相按照色譜柱上箭頭的方向流動的狀態(tài)連接色譜柱。
4)色譜柱加溫使用的時候,先用0.2~0.3mL/min的低流量一邊送液一邊升溫。達到所定溫度后,再漸漸的增加流量至測定流量。
5)色譜柱需要安定時間。連接到裝置中立即進行測試的情況下,第一次很難得到好的分析結果。
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