色譜柱是裝填有固定相用以分離混合組分的柱管。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。色譜作為一種分離技術(shù)與方法,自本世紀(jì)初起已經(jīng)有100多年的歷史了,現(xiàn)在已經(jīng)成為分析化學(xué)學(xué)科中的一個重要的分支。在人類進(jìn)入新時代之際,人們面臨著在信息科學(xué)、生命科學(xué)、材料科學(xué)、環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域的快速發(fā)展的挑戰(zhàn),在這些領(lǐng)域人才的需求成為國家高度發(fā)展的至關(guān)重要的因素。
色譜柱在使用前,可以進(jìn)行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進(jìn)行,只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。我們在對色譜柱使用前進(jìn)行測試以后,我們要根據(jù)不同的情況對色譜柱進(jìn)行保養(yǎng):
①反相色譜柱每天實驗后的保養(yǎng):使用緩沖液或含鹽的流動相,實驗完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應(yīng)該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。
②長期保存色譜柱:如色譜柱要長時間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水中,并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度可以是室溫。
加強(qiáng)色譜柱的維護(hù)與保養(yǎng)對于高壓液相色譜的發(fā)展有著重要的意義,高壓液相色譜系統(tǒng)其中就包括色譜柱,因此,加強(qiáng)色譜柱的維護(hù)與保養(yǎng)有利于高壓液相色譜的發(fā)展,推動我國的醫(yī)療事業(yè)的發(fā)展。
色譜柱在使用中常見的問題就是柱壓升高,如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加,屬于正常現(xiàn)象。但柱壓在使用過程中突然升高(系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外,以下列舉了部分常見原因及解決辦法:
1、色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染;
可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,將其放在10%的稀硝酸內(nèi)超聲清洗10分鐘,后再用純水超聲10分鐘,重新裝入色譜柱。
2、色譜柱頭的填料被樣品污染;
如確定色譜柱頭的填料被污染,將柱頭螺絲卸下,挖出柱內(nèi)前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔細(xì)修復(fù)后,重新安裝上柱頭螺絲。
3、色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機(jī)溶劑,形成結(jié)晶析出;解決方法:如確定定是鹽結(jié)晶,用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解,再換高濃度甲醇。
液相色譜柱是一種用于液體色譜分析儀器。
液相色譜柱的日常維護(hù):
1、每次開機(jī)時,流速和柱壓要逐漸增加,突然迅速增加,會使柱床受到?jīng)_擊,引起紊亂,產(chǎn)生空隙
2、在進(jìn)樣前使色譜系統(tǒng)充分平衡,是否平衡可由基線加以判斷
3、在進(jìn)樣前,檢查色譜系統(tǒng)的各個接頭,通常由此能發(fā)現(xiàn)是否有漏液現(xiàn)象。如有漏液,空氣會從漏縫進(jìn)入系統(tǒng)引起基線漂移,影響峰高和峰面積的重復(fù)性
4、不要把柱接頭上得太緊,否則易損壞接頭螺紋,引起滲漏
5、不要把柱子放在有氣流的地方或直接放到陽光下,氣流和陽光都會使柱子產(chǎn)生溫度梯度造成基線漂移;如果懷疑基線漂移是由溫度梯度引起的,可以設(shè)法使柱子恒溫
6、若儀器用做常規(guī)分析,樣品種類有限,但分析次數(shù)很多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱,這樣有助于延長柱壽命
7、如果懷疑樣品會污染色譜柱,可以用合適的溶劑幾百毫升、慢慢沖洗柱子過夜,第二天早晨再用流動相重新平衡柱子約3min、
8、在因裝卸、更換、貯存等而挪動柱子時,動作要輕,不要使其受到碰撞,以免柱床因震動產(chǎn)生空隙或通道
9、柱要加標(biāo)簽,新舊分開,不要放在溫度變化很大的地方
10、液相色譜柱柱子不用或貯藏時,應(yīng)封閉并貯存在惰性溶劑中