1、在不使用時不要開光源燈。如燈泡發(fā)黑（鎢燈）、亮度明顯減弱或不穩(wěn)定，應及時更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置。不要用手直接接觸窗口或燈泡，避免油污沾附，若不小心接觸過，要用無水乙醇擦拭。
2、單色器是儀器的核心部分，裝在密封的盒內(nèi)，一般不宜拆開。要經(jīng)常更換單色器盒的干燥劑，防止色散元件受潮生霉。儀器停用期間，應在樣品室和塑料儀器罩內(nèi)放置數(shù)袋防潮硅膠，以免燈室受潮，反射鏡面有霉點及沾污。
3、吸收池在使用后應立即洗凈，為防止其光學窗面被擦傷，必須用擦鏡紙或柔軟的棉織物擦去水分。生物樣品、膠體或其它在池窗上形成薄膜的物質(zhì)要用適當?shù)娜軇┫礈臁Ｓ猩镔|(zhì)污染，可用3mol/L 鹽酸和等體積乙醇的混合液洗滌。
4、光電器件應避免強光照射或受潮積塵。
5、儀器的工作電源一般允許220V±10%的電壓波動。為保持光源燈和檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性，在電源電壓波動較大的實驗室可以配備穩(wěn)壓器。
微量分光光度計能夠快速準確的定量檢測核酸、蛋白質(zhì)等溶液。具有使用方便、消耗樣品少(僅2μl)、不用預熱、能迅速清理殘留樣品、不需要比色皿或其它樣品定位裝置、樣品不需要稀釋等特點，常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量，目前已成為眾多實驗室的常規(guī)儀器。
工作原理
超微量分光光度計進行濃度測定的原理是根據(jù)朗伯-比爾（Lamber-Beer）定律，A＝K·C·L 式中，A為吸光度；K為吸（消）光系數(shù)；C為溶液的濃度；L為液層厚度。此公式說明：在入射光一定時，溶液的吸光度與溶液的濃度及液層厚度成正比。此式就是光的吸收定律的數(shù)學表達式，又叫朗伯-比爾定律。
核酸定量
核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率最大的功能?？梢远繙y定溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA以及RNA含量。這是由于核酸、核苷酸及其衍生物都具有共軛雙鍵，具有紫外吸收的特性，最大的吸收波長在260nm，吸收波谷在230nm。
除了核酸濃度，分光光度計同時顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度，如A260/A280的比值，用于評估樣品的純度，因為蛋白的吸收峰是280nm。純凈的樣品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。
蛋白質(zhì)直接定量
這種方法是在280nm波長，直接測試蛋白。蛋白質(zhì)直接定量方法，適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質(zhì)。紫外直接定量法相對于比色法來說，速度快，操作簡單；但是容易受到平行物質(zhì)的干擾，如DNA的干擾；另外敏感度低，要求蛋白的濃度較高。
比色法蛋白質(zhì)定量
蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的化合物，比色法測定的基礎是蛋白質(zhì)構(gòu)成成分：氨基酸（如酪氨酸，絲氨酸）與外加的顯色基團或者染料反應，產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應的氨基酸數(shù)目直接相關，從而反應蛋白質(zhì)濃度。
比色方法一般有BCA，Bradford，Lowry 等幾種方法。
與傳統(tǒng)分光光度計相比，超微量分光光度計要求的樣品體積小，不需要比色皿，比色杯清洗方便，只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可。除此之外，實驗過程也更為簡單，不需預熱，可隨時檢測，檢測結(jié)果顯示吸光度值的同時，程序直接給出濃度值。超微量分光光度計與傳統(tǒng)相比，體積更小，更方便使用。
分光光度計通常是光源、單色器、樣品室、檢測器和顯示儀表或記錄儀組成。
(1)光源：
一般采用鎢(350-2500nm，可見光用)和氖燈(190-400nm，紫外光用)，根據(jù)不同的波長要求選擇使用。
(2)單色器：
從光源發(fā)射的復合光中分出單色光的光學裝置。單色器由入射狹縫、準直元件、色散元件、聚焦元件和出射狹縫等五部分組成。常用的色散元件有棱鏡和光柵。
(3)棱鏡：
根據(jù)不同波長的光通過棱鏡時具有不同的折射率，從而將復合光按波長順序分解為單色光的一種色散元件。山玻璃或石英制成。玻璃棱鏡適于裝備工作波長為350-800rim的光度計，高質(zhì)量的石英可透過185nm的紫外光，且對200-400nm的光有很高的色散率，但對可見光的色散卻很低，因此石英棱鏡適用于紫外光區(qū)。之光柵。利用光的衍射與干涉作用制成的一種色散元件。光譜儀中多采用平面閃耀光柵，它山高度拋光的表面上刻畫許多根平行線槽而成。一般為60(〕條/nun,1200條/mm,多的可達2400條/mm，甚至更多。當復合光照射到光柵上時，光柵的侮條刻線都產(chǎn)生衍射作用，衍射的光又互相干涉從而產(chǎn)生干涉條紋。光柵正是利用丙酮波長的入射光產(chǎn)生的干涉條紋的衍射角不同，波長長的衍射角大，波長短的衍射角小，從而使復合光色散成按波長順序排列的單色光。
(4)樣品室：
樣品室內(nèi)裝有吸收池架。吸收池山玻璃或石英制成，有不同形狀和光程長。玻璃吸收池只能用于可見光區(qū)，而石英池既可用于可見光區(qū)、亦可用于紫外光區(qū)。
(5)檢測器：
檢測器是一種光電轉(zhuǎn)換元件，其作用是將透過吸收池的光信號變成可測量的電信號。目前，在可見.紫外光度計中多用光電管和光電倍增管。
(6)顯示儀表和記錄儀：
早期的光度計多采用檢流計、微安表作顯示裝置，直接讀出吸光度或透光率。近代的光度計多采用數(shù)字電表等顯示和用X-Y記錄儀直接繪出吸收曲線，并配有計算機數(shù)據(jù)處理臺。
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