液相色譜儀的日常維護與注意事項

    一、日常維護：

    1.定期清洗單向閥：將單向閥卸下，一般先用純凈水超聲10分鐘，然后用異丙醇超聲，10分鐘；也可直接用異丙醇超聲10分鐘。

    2.定期清洗吸濾頭：將吸濾頭卸下，一般先用純凈水超聲10分鐘，然后用異丙醇超聲10分鐘；也可直接用異丙醇超聲10分鐘。

    3.定期沖洗檢測池：把色譜柱卸下，在流速1.0ml/min的狀態(tài)下先用純凈水沖洗30分鐘，然后再用30%

    磷酸（色譜級）沖洗30分鐘左右，再用超純水沖洗至流出液為中性，最后用甲醇沖洗，待用。

    二、注意事項：

    1.開始進樣前30分鐘開氘燈即可，節(jié)約燈的能量和使用時間。

    2.流動相的使用和注意事項：

    ①所用流動相必須預先濾過和脫氣，流動相一般貯存于玻璃不銹鋼容器內。貯存容器一定要蓋嚴，防止溶劑揮發(fā)引起組成變化。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉，應盡量新鮮配制使用，不要長期貯存。容器應定期清洗，特別是盛水、緩沖液和混合溶液的瓶子，以除去底部的雜質沉淀和可能生長的微生物。

    ②配制流動相用水需為娃哈哈牌純凈水或經超聲過濾后的純化水，流動相配制好后先用直徑為5cm，孔徑為0.45ｕm的濾膜，通過沙芯過濾器的過濾，然后在超聲儀上超聲。

    ③不得將裝流動相的容器直接放置與超聲儀內，需放與篩網上進行超聲。

    3.六通閥的使用和維護注意事項：

    ①樣品溶液進樣前必須用濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。

    ②轉動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動相受阻，使泵內壓力劇增，甚至超過泵的最大壓力；再轉到進樣位時，過高的壓力將使柱頭損壞。

    ③為防止緩沖鹽和樣品殘留在進樣閥中，每次分析結束后應沖洗進樣閥。通常可用水沖洗，或先用能溶解樣品的溶劑沖洗，再用水沖洗。

    4.色譜柱柱壓升高的主要因素：

    ①LC-10AT/20AT/10ATPlus泵的單向閥堵塞。

    ②色譜柱的入口篩板堵塞。

    ③吸濾頭堵塞。

    ④PEEK管接口處堵塞。

    5.色譜柱柱壓不穩(wěn)的因素：

    ①泵內有空氣。

    ②泵密封墊損壞。

    ③溶劑中的氣泡。

    ④系統檢漏，找出漏點。

    6.樣品峰保留時間漂移的主要因素：

    ①室內溫度變化過大。

    ②流動相成分發(fā)生變化。

    ③色譜柱未平衡好。

    ④泵中有氣泡。

    ⑤該流動相是否適宜此樣品的檢測。

    7.基線漂移的主要因素：

    ①柱溫波動。

    ②流動相不均勻。

    ③流通池被污染或有氣體。

    ④檢測器出口阻塞。

    ⑤流動相配比不當或流速變化。

    ⑥流動相污染、變質。

    ⑦使用循環(huán)溶劑。

    8.檢測器靈敏度不夠的主要因素：

    ①樣品進樣量不足。

    ②波長設置不正確。

    ③檢測器池窗污染。

    ④檢測池中有氣泡。

    ⑤電壓不穩(wěn)。

    ⑥流動相流速不合適。

    9.色譜柱的使用和維護注意事項：

    ①避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料，因此在調節(jié)流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩。

    ②應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?/p>

    ③一般說來色譜柱不能反沖，只有生產者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。

    ④選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。

    ⑤避免將復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內，需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。

    ⑥經常用強溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內的雜質。

    ⑦保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內靜置至次日或更長時間。

    ⑧色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是濾片被堵塞，這時應更換濾片或將其取出進行清洗；另一種可能是大分子進入柱內，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現塌陷，死體積增大。

    ⑨以硅膠為基質的填料，只能在pH2~9范圍內使用。每次分析檢測完成后，可以用洗脫能力強的洗脫液沖洗，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。

    10.樣品必須用直徑為2.5cm，孔徑為0.45ｕm的濾膜針式過濾。如有明確要求需用離心過濾的，經離心過濾后取上清液即可。