1、流動(dòng)相的要求:
高效液相級(jí)色譜醇,二次蒸餾水,緩沖鹽一定要過濾;流動(dòng)相脫氣至關(guān)重要(可采用抽濾,超聲波脫氣等方法)
2、吸濾頭:
特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動(dòng)相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗;清洗不成功則需要更換。
3、單向閥:
如遇到泵壓不穩(wěn)或流動(dòng)相不能抽取,則可能是單向閥出現(xiàn)問題,卸下用異丙醇超聲波清洗,清洗時(shí)須按其安裝的方向放置在小燒杯中,切記不可與安裝方向倒置超洗!
4、泵頭:
泵頭漏液或出現(xiàn)其它故障一般要申請(qǐng)維修(如漏液,或更換柱塞桿及其密封墊等)
5、過濾器:
當(dāng)色譜峰出現(xiàn)異常情況時(shí),有可能是此部件被污染,拆下用異丙醇超洗或更換過濾墊片。
6、排液閥:
此處不能完全密封或漏液時(shí)一般是其中的墊片污染或磨損,可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。
7、手動(dòng)進(jìn)樣器:
平時(shí)應(yīng)注意用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進(jìn)樣分析狀態(tài)清洗;如出現(xiàn)漏液現(xiàn)象,原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染,一般須申請(qǐng)維修或更換配件。
8、流通池:
在色譜峰不正常時(shí)會(huì)可能是此部件補(bǔ)污染??刹鹦逗笕〕銎渲械膲|片用異丙醇超洗(可根據(jù)說明書進(jìn)行操作或申請(qǐng)維修)。
9、工作站:
出現(xiàn)死機(jī)可重起計(jì)算機(jī);不正常運(yùn)行時(shí),首先可更換電腦測(cè)試其硬件故障;或在本機(jī)上重新插拔接口、重新安裝軟件。
在范第姆特方程模型基礎(chǔ)上,根據(jù)液相色譜的特點(diǎn)作了某些修正,得到如下幾種液相色譜速率理論方程式。
1、高效液相色譜速率理論方程式:
其中渦流擴(kuò)散項(xiàng):
分子擴(kuò)散項(xiàng):
傳質(zhì)阻力項(xiàng):
其中包括:稱為流動(dòng)的流動(dòng)相中傳質(zhì)阻力系數(shù),稱為滯留的流動(dòng)相中的傳質(zhì)阻力系數(shù),稱為固定相中的傳質(zhì)阻力系數(shù)。
高效液相色譜速率理論方程詳細(xì)表達(dá)式:
式中,
dp——色譜柱填料平均粒徑;
df——固定相有效液膜厚度;
U——流動(dòng)相平均流速;
Dm——組分分子在流動(dòng)相中的擴(kuò)散系數(shù);
Ds——組分分子在固定相中的擴(kuò)散系數(shù);
wm——由色譜柱和填充的性質(zhì)所決定的系數(shù);
ws——與容量因子k有關(guān)的系數(shù);
wsm——與顆粒微孔中被流動(dòng)相所占據(jù)部分的分?jǐn)?shù)以及容量因子k有關(guān)的系數(shù)。其余符號(hào)含義同前面。
從上式中可以看出,液相色譜和氣象色譜的速率方程式基本一致,主要區(qū)別在于液相色譜中影響柱效的主要因素是傳質(zhì)阻力項(xiàng),而份子擴(kuò)散項(xiàng)對(duì)柱效的影響不像氣相色譜那樣明顯。
2.吉丁斯修正速率理論方程式:
吉丁斯認(rèn)為流動(dòng)相流速對(duì)渦流擴(kuò)散項(xiàng)影響較大,對(duì)范第姆特方程修正如下:
式中為渦流擴(kuò)散項(xiàng),相當(dāng)于上式的含義。
高效液相色譜儀色譜柱性能的評(píng)價(jià)包括評(píng)價(jià)內(nèi)容和評(píng)價(jià)方法等方面。
一、評(píng)價(jià)內(nèi)容:
1、分離效能。
2、對(duì)指定溶質(zhì)的選擇性。
3、在不同PH值介質(zhì)中的穩(wěn)定性。
4、不同批次但同型號(hào)填料間性能的重現(xiàn)性。
5、適宜的操作壓力等。
二、評(píng)價(jià)方法:
以指定的一組標(biāo)準(zhǔn)溶質(zhì)為樣品,測(cè)定其在色譜柱上的理論塔板數(shù),作為柱效的衡量指標(biāo)。
例:對(duì)于反相色譜填料,可以選擇一組具有不同極性的芳香族化合物,如苯、萘、菲、苯、甲苯和二甲苯等作為基本組分,再加以苯酚和苯胺等酸、堿性溶質(zhì)。