分光光度計作為一種精密儀器,在運(yùn)行工作過程中由于工作環(huán)境,操作方法等種種原因,其技術(shù)狀況必然會發(fā)生某些變化,可能影響設(shè)備的性能,甚至誘發(fā)設(shè)備故障及事故。因此,分析工作者必須了解分光光度計的基本原理和使用說明,并能及時發(fā)現(xiàn)和排除這些隱患,對已產(chǎn)生的故障及時維修才能保證儀器設(shè)備的正常運(yùn)行。
1)若大幅度改變測試波長,需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點。然后再測量。
2)指針式儀器在未接通電源時,電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。
3)比色皿使用完畢后,請立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。
4)操作人員不應(yīng)輕易動燈泡及反光鏡燈,以免影響光效率。
5)1900型等分光光度計,由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測微弱光電信號,而不能用來檢測強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號漂移,靈敏度下降。針對其上述特點,在維修、使用此類儀器時應(yīng)注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下,因此在預(yù)熱時,應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長時間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。
6)放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。
7)比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,否則將使測試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下;分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個池的透射比值調(diào)至100%,測量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在±0.5%的范圍內(nèi)則可以配套使用,若超出此范圍應(yīng)考慮其對測試結(jié)果的影響。
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。
熒光分光光度計的基本原理:
由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)過濾過和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài),這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光。
不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜,因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。
熒光分光光度計的特點:
靈敏度高,可以用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
原子吸收分光光度計的主要作用是檢測金屬材料中的微量和痕量金屬元素,并且被大量使用在一些 科研機(jī)構(gòu)和質(zhì)量要求比較嚴(yán)格的檢驗部門,因為其屬于高精密儀器,內(nèi)部組織結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜。
從結(jié)構(gòu)組成上來講,原子吸收分光光度計主要由光源部分、原子化器部分、光學(xué)系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)等h個基本部分組成,每個部分都有不同的分工,并且相互依存。但是在實際使用過程中,還是不可避免。
原子吸收分光光度計的故障排除
1、樣品不進(jìn)入儀器或進(jìn)樣速度緩慢故障現(xiàn)象
原因分析1:進(jìn)樣毛細(xì)管和霧化器堵塞。
排除方法:觀察毛細(xì)管內(nèi)氣泡提升狀態(tài)可大致斷定進(jìn)樣毛細(xì)管或霧化器是否被堵塞,如被堵塞,可更換毛細(xì)管或用10%硝酸進(jìn)行清洗。
原因分析2:空氣壓力低。
排除方法:檢查空氣管路的氣密性,如有漏氣密閉好即可。
原因分析3:樣品溶液粘度較大。
排除方法:適當(dāng)?shù)膶悠啡芤哼M(jìn)行稀釋處理,如果故障未能解除,應(yīng)重新對樣品進(jìn)行處理。
原因分析4:溫度過低,噴霧器無法正常工作。
排除方法:儀器的環(huán)境溫度應(yīng)在10~30℃之間,若溫度過低,低溫高速氣體將使樣品無法霧化,甚至結(jié)成冰粒,遇到此故障可提高氣溫予以解決。
2、火焰異常故障現(xiàn)象
原因分析:燃?xì)獠环€(wěn)或純度不夠。
排除方法:首先要排除氣路故障,應(yīng)檢查燃?xì)夂椭计魍ǖ朗欠衤饣驓饴范氯?/p>
鋼瓶中的乙炔是溶解于吸收在活性炭上的丙酮中的,由于丙酮的揮發(fā)導(dǎo)致燃燒火焰變紅,遇到此故障更換乙炔瓶即可。
另外,周圍環(huán)境的干擾,也會使火焰異常。當(dāng)空氣流動嚴(yán)重或者有灰塵干擾時,應(yīng)及時關(guān)閉門窗,以免對測定結(jié)果造成影響。
3、儀器沒有吸收或吸光度值不穩(wěn)定故障現(xiàn)象
原因分析1:空心陰極燈使用時不亮或燈閃。
排除方法:空心陰極燈使用一段時間或長時間不用,會因為氣體吸附、釋放等原因而導(dǎo)致燈內(nèi)氣體不純或損壞,導(dǎo)致發(fā)射能力的減弱。因此,不經(jīng)常使用的燈,每隔三、四個月取出點燃2~3h。
每次使用時應(yīng)充分預(yù)熱燈30min以上,如果因電壓不穩(wěn)導(dǎo)致燈閃,應(yīng)立即關(guān)閉電源以免造成空心陰極燈損壞。連接穩(wěn)壓電源,待電壓穩(wěn)定后再開機(jī)使用。如未能解決,應(yīng)更換空心陰極燈。
原因分析2:工作電流過大。
排除方法:對于空心陰極較小的元素?zé)?,工作電流過大,使燈絲發(fā)熱溫度較高,導(dǎo)致原子發(fā)射線的熱變寬和壓力變寬,同時空心陰極燈的自吸增大,使輻射的光強(qiáng)度降低,導(dǎo)致無吸收;
因此,空心陰極燈發(fā)光強(qiáng)度在滿足需要的條件下,應(yīng)盡可能的采用較小的工作電流。
原因分析3:霧化系統(tǒng)內(nèi)管路不暢通。
排除方法:這有可能是吸入濃度較高或分子量較大的測試液造成的,清洗霧化器即可。
原因分析4:樣品前處理不徹底。
排除方法:觀察樣品中有無沉淀或懸浮物,如有沉淀,應(yīng)重新對樣品進(jìn)行處理。
4、燃燒器火焰成V字型燃燒故障現(xiàn)象
原因分析:燃燒器縫口有污漬或水滴導(dǎo)致火焰不連續(xù)燃燒。
排除方法:儀器關(guān)閉后,可用柔軟的刀片輕輕刮去燃燒器縫口的污漬或擦干燃燒器內(nèi)腔及縫口的水滴。