紫外可見(jiàn)光譜儀涉及的波長(zhǎng)范圍在有機(jī)化學(xué)研究中得到廣泛的應(yīng)用。通常用作物質(zhì)鑒定、純度檢查,有機(jī)分子結(jié)構(gòu)的研究。
在定量方面,可測(cè)定結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的化合物和混合物中各組分的含量,也可以測(cè)定物質(zhì)的離解常數(shù),絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù),物質(zhì)分子量鑒別和微量滴定中指示終點(diǎn)以及在高效液相色譜中作檢測(cè)器等。
基本工作原理:
紫外分光光度計(jì)基本工作原理和紅外光譜儀相似,利用一定頻率的紫外可見(jiàn)光照射被分析的有機(jī)物質(zhì),引起分子中價(jià)電子的躍遷,它將有選擇地被吸收。
一組吸收隨波長(zhǎng)而變化的光譜,反映了試樣的特征。在紫外可見(jiàn)光的范圍內(nèi),對(duì)于一個(gè)特定的波長(zhǎng),吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,因此測(cè)量光譜可以進(jìn)行定性分析,而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較,還能進(jìn)行定量分析。
分光光度計(jì)的使用方法:
(1)接通電源;(2)使用前預(yù)熱15min;(3)選擇波長(zhǎng);(4)選擇檢測(cè)器;(5)如果可能的話,選擇正確的縫寬;
(6)插入適當(dāng)?shù)目瞻讓?duì)照;(7)調(diào)解到0%的透過(guò)率;(8)將吸光值調(diào)到零;(9)分析樣品;(10)每測(cè)量10個(gè)樣品后,用空白對(duì)照校驗(yàn)零刻度;(11)檢測(cè)儀器的可重復(fù)性。
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)屬于精密光學(xué)儀器,出廠前經(jīng)過(guò)精細(xì)的裝配和調(diào)試,如果能對(duì)儀器進(jìn)行恰當(dāng)?shù)木S修與保養(yǎng),不僅能保證儀器的可靠性和穩(wěn)定性,也可以延長(zhǎng)儀器的使用壽命。
1、工作環(huán)境檢查:
1)放置要求:儀器應(yīng)平穩(wěn)的擺放在水平固定的桌面上。(因?yàn)榉止夤舛扔?jì)為精密光學(xué)儀器,在運(yùn)行的過(guò)程中如果桌面不穩(wěn),會(huì)影響其工作狀態(tài),且儀器處在工作狀態(tài)時(shí),燈絲處于高溫狀態(tài),此時(shí)如果有劇烈的震動(dòng)會(huì)導(dǎo)致燈絲折斷。)
2)溫度要求:工作環(huán)境的溫度在5-35度之間。(儀器在工作狀態(tài)時(shí)內(nèi)部較熱需要用儀器自身的散熱風(fēng)扇與外界空氣進(jìn)行熱交換散熱,如果外界溫度過(guò)高,會(huì)導(dǎo)致儀器內(nèi)部溫度過(guò)高,從而加速儀器電器件與燈的老化速度,從而影響儀器的使用壽命。)
3)濕度要求:工作環(huán)境的相對(duì)濕度不超過(guò)85%。(儀器內(nèi)部有很多電器元件與光學(xué)件,在濕度太高的情況下,電器件容易老化或燒壞,光學(xué)件表面的鍍鋁膜也容易發(fā)霉。)
4)空氣狀況:空氣中不應(yīng)有足以引起腐蝕的有害氣體和過(guò)多的塵土存在。
2、樣品室檢查:
1)在開(kāi)機(jī)之前,先要檢查樣品室中是否有比色皿或其他物品,因?yàn)閮x器在開(kāi)機(jī)后要進(jìn)行一系列的功能自檢,如果有物品放在樣品室中會(huì)導(dǎo)致自檢出錯(cuò)。
2)每次使用后應(yīng)檢查樣品室是否積存有溢出溶液,須經(jīng)常擦拭樣品室,以防止廢液對(duì)部件或光路系統(tǒng)的腐蝕。
3)在測(cè)試完成后,請(qǐng)及時(shí)將樣品從樣品室中取出,否則,液體揮發(fā)會(huì)導(dǎo)致鏡片發(fā)霉。對(duì)易揮發(fā)和腐蝕性的液體,尤其要注意!如果樣品室中有漏液,請(qǐng)及時(shí)擦拭干凈,否則會(huì)引起樣品室內(nèi)的部件腐蝕和螺釘生銹。
3、儀器的表面清潔:
儀器外殼表面經(jīng)過(guò)噴漆工藝處理過(guò),如果不小心將溶液漏灑在外殼上,請(qǐng)立即用濕毛巾擦拭干凈,杜絕使用有機(jī)溶液擦拭。如果長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí),請(qǐng)注意及時(shí)清理儀器表面的灰塵。
4、比色皿清洗:
在每次測(cè)量結(jié)束或溶液更換時(shí),您需要對(duì)比色皿進(jìn)行及時(shí)清洗,然后放在低濃度酸性溶液里浸泡,浸泡后用蒸餾水沖洗比色皿的內(nèi)外壁,否則比色皿壁上的殘留溶液會(huì)引起測(cè)量誤差。
5、電源檢查:
1)插電源插座時(shí),請(qǐng)檢查當(dāng)前電壓是否與儀器標(biāo)識(shí)的電壓一致。
2)因?yàn)楦鱾€(gè)地區(qū)電網(wǎng)的質(zhì)量差異很大,所以為了使儀器運(yùn)行得更穩(wěn)定和更可靠,建議給儀器外配一個(gè)穩(wěn)壓器。
3)儀器不用時(shí)請(qǐng)關(guān)機(jī),并拔掉電源插頭,以防止實(shí)驗(yàn)室的電源地線不好,而導(dǎo)致在雷雨天氣時(shí)損壞儀器。
在光譜學(xué)應(yīng)用中,獲得單波長(zhǎng)輻射是不可缺少的手段。除了用單色光源、顏色玻璃和干涉濾光片外,大都使用掃描選擇波長(zhǎng)的單色儀。尤其是當(dāng)前更多地應(yīng)用掃描光柵單色儀,在連續(xù)的寬波長(zhǎng)范圍選出窄光譜輻射。
當(dāng)一束復(fù)合光線進(jìn)入光譜儀的入射狹縫,首先由光學(xué)準(zhǔn)直鏡準(zhǔn)直成平行光,再通過(guò)衍射光柵色散為分開(kāi)的波長(zhǎng)。
利用不同波長(zhǎng)離開(kāi)光柵的角度不同,由聚焦反射鏡再成像于出射狹縫。通過(guò)電腦控制可精確地改變出射波長(zhǎng)。
1.光源不同:
可見(jiàn)分光光度計(jì)的光源一般只用鎢燈,而紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是用鎢燈和氘燈倆個(gè)電源,同時(shí)還多了這倆個(gè)光源燈的切換部件。這是因?yàn)殒u燈的光譜范圍主要在可見(jiàn)到近紅外這段,氘燈主要在紫外端,也正是因?yàn)楣庠吹牟灰粯?,紫外可?jiàn)分光光度計(jì)也多了一個(gè)專(zhuān)門(mén)提供氘燈工作的氘燈電源了。
2.光學(xué)器件的不同:
由于玻璃能吸收紫外波,而對(duì)可見(jiàn)到近紅外端有比較好的透過(guò)性,所以可見(jiàn)分光光度計(jì)的一些光學(xué)部件可以使用玻璃,而紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)就不能使用玻璃部件,一般使用適應(yīng)光學(xué)部件。同時(shí)由于這個(gè)原因,在比色皿的選擇上也就有不同了,可見(jiàn)分光光度計(jì)可以使用玻璃制的比色皿,而紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)一般使用石英制的比色皿了。