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熒光分光光度計的基本原理 光度計工作原理

時間:2020-05-14    來源:儀多多儀器網    作者:儀多多商城     

    熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數,從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。

    熒光分光光度計的基本原理:

    由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍紫光經濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質發(fā)出熒光,熒光經過濾過和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數字的形式顯示出來。物質熒光的產生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài),這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產生熒光。

    不同物質由于分子結構的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜,因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進行物質的鑒定。

    熒光分光光度計的特點:

    靈敏度高,可以用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化,從而闡明分子結構與功能之間的關系。

紅外分光光度計在有機分析方面的應用

  紅外光譜儀一般都有記錄儀自動記錄譜圖。新型的儀器還配有微處理機,以控制儀器的操作、譜圖中各種參數、譜圖的檢索等?! 〖t外分光光度計在有機分析方面的應用  1、化合物中各原子團組合排列情況,是同紅外光譜中出現(xiàn)的特征官能團來確定的。  1)溴化四氯化對位甲酚的結構,過去實驗認為它有三種可能的結構,但未能鑒別確定,現(xiàn)經過紅外光譜證實只有一種結構?! ?)二分子醛縮合醇酮,應為(I)式。若(I)式R換成吡啶基,則化學性質和(I)卻不相同了,它具有烯二醇式的反應如(II)式??墒窃跇O烯的溶液中,也看不到自由羥基的3700cm(-1)-譜帶,卻在2750cm(-1)有締全氫鍵出現(xiàn)??芍研纬闪朔肿觾葰滏I。(I)羥酮式(II)烯二醇式  2、異構體的測定——可鑒定立體異構體和同分異構體  1)順反異體的測定——順反異構體原子團排列順序因無對稱中心,故C=C雙鍵在1630cm(-1),724cm(-1),而反式的C=C在較高頻率。  2)同分異構體的鑒定——紅外光譜900~660cm(-1)區(qū)內可看到苯環(huán)取代位置不同的同分體。  如二甲苯三個異構體的吸收譜帶很不相同。鄰位在742cm(-1),間位在770cm(-1),對位在800cm(-1),且因對二甲苯對稱性強,它的C=C雙鍵(苯骨架)在1500cm(-1)變小,并且600cm(-1)譜帶消失。  又如正丙基、異丙基、叔丁基由紅外光譜中的甲基彎曲振動可以看出。在1375cm(-1)只出現(xiàn)一個吸收帶,則表示為正丙基;若在1375cm(-1)出現(xiàn)相等強度的雙峰,則為異丙基;若在`1390cm(-1)及1365cm(-1)出現(xiàn)一強一弱譜帶,則為叔丁基。  乙醇和甲醚的分子式完全相同C2H6O,乙醇有羥基吸收帶在3500cm(-1),C-0伸縮振動在1050~1250cm(-1),羥基彎曲振動在950cm(-1)。甲醚在3500cm(-1)無羥基吸收。它的第一強1150~1250cm(-1),這兩個同分異構體很容易區(qū)別?! ?、化學反應的檢查——一個化學反應是否已進行完全,可用紅外光譜檢查,這是因原料和預期的產品都有其特征吸收帶。例如氧化仲醇為酮時,原料仲醇的羥基吸收應消失,酮的羰基171cm(-1)應在產物中出現(xiàn)才反應進行完全。  4、未知物剖析——可先將未知物分離提純,作元素分析,寫出分子式,計算不飽和度。從紅外光譜可得到此未知物主要官能團的信息,確定它是屬于哪種化合物。結合紫外、核磁等可鑒定此化合物的結構。

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紅外分光光度計 紅外分光光度計在有機分析方面的應用_紅外分光光度計

原子熒光光度計與X射線熒光光譜儀的區(qū)別

  有一些人把原子熒光光度計與X射線熒光光譜儀誤認為是同一種儀器,其實它們是有區(qū)別的。首先我們分別了解下它們的定義?! ?、原子熒光光度計是利用硼氫化鉀或硼氫化鈉作為還原劑,將樣品溶液中的待分析元素還原為揮發(fā)性共價氣態(tài)氫化物(或原子蒸汽),然后借助載氣將其導入原子化器,在氬—氫火焰中原子化而形成基態(tài)原子?;鶓B(tài)原子吸收光源的能量而變成激發(fā)態(tài),激發(fā)態(tài)原子在去活化過程中將吸收的能量以熒光的形式釋放出來,此熒光信號的強弱與樣品中待測元素的含量成線性關系,因此通過測量熒光強度就可以確定樣品中被測元素的含量?! ?、X射線熒光光譜儀用X射線照射試樣時,試樣可以被激發(fā)出各種波長的熒光X射線,需要把混合的X射線按波長(或能量)分開,分別測量不同波長(或能量)的X射線的強度,以進行定性和定量分析,為此使用的儀器叫X射線熒光光譜儀。由于X光具有一定波長,同時又有一定能量,因此,X射線熒光光譜儀有兩種基本類型:波長色散型和能量色散型?! ”M管二者都是把物質激發(fā)后檢測其熒光,但二者的區(qū)別很大,從大的方面看主要有兩點:  1、激發(fā)光源不同?! ≡訜晒庥玫墓庠春芏?,如各種激光等,但很少見有用X-射線的;而X-射線熒光則是用X-射線作激發(fā)光源?! ?、用途不同。  原熒主要用來作定量分析,尤其是金屬元素的定量分析;而X熒主要用來作定性分析和結構分析。當然二者的儀器構造、使用方法、檢測范圍、樣品制備等等都不一樣。

標簽: 原子熒光光度計
原子熒光光度計 原子熒光光度計與X射線熒光光譜儀的區(qū)別_原子熒光光度計

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