由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中，激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光，熒光經(jīng)過濾過和反射后，被光電倍增管所接受，然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。
基本結(jié)構(gòu)和原理，光源與檢測(cè)器成直角方式安排。
1.光源：
為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈，后者能發(fā)射出強(qiáng)度較大的連續(xù)光譜，且在300nm～400nm范圍內(nèi)強(qiáng)度幾乎相等，故較常用。
2．激發(fā)單色器：
置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或第一單色器，篩選出特定的激發(fā)光譜。
3．發(fā)射單色器：
置于樣品室和檢測(cè)器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器，常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。
4．檢測(cè)器：
一般用光電管或光電倍增管作檢測(cè)器?？蓪⒐庑盘?hào)放大并轉(zhuǎn)為電信號(hào)。
5．樣品室：
通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。丈量液體時(shí)，光源與檢測(cè)器成直角安排；丈量固體時(shí)，光源與檢測(cè)器成銳角安排。
1、紫外可見分光光度計(jì)光度測(cè)量 在模式選擇屏幕中選擇<1、Photometric光度>選項(xiàng)，將顯示參數(shù)配置屏幕; 用GOTOWL鍵設(shè)定測(cè)量波長(zhǎng); 按F2鍵設(shè)定進(jìn)樣控制; 按START/STOP鍵時(shí)，測(cè)量開始，顯示測(cè)量屏幕; 如需做空白校正，應(yīng)在測(cè)量前先設(shè)置空白樣品，然后，按AUTO-ZERO鍵，將測(cè)量值置為OABS(100%); 2、紫外可見分光光度計(jì)校正 開機(jī)預(yù)熱10分鐘足矣; 放入黑塊和標(biāo)樣(沒有的自己配)，關(guān)閉蓋子; 校0; 把燈光對(duì)著黑塊，把透光度調(diào)0; 把燈光對(duì)標(biāo)樣，將吸光度調(diào)到100%; 3、參比溶液介紹 參比溶液又稱空白溶液。測(cè)量時(shí)用作比較的、不含被測(cè)物質(zhì)但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常，用參比溶液掃描的曲線應(yīng)是一條平坦的直線。有時(shí)，基體中，雖不含被測(cè)物質(zhì)，但含有別的物質(zhì)，這時(shí)必須保證其不影響測(cè)試。經(jīng)常碰到的是試劑空白中含有被測(cè)物質(zhì)，此時(shí)必須經(jīng)過純化將其除去。否則將影響測(cè)定結(jié)果。 4、紫外可見分光光度計(jì)使用注意事項(xiàng) 1、開機(jī)前應(yīng)先預(yù)熱15分鐘，然后開機(jī)自檢; 2、濕度要控制在75%左右，溫度在5～30度之間; 3、儀器要穩(wěn)壓電源，接地要好。并且避免陽(yáng)光直接照射; 5、常見故障及處理方法 光門不能完全關(guān)閉：修復(fù)光門部件，使其完全關(guān)閉; 透過率“100%”旋到底了。解決方法：重新調(diào)整“100%”旋鈕; 儀器嚴(yán)重受潮：可打開光電管暗盒，用電吹風(fēng)吹上一會(huì)兒使其干燥，并更換干燥劑;以上為紫外可見分光光度計(jì)的具體操作方法及使用注意事項(xiàng)，希望能給予您幫助。
由于分光光度計(jì)是一種常用的實(shí)驗(yàn)室分析儀器，款式和價(jià)格都是多樣化的，因此如何選擇一款合適的分光光度計(jì)就顯得尤為重要了。下面簡(jiǎn)單說一下如何選擇分光光度計(jì)。
一、選擇可滿足使用者長(zhǎng)期分析要求的儀器即可：
盡管分光光度計(jì)種類繁多，但不外乎：簡(jiǎn)易型、中檔型和高檔型三大類；
（1）簡(jiǎn)易型儀器及其特點(diǎn)：
結(jié)構(gòu)：這種類型的儀器多為單光束型，即只有一束光照射到樣品室內(nèi)；光源一般僅有鎢燈；樣品支架一般為推拉式四聯(lián)池架；波長(zhǎng)選擇多為手動(dòng)查找，重復(fù)性差；狹縫為一個(gè)固定寬度模式；光學(xué)性能指標(biāo)較低；檢測(cè)器多為光敏二極管；顯示器多為機(jī)械表頭或數(shù)碼管顯示器，數(shù)據(jù)處理器一般沒有。此類儀器生產(chǎn)以國(guó)內(nèi)廠家居多。
測(cè)量模式：多為定點(diǎn)（固定波長(zhǎng)）吸光度或透過率測(cè)量方式，基本不能進(jìn)行波長(zhǎng)掃描測(cè)量。
適應(yīng)范圍：小型實(shí)驗(yàn)室及示范教學(xué)，分析樣品相對(duì)簡(jiǎn)單，測(cè)試結(jié)果精度要求不高。
?。?）中檔型儀器及其特點(diǎn)：
結(jié)構(gòu)：此類儀器多為雙光束型或準(zhǔn)雙光束型，但也有單光束儀器型；光源有鎢燈和氘燈；樣品池支架為兩個(gè)固定式，分別是樣品通道和參比通道；波長(zhǎng)按照設(shè)定模式自動(dòng)查找或掃描；狹縫多數(shù)仍為2nm固定寬度模式,也有1.5nm狹縫寬度的；檢測(cè)器多數(shù)是硅光二極管，但也有少數(shù)用光電倍增管的；光學(xué)性能相對(duì)較高，其中光柵的技術(shù)指標(biāo)尤為重要，較佳的光柵為凹面型，為此無論在分辨率還是在雜散光方面指標(biāo)要優(yōu)于簡(jiǎn)易型儀器；顯示器為液晶式或連接電腦，數(shù)據(jù)處理可由儀器自身具有的或外接計(jì)算機(jī)處理。并有一定的測(cè)量附件。
測(cè)量模式：透過率、吸光度、濃度直讀、單光束；單點(diǎn)及掃描均可。
適應(yīng)范圍：此類儀器基本可滿足大多實(shí)驗(yàn)室分析需要。
?。?）高檔型儀器及特點(diǎn)：
除了中檔儀器的特點(diǎn)外，主要是光學(xué)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和制造工藝水平更高了，比如使用了大尺寸的凹面光柵，并且光柵刻槽數(shù)大于1800條/mm；波長(zhǎng)檢測(cè)范圍有的儀器在近紅外區(qū)已經(jīng)超過1100nm，可達(dá)到2600nm；狹縫均為連續(xù)可調(diào)型，以適應(yīng)高分辨率的需要，波長(zhǎng)掃描速度的檔位也增加了，檢測(cè)器均使用高靈敏度的光電倍增管和紅外檢測(cè)器；數(shù)據(jù)處理目前基本是電腦來執(zhí)行；衡量一臺(tái)儀器的另外一個(gè)指標(biāo)是看此儀器是否具有豐富的附屬測(cè)量器件，如偏振附件、積分球附件、反射附件、自動(dòng)進(jìn)樣器附件、色度分析軟件、薄膜附件等等。
測(cè)量模式：透過率、吸光度、濃度直讀、反射方式、能量方式，單點(diǎn)、掃描均可；
適應(yīng)范圍：科研、光學(xué)產(chǎn)品的檢測(cè)、生化樣品檢測(cè)、復(fù)雜樣品檢測(cè)等。不但可以測(cè)液態(tài)樣品，也可測(cè)固態(tài)樣品。
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