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超高分辨顯微鏡的性能及工作原理 顯微鏡工作原理

時間:2020-05-15    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

    顯微鏡技術(shù)經(jīng)過長期發(fā)展,加之近年來物理學(xué)界接二連三出現(xiàn)的重大科研進(jìn)展,終于,在2008年,顯微鏡發(fā)展史上的新成果——超高分辨率熒光顯微鏡為科學(xué)家所研制出。人們預(yù)言,它定會成為生物學(xué)家的好幫手。

 

    超分辨光學(xué)顯微鏡采用了新一代超高分辨技術(shù),即固態(tài)半球超級透鏡成像技術(shù),突破傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的光學(xué)衍射分辨率極限,使顯微鏡的橫向分辨率達(dá)到50nm。通過該成像技術(shù),用戶能夠得到超高分辨率彩圖像并保留光學(xué)顯微鏡所有優(yōu)勢-快速、簡單、無損、完整、真實顏色。

    在100X浸水物鏡上加裝固態(tài)半球超級透鏡裝置,在水平分辨率上可以從原來的200nm提高到50nm,等同于400X物鏡的實際效果。

    它采用結(jié)構(gòu)照明顯微成像技術(shù),最高分辨率可達(dá)100nm,既有3D-SIM、2D-SIM成像模式,也提供超快速的寬場成像及TIRF成像,顯著提高成像的時間分辨率和空間分辨率,使活細(xì)胞超高分辨率成像成為現(xiàn)實。我校廣大師生可通該儀器更好地了解生命過程和疾病發(fā)生機(jī)理,觀察細(xì)胞器、功能蛋白等細(xì)微結(jié)構(gòu)的精確定位和分布,從而提升我校相關(guān)學(xué)科專業(yè)的研究水平。

倒置顯微鏡操作及日常維護(hù)

  倒置顯微鏡和放大鏡起著同樣的作用,就是把近處的微小物體成一放大的像,以供人眼觀察。只是顯微鏡比放大鏡可以具有更高的放大率而已。

  物體位于物鏡前方,離開物鏡的距離大于物鏡的焦距,但小于兩倍物鏡焦距。所以,它經(jīng)物鏡以后,必然形成一個倒立的放大的實像A'B'。A'B'靠近F2的位置上。再經(jīng)目鏡放大為虛像A''B''后供眼睛觀察。目鏡的作用與放大鏡一樣。所不同的只是眼睛通過目鏡所看到的不是物體本身,而是物體被物鏡所成的已經(jīng)放大了一次的像。

  倒置顯微鏡中常用的觀察方法就是相差。由于這種方法不要求染色,是觀察活細(xì)胞和微生物的理想方法。在此提供各種聚光器來滿足需要,這種方法提供帶有自然背景色的、高對比度的、高清晰度的圖像。

    操作使用:

  1.開機(jī)。接連電源。打開鏡體下端的電控開關(guān)。

  2.使用

 ?。?)準(zhǔn)備:將待觀察對象置于載物臺上。旋轉(zhuǎn)三孔轉(zhuǎn)換器,選擇較小的物鏡。觀察,并調(diào)節(jié)鉸鏈?zhǔn)诫p目目鏡,舒適為宜。

 ?。?)調(diào)節(jié)光源:推拉調(diào)節(jié)鏡體下端的亮度調(diào)節(jié)器至適宜。通過調(diào)節(jié)聚光鏡下面的光柵來調(diào)節(jié)光源的大小。

  (3)調(diào)節(jié)像距:轉(zhuǎn)三孔轉(zhuǎn)換器,選擇合適倍數(shù)的物鏡;更換并選擇合適的目鏡;同時調(diào)節(jié)升降,以消除或減小圖像周圍的光暈,提高了圖像的襯度。

 ?。?)觀察:通過目鏡進(jìn)行觀察結(jié)果;調(diào)整載物臺,選擇觀察視野。

  3.關(guān)機(jī)

  取下觀察對象,推拉光源亮度調(diào)節(jié)器至最暗。關(guān)閉鏡體下端的開關(guān),并斷開電源。旋轉(zhuǎn)三孔轉(zhuǎn)換器,使物鏡鏡片置于載物臺下側(cè),防止灰塵的沉降。

  日常維護(hù)及注意事項:

  1.所有鏡頭表面必須保持清潔,落在鏡頭表面的灰塵,可用吸耳球吹去,也可用軟毛刷輕輕的撣去掉。

  2.當(dāng)鏡頭表面沾有油污或指紋時,可用脫脂棉蘸少許無水乙醇和yi醚的混合液(3:7)輕輕擦拭。

  3.不能用有機(jī)溶液清擦其它部件表面,特別是塑料零件,可用軟布蘸少量中性洗滌劑清擦。

  4.在任何情況下操作人員不能用棉團(tuán)、干布塊或干鏡頭紙擦試鏡頭表面,否則會刮傷鏡頭表面,嚴(yán)重?fù)p壞鏡頭,也不要用水擦試鏡頭,這樣會在鏡頭表面殘留一些水跡,因而可能滋生霉菌,嚴(yán)重?fù)p壞顯微鏡。

  5.儀器工作的間歇期間,為了防止灰塵進(jìn)入鏡筒或透鏡表面,可將目鏡留在鏡筒上,或蓋上防塵塞,或用防塵罩將儀器罩住。

  6.微鏡盡可能不移動,若需移動應(yīng)輕拿輕放,避免碰撞。

  7.不允許隨意拆卸儀器,特別是中間光學(xué)系統(tǒng)或重要的機(jī)械部件,以免降低儀器的使用性能。

標(biāo)簽: 倒置顯微鏡
倒置顯微鏡 倒置顯微鏡操作及日常維護(hù)_倒置顯微鏡

偏光顯微鏡基本工作原理

  偏光顯微鏡基本工作原理:

  一、單折射性與雙折射性:

  光線通過某一物質(zhì)時,如光的性質(zhì)和進(jìn)路不因照射方向而改變,這種物質(zhì)在光學(xué)上就具有“各向同性”,又稱單折射體,如普通氣體、液體以及非結(jié)晶性固體;若光線通過另一物質(zhì)時,光的速度、折射率、吸收性和偏振、振幅等因照射方向而有不同,這種物質(zhì)在光學(xué)上則具有“各向異性”,又稱雙折射體,如晶體、纖維等。

  二、光的偏振現(xiàn)象:

  光波根據(jù)振動的特點(diǎn),可分為自然光與偏振光。自然光的振動特點(diǎn)是在垂直光波傳導(dǎo)軸上具有許多振動面,各平面上振動的振幅分布相同;自然光經(jīng)過反射、折射、雙折射及吸收等作用,可得到只在一個方向上振動的光波,這種光波則稱為“偏光”或“偏振光”。

  三、偏光的產(chǎn)生及其作用:

  偏光顯微鏡重要的部件是偏光裝置——起偏器和檢偏器。過去兩者均為尼科爾(Nicola)棱鏡組成,它是由天然的方解石制作而成,但由于受到晶體體積較大的限制,難以取得較大面積的偏振,偏光顯微鏡則采用人造偏振鏡來代替尼科爾梭鏡。人造偏振鏡是以硫酸喹啉又名Herapathite的晶體制作而成,呈綠橄欖色。當(dāng)普通光通過它后,就能獲得只在一直線上振動的直線偏振光。偏光顯微鏡有兩個偏振鏡,一個裝置在光源與被檢物體之間的叫“起偏鏡”;另一個裝置在物鏡與目鏡之間的叫“檢偏鏡”,有手柄伸手鏡筒或中間附件外方以便操作,其上有旋轉(zhuǎn)角的刻度。從光源射出的光線通過兩個偏振鏡時,如果起偏鏡與檢偏鏡的振動方向互相平行,即處于“平行檢偏位”的情況下,則視場較為明亮。反之,若兩者互相垂直,即處于“正交校偏位”的情況下,則視場完全黑暗,如果兩者傾斜,則視場表明出中等程度的亮度。由此可知,起偏鏡所形成的直線偏振光,如其振動方向與檢偏鏡的振動方向平行,則能完全通過;如果偏斜,則只以通過一部分;如若垂直,則完全不能通過。因此,在采用偏光顯微鏡檢時,原則上要使起偏鏡與檢偏鏡處于正交檢偏位的狀態(tài)下進(jìn)行。

  四、正交檢偏位下的雙折射體:

  在正交的情況下,視場是黑暗的,如果被檢物體在光學(xué)上表現(xiàn)為各向同性單折射體、,無論怎樣旋轉(zhuǎn)載物臺,視場仍為黑暗,這是因為起偏鏡所形成的線偏振光的振動方向不發(fā)生變化,仍然與檢偏鏡的振動方向互相垂直的緣故。若被檢物體具有雙折射特性或含有具雙折射特性的物質(zhì),則具雙折射特性的地方視場變亮,這是因為從起偏鏡射出的直線偏振光進(jìn)入雙折射體后,產(chǎn)生振動方向不同的兩種直線偏振光,當(dāng)這兩種光通過檢偏鏡時,由于另一束光并不與檢偏鏡偏振方向正交,可透過檢偏鏡,就能使人眼看到明亮的象。光線通過雙折射體時,所形成兩種偏振光的振動方向,依物體的種類而有不同。

  雙折射體在正交情況下,旋轉(zhuǎn)載物臺時,雙折射體的象在360°的旋轉(zhuǎn)中有四次明暗變化,每隔90°變暗一次。變暗的位置是雙折射體的兩個振動方向與兩個偏振鏡的振動方向相一致的位置,稱為“消光位置”從消光位置旋轉(zhuǎn)45°,被檢物體變?yōu)樽盍粒@就是“對角位置”,這是因為偏離45°時,偏振光到達(dá)該物體時,分解出部分光線可以通過檢偏鏡,故而明亮。根據(jù)上述基本原理,利用偏光顯微術(shù)就可能判斷各向同性單折射體、和各向異性雙折射體、物質(zhì)。

  五、干涉色:

  在正交檢偏位情況下,用各種不同波長的混合光線為光源觀察雙折射體,在旋轉(zhuǎn)載物臺時,視場中不僅出現(xiàn)最亮的對角位置,而且還會看到顏色。出現(xiàn)顏色的原因,主要是由干涉色而造成當(dāng)然也可能被檢物體本身并非無色透明、。干涉色的分布特點(diǎn)決定于雙折射體的種類和它的厚度,是由于相應(yīng)推遲對不同顏色光的波長的依賴關(guān)系,如果被檢物體的某個區(qū)域的推遲和另一區(qū)域的推遲不同,則透過檢偏鏡光的顏色也就不同。

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偏光顯微鏡 偏光顯微鏡基本工作原理_偏光顯微鏡

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