雙光束紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(以下簡(jiǎn)稱儀器),系指從單色器發(fā)出的單色光經(jīng)光束開(kāi)關(guān)(斬光器)分成為樣品和參比兩條光束結(jié)構(gòu)的儀器。
它能消除光源不穩(wěn)和放大器增益變化的影響,并能自動(dòng)記錄和掃描物質(zhì)的吸收光譜圖。
儀器在開(kāi)機(jī)后通常會(huì)做一些自檢,但仍應(yīng)按本規(guī)程進(jìn)行檢定。儀器的波長(zhǎng)范圍包括195~800nm,狹縫為0.1~5nm可調(diào)。
工作原理
紫外可見(jiàn)分光光度法是利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見(jiàn)光譜區(qū)的輻射的吸收來(lái)進(jìn)行分析的一種儀器分析方法。
這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價(jià)電子能級(jí)的躍遷,它廣泛用于無(wú)機(jī)和有機(jī)物質(zhì)的定性和定量分析。
朗伯一一比耳定律(Lambet-Beer)是光吸收的基本定律,俗稱光吸收定律,是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。
當(dāng)入射光波長(zhǎng)一定時(shí),溶液的吸光度是吸光物質(zhì)的濃度c及吸收介質(zhì)厚度(吸收光程)的函數(shù)。
其常用表達(dá)式如下(式中ε為系數(shù)):
A=ε·c·l
紫外見(jiàn)分光光度計(jì)是基于紫外可見(jiàn)分光光度法的原理工作的常規(guī)分析儀器。根據(jù)光路設(shè)計(jì)的不同,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)可以分為單光束分光光度計(jì)、雙光束分光光度計(jì)和雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)。
制定依據(jù)
本規(guī)程主要參照國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程《JJG178-2007紫外、可見(jiàn)、近紅外分光光度計(jì)》、《JJF1641-2017紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)型式評(píng)價(jià)大綱》及《中國(guó)藥典》2015年版四部指導(dǎo)通則“0401紫外-可見(jiàn)分光光度法”擬定。
項(xiàng)目及技術(shù)要求
波長(zhǎng)準(zhǔn)確度≤±1.0nm(紫外光區(qū)),≤±2.0nm(500nm附近);
波長(zhǎng)重復(fù)性≤0.5nm。
基線平直度≤0.01吸光度。
0%線噪聲≤0.1%,100%線噪聲≤0.5%.
吸光度準(zhǔn)確度應(yīng)符合規(guī)定。
雜散光<0.8%。
光譜帶寬≤標(biāo)示帶寬±20%。
吸收池配對(duì)誤差≤0.5%。
檢測(cè)結(jié)果處理
自檢結(jié)果全部符合技術(shù)要求者,即為合格,可以使用。若檢測(cè)結(jié)果不符合規(guī)定,應(yīng)重新調(diào)試儀器再進(jìn)行自檢,符合規(guī)定后方可使用。
原子吸收分光光度計(jì)在出廠前雖然儀器已經(jīng)過(guò)嚴(yán)格檢查;
但是由于運(yùn)輸過(guò)程中的顛簸或長(zhǎng)期使用后,有可能發(fā)生漏氣現(xiàn)象,為確保安全,在日常操作過(guò)程中;
請(qǐng)您注意如下事項(xiàng):
1.長(zhǎng)期在惡劣條件存放的儀器應(yīng)該經(jīng)常維護(hù)保養(yǎng)。
2.在運(yùn)輸過(guò)程中受到劇烈撞擊的儀器,主機(jī)不能冒然通電!
3.一旦儀器的報(bào)警器發(fā)出聲音,應(yīng)立即關(guān)掉氣源,并關(guān)機(jī)。
4.請(qǐng)您隨時(shí)注意,一旦產(chǎn)生異味,請(qǐng)立即切斷電源,關(guān)掉乙炔鋼瓶總閥門(mén)。
請(qǐng)將空壓機(jī)的空氣管插入燃?xì)夤艿乐?,并涂抹肥皂水以檢查燃?xì)夤艿栏鹘宇^是否漏氣;
特別應(yīng)該檢查霧化筒后部的防爆塞是否密封完好,決不能在發(fā)生漏氣時(shí)點(diǎn)火操作,否則容易發(fā)生回火爆炸!
5.每次點(diǎn)火前檢查廢液管是否打好水封;確認(rèn)水封無(wú)誤時(shí)方可開(kāi)機(jī)點(diǎn)火。
6.一定要使用優(yōu)質(zhì)正品的乙炔專用減壓閥,并裝有防回火裝置。
7.乙炔鋼瓶放置在臨近儀器室的房間內(nèi),保持空氣流通,并應(yīng)有防火標(biāo)識(shí)!
8.乙炔減壓閥的出口壓力為0.07MPa,不能大于0.1MPa,空氣出口壓力在0.25-0.3MPa(注意:不能用氧氣代替空氣進(jìn)行點(diǎn)火實(shí)驗(yàn))。
鋼瓶壓力顯示低于0.3MPa時(shí)要更換新瓶。
9.乙炔氣源附近嚴(yán)禁明火或過(guò)熱高溫物體存放!乙炔氣源不應(yīng)與氧化性氣源同放!
10.排放的廢液應(yīng)及時(shí)傾倒處理或與當(dāng)?shù)丨h(huán)保部門(mén)聯(lián)系!
11.在日常工作中應(yīng)經(jīng)常檢查乙炔鋼瓶與減壓閥連接是否牢固無(wú)漏氣!
12.定期檢查各連接口有無(wú)漏氣現(xiàn)象。
13.注意點(diǎn)火、關(guān)火順序(先開(kāi)空氣再開(kāi)乙炔點(diǎn)火,先關(guān)乙炔再關(guān)空氣熄火)。
點(diǎn)火后操作人員不得離開(kāi)!
在當(dāng)天不用儀器操作時(shí),請(qǐng)將乙炔管道里的剩余氣體燃燒完,即直接關(guān)乙炔總開(kāi)關(guān)再管空氣!
14.嚴(yán)禁帶電插拔數(shù)據(jù)線纜。
15.任何操作本儀器的人員均應(yīng)經(jīng)過(guò)上述安全培訓(xùn)。
16.帶石墨爐的儀器一定要注意用電安全,由于會(huì)使用380V(3個(gè)火線,一個(gè)地線)動(dòng)力電,加熱時(shí)瞬間會(huì)產(chǎn)生很大的電流;
所以在石墨爐處于工作狀態(tài)時(shí),不要直接觸碰爐體部分,以免造成危險(xiǎn)。
在做實(shí)驗(yàn)時(shí)隨時(shí)觀察氬氣(保護(hù)氣體)的總壓力和內(nèi)氣流量計(jì)的流量,以保證石墨管能夠長(zhǎng)期使用和實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確和一致性。
紫外分光光度法是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜,來(lái)研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。
由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同;
因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量。
一般地,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)主要由光源系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室、檢測(cè)系統(tǒng)組成。
光源發(fā)出的復(fù)合光通過(guò)單色器被分解成單色光,當(dāng)單色光通過(guò)樣品室時(shí),一部分被樣品吸收,其余未被吸收的光到達(dá)檢測(cè)器,被轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào),經(jīng)電子電路的放大和數(shù)據(jù)處理后,通過(guò)顯示系統(tǒng)給出測(cè)量結(jié)果。
光源:發(fā)出所需波長(zhǎng)范圍內(nèi)的連續(xù)光譜,有足夠的光強(qiáng)度,穩(wěn)定。
可見(jiàn)光區(qū):鎢燈,碘鎢燈(320~2500nm)紫外區(qū):氫燈,氘燈(180~375nm);氙燈:紫外、可見(jiàn)光區(qū)均可用作光源。
單色器:將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的裝置。
棱鏡:依據(jù)不同波長(zhǎng)光通過(guò)棱鏡時(shí)折射率不同。
光柵:在鍍鋁的玻璃表面刻有數(shù)量很大的等寬度等間距條痕(600、1200、2400條/mm)。
利用光通過(guò)光柵時(shí)發(fā)生衍射和干涉現(xiàn)象而分光。
吸收池:用于盛待測(cè)及參比溶液。
可見(jiàn)光區(qū):光學(xué)玻璃池;紫外區(qū):石英池。
檢測(cè)器:利用光電效應(yīng),將光能轉(zhuǎn)換成電流訊號(hào)。光電池,光電管,光電倍增管。
檢流計(jì)(指示器):刻度顯示或數(shù)字顯示、自動(dòng)掃描記錄。
另外一種說(shuō)法,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)還主要由電光系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、光電系統(tǒng)、電子系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理、輸出打印系統(tǒng)等幾個(gè)部分組成。