常見(jiàn)液相色譜法按其分離原理可以分為液-固吸附色譜法、正相液-液分配色譜法、反相液-液分配色譜法、離子交換色譜法、離子對(duì)色譜法及分子排阻色譜法。每種液相色譜法的不同分離原理具體總結(jié)、歸納如下,可供參考!
1.液相色譜法:在液固吸附色譜法中,流動(dòng)相為液體,并使用固體吸附劑,被分離組分在色譜柱上分離原理是根據(jù)固定相對(duì)組分吸附力不同進(jìn)行分離的,其分離過(guò)程是一個(gè)吸附、解吸附的平衡過(guò)程。目前,液固吸附色譜法較常用于非離子型化合物,用于分離同分異構(gòu)體。
2.液-液分配色譜法:在液液分配色譜法中,流動(dòng)相與固定相都是液體,按照固定相和流動(dòng)相之間互不相溶進(jìn)行測(cè)試。同時(shí),按照其極性不同分為正相液液色譜法以及反相液液色譜法。其中正相液液分配法的流動(dòng)相極性小于固定相極性;反相液液分配色譜法中則是選用極性較大的流動(dòng)相與極性較小的流動(dòng)相。
3.離子交換色譜法:在離子交換色譜法中,固定相是離子交換劑,常用苯乙烯與二乙烯交聯(lián)形成的聚合物骨架,在表面未端芳環(huán)上接上羧基、磺酸基或季氨基。被分離組分在色譜柱上分離原理是樹(shù)脂上可電離離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的離子及被測(cè)組分的離子進(jìn)行可逆交換,根據(jù)各離子與離子交換基團(tuán)具有不同的電荷吸引力而分離。目前,離子交換色譜法主要用于分析有機(jī)酸、氨基酸、多肽及核酸。
4.離子對(duì)色譜法:在離子對(duì)色譜法中,固定相與流動(dòng)相都為液體,是液液色譜法的分支,是根據(jù)被測(cè)組分離子與離子對(duì)試劑離子形成中性的離子對(duì)化合物后,在非極性固定相中溶解度增大,從而實(shí)現(xiàn)分離的色譜法。主要用于分析離子強(qiáng)度大的酸堿物質(zhì)。
5.分子排阻色譜法:在分子排阻色譜法中,固定相是有孔徑的多孔性填料,流動(dòng)相是可以溶解樣品的溶劑。小分子量的化合物可以進(jìn)入孔中,滯留時(shí)間長(zhǎng);大分子量的化合物不能進(jìn)入孔中,直接隨流動(dòng)相流出,分子排阻色譜法利用分子篩對(duì)分子量大小不同的各組分排阻能力的差異而完成分離。目前,分子排阻色譜法常用于分離高分子化合物。