分光光度計作為一種精密儀器，在運行工作過程中由于工作環(huán)境，操作方法等種種原因，其技術狀況必然會發(fā)生某些變化，可能影響設備的性能，甚至誘發(fā)設備故障及事故。因此，分析工作者必須了解分光光度計的基本原理和使用說明，并能及時發(fā)現(xiàn)和排除這些隱患，對已產生的故障及時維修才能保證儀器設備的正常運行。
1)若大幅度改變測試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100%”點。然后再測量。
2)指針式儀器在未接通電源時，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進行機械調零。
3)比色皿使用完畢后，請立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
4)操作人員不應輕易動燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
5)1900型等分光光度計，由于其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點是放大倍數大，因而可以用于檢測微弱光電信號，而不能用來檢測強光。否則容易產生信號漂移，靈敏度下降。針對其上述特點，在維修、使用此類儀器時應注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下，因此在預熱時，應打開比色皿蓋或使用擋光桿，避免長時間照射使其性能漂移而導致工作不穩(wěn)。
6)放大器靈敏度換擋后，必須重新調零。
7)比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用，否則將使測試結果失去意義。在進行每次測試前均應進行比較。具體方法如下；分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液，把儀器置于某一波長處，石英比色杯；220nm、700nm裝蒸餾水，玻璃比色杯：700nm處裝蒸餾水，將某一個池的透射比值調至100%，測量其他各池的透射比值，記錄其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范圍內則可以配套使用，若超出此范圍應考慮其對測試結果的影響。
紫外分光光度法是根據物質的吸收光譜，來研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。
物質的吸收光譜就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。
由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同；
因此，每種物質就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量。
一般地，紫外可見分光光度計主要由光源系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室、檢測系統(tǒng)組成。
光源發(fā)出的復合光通過單色器被分解成單色光，當單色光通過樣品室時，一部分被樣品吸收，其余未被吸收的光到達檢測器，被轉變?yōu)殡娦盘?，經電子電路的放大和數據處理后，通過顯示系統(tǒng)給出測量結果。
光源：發(fā)出所需波長范圍內的連續(xù)光譜，有足夠的光強度，穩(wěn)定。
可見光區(qū)：鎢燈，碘鎢燈(320～2500nm)紫外區(qū)：氫燈，氘燈(180～375nm)；氙燈：紫外、可見光區(qū)均可用作光源。
單色器：將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的裝置。
棱鏡：依據不同波長光通過棱鏡時折射率不同。
光柵：在鍍鋁的玻璃表面刻有數量很大的等寬度等間距條痕(600、1200、2400條/mm)。
利用光通過光柵時發(fā)生衍射和干涉現(xiàn)象而分光。
吸收池：用于盛待測及參比溶液。
可見光區(qū)：光學玻璃池；紫外區(qū)：石英池。
檢測器：利用光電效應，將光能轉換成電流訊號。光電池，光電管，光電倍增管。
檢流計（指示器）：刻度顯示或數字顯示、自動掃描記錄。
另外一種說法，紫外可見分光光度計還主要由電光系統(tǒng)、光學系統(tǒng)、光電系統(tǒng)、電子系統(tǒng)和數據處理、輸出打印系統(tǒng)等幾個部分組成。
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