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二氧化碳培養(yǎng)箱的正確使用 二氧化碳培養(yǎng)箱操作規(guī)程

時間:2020-05-16    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境,培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。
  
  二氧化碳培養(yǎng)箱的使用方法
  
  1. 將隨機提供的減壓閥裝在二氧化碳鋼瓶上,接頭處不得有漏氣現(xiàn)象,暫不打開鋼瓶。將減壓閥輸出接頭用膠管(可用血壓計上用的外徑φ8,內(nèi)徑φ4的橡膠管代用)與CO2 箱背后上方的CO2 進氣管接頭接通相連,用壓緊圈壓緊,以防漏氣。
  
  2. 用酒精將CO2 箱工作室內(nèi)擦凈,在箱體后背打開紫外線燈電源開關(guān),消毒1-2小時。
  
  3. 用加水管連接水龍頭和箱體左上側(cè)加水口。水套式CO2 箱依此操作!
  
  4. 接通電源,電源開關(guān)置“1”,綠色指示燈亮。
  
  a. 水套式CO2 箱必須先進行加水操作,步驟如下所述:
  
  打開水龍頭,緩慢給水箱加水,隨水位逐漸升高,當?shù)退恢甘緹魷绾?,此時再等待3-5秒后停止加水,此時水位在低、高水位之間,水位燈均應(yīng)不亮,設(shè)備可投入運行。在未加水至高于低水位時,低水位指示燈亮并有蜂鳴報警聲。如進水過多,高水位指示燈亮后,水將從箱體背后溢水口溢出,故當高水位指示燈亮?xí)r,把左下側(cè)的放水口橡皮管拉出后拔出放水塞放水(注意:放水橡皮管應(yīng)向外拉直約300mm左右)。直至高水位指示燈滅后2-3秒,再把放水塞頭塞緊。低水位報警時,應(yīng)及時加水,否則溫度控制器停止加熱。
  
  b. 將溫度設(shè)定值調(diào)到需要的溫度(例如37℃),加熱指示燈(綠)應(yīng)亮,表示正在加熱。(注:環(huán)境溫度超出25℃,可用空調(diào)降低環(huán)境溫度。)
  
  c. 將二氧化碳控制開關(guān)置于“0”。(關(guān)閉電磁閥,因為在未通二氧化碳培養(yǎng)時電磁閥長時間通電會發(fā)熱,影響電磁閥壽命。)
  
  d. 待溫度達到設(shè)定值后。將二氧化碳鋼瓶開啟,(開啟前,減壓閥應(yīng)盡量擰松,防止減壓閥輸出壓力過高導(dǎo)致輸氣橡皮管暴裂!)減壓閥上進氣壓力表指示鋼瓶內(nèi)二氧化碳壓力,緩慢地順時針擰減壓閥旋扭。使減壓閥輸出壓力指示為0.05Mpa,指針處于刻度線中間。此時用撥盤設(shè)定二氧化碳濃度(出廠時調(diào)整為5%),開啟二氧化碳控制開關(guān)前要關(guān)閉空氣流量計和二氧化碳流量計,二氧化碳控制器顯示“1”,此時即有二氧化碳進入內(nèi)室。隨著濃度升高,二氧化碳控制器顯示出二氧化碳濃度值,到設(shè)定值時,設(shè)備自動切換到空氣及二氧化碳補氣狀態(tài)。此時需調(diào)整空氣流量計浮子應(yīng)指示在760 ml/min(出廠時已調(diào)好),二氧化碳流量計浮子應(yīng)指示在40 ml/min(出廠時已調(diào)好);若浮子偏離上述數(shù)值時,可調(diào)節(jié)流量計旋鈕到760 ml/min(空氣)及40 ml/min(二氧化碳)準確為止。(在開、關(guān)箱門后,短時間內(nèi)空氣流量計無流量,CO2 流量計流量也小于40ml/min這是正?,F(xiàn)象)
  
  e. 出廠時一般調(diào)整為5%±0.3%二氧化碳濃度,已能滿足廣大用戶的要求。
  
  f. 當溫度達到設(shè)定值,波動±0.5℃以內(nèi),二氧化碳濃度也達到要求后,即可進行細胞培養(yǎng)。放入水盤,使?jié)穸确弦蟆?br />  
  g. 在使用本機或長期不用后使用本機,均應(yīng)按上述要求操作,并且在正式培養(yǎng)前應(yīng)作箱內(nèi)污染檢查。
  
  5. 關(guān)機
  
  培養(yǎng)結(jié)束后,開箱門取出培養(yǎng)皿,將未培養(yǎng)皿重新放入(注意觀察水盤中的蒸餾水是否需補充)。若停止培養(yǎng),則應(yīng)先將CO2 鋼瓶關(guān)閉,再將空氣流量計和二氧化碳流量計關(guān)閉,CO2 進氣開關(guān)置“0”位置,zui后關(guān)閉總電源。若長期不使用,則應(yīng)取出水盤,擦干工作室,在CO2 進氣開關(guān)關(guān)閉狀態(tài)下,使CO2 箱在37℃條件下開機2小時,烘干工作室,再切斷總電源。
  
  門溫調(diào)節(jié)方法
  
  本機在出廠時,以37℃為基準調(diào)好,如冬天箱內(nèi)玻璃門上水霧大,無法看清箱內(nèi)培養(yǎng)物品,可在CO2 箱內(nèi)后背調(diào)節(jié)門溫旋鈕,向右旋動(即向溫度升高的方向),直至能看清箱內(nèi)物品;如夏天,箱內(nèi)實際溫度高于設(shè)置溫度時,則將調(diào)節(jié)旋鈕向左旋動(即向溫度降低的方向)直至箱內(nèi)溫度達到37℃。
  
  風(fēng)機調(diào)節(jié)方法
  
  使用中,風(fēng)量的大小不但會影響箱內(nèi)溫度的均勻度,直至影響控制溫度。若在使用中,風(fēng)量的過大影響到培養(yǎng)物品,則可在CO2 箱后背調(diào)節(jié)風(fēng)機轉(zhuǎn)速旋鈕,直至滿足需求。
  
  新購買的二氧化碳培養(yǎng)箱要如何連接到二氧化碳鋼瓶?部分新用戶不是很了解,為了讓大家能夠更好地操作,我們今天做個詳細介紹。
  
  二氧化碳培養(yǎng)箱如何連接二氧化碳鋼瓶
  
  首先在鋼瓶上面連接減壓閥(用培養(yǎng)箱專用閥門),再用軟管連接到二氧化碳培養(yǎng)箱的CO2氣體IN進口,軟管兩端用專用卡子固定好,鋼瓶閥門開之前,必須確保減壓閥完全關(guān)閉。鋼瓶閥門打開之后,再開減壓閥的小閥門,調(diào)節(jié)好壓力,具體的要控制壓力要設(shè)置在合理的壓力范圍內(nèi)。
  
  二氧化碳培養(yǎng)箱一般使用的壓力都不會很高,培養(yǎng)箱都很嬌貴的,所以一定要先調(diào)好減壓閥出口的壓力后再連接二氧化碳培養(yǎng)箱。二氧化碳減壓閥裝在鋼瓶上面后就可以用減壓閥調(diào)節(jié)出口壓力了,減壓閥出廠里面都配有調(diào)節(jié)手輪的,把手輪插入減壓閥正面凸出凹洞出輕輕往里面調(diào)節(jié)就可以了,越往里面調(diào)節(jié)二氧化碳減壓閥出口的壓力就越大。先可以試試減壓閥出口壓力穩(wěn)不穩(wěn)定(一般情況下二氧化碳培養(yǎng)箱需要的壓力在0.03mpa-0.06mpa范圍內(nèi)也有用到0.1mpa要看實際情況的,二氧化碳氣體就算放出來點也是沒有什么危險的,其他氣體就要另當別論了),如果確定沒有問題就把手輪給松下來,調(diào)節(jié)手輪松下來后即使鋼瓶是開著的減壓閥的出口也是沒有壓力的,因為減壓閥你不調(diào)節(jié)出口是沒有壓力的,如沒問題便可連接二氧化碳培養(yǎng)箱。
  
  安全使用減壓閥
  
  1、氣瓶放氣或開啟減壓閥時動作必須緩慢。如閥門開啟速度過快,減壓閥工作部分的氣體因受絕熱壓縮而溫度大大提高,這樣有可能使有機材料制成的零件如橡膠填料、橡膠薄膜纖維質(zhì)襯墊著火燒壞,并可使減壓閥完全燒壞。另外,由于放氣過快產(chǎn)生的靜電火花以及減壓閥有油污等,也會引起著火燃燒燒壞減壓閥零件。
  
  2、減壓閥安裝前及開啟氣瓶閥時的注意事項:安裝減壓閥之前,要略打開氧氣瓶閥門,吹除污物,以防灰塵和水分帶入減壓閥。在開啟氣瓶閥時,瓶閥出氣口不得對準操作者或他人,以防高壓氣體突然沖出傷人。減壓閥出氣口與氣體橡膠管接頭處必須用退過火的鐵絲或卡箍擰緊;防止送氣后脫開發(fā)生危險。

二氧化碳培養(yǎng)箱的選擇方法

  全世界的用戶對二氧化碳培養(yǎng)箱都有兩條基礎(chǔ)的要求,一是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)囟取⒍趸紳舛群蜐穸忍峁┚_穩(wěn)定的控制,以便于其研究工作的進展;二是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進行有效的防范,并且能夠定期消除污染,以保護研究成果,防止樣品損失。所以,選購二氧化碳培養(yǎng)箱的老師最關(guān)心的當然就是其高可靠性、對污染的防范和控制及使用方便。

  一、溫度控制

  1. 加熱方式:

  氣套式加熱和水套式加熱,兩種加熱系統(tǒng)都是精確和可靠的,同時它們都有著各自的優(yōu)點和缺點。

  水套式加熱是通過一個獨立的水套層包圍內(nèi)部的箱體來維持溫度恒定的,其優(yōu)點:水是一種很好的絕熱物質(zhì),當遇到斷電的時候,水套式系統(tǒng)就可以比較長時間的保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度準確性和穩(wěn)定性(維持溫度恒定的時間是氣套式系統(tǒng)的3~4倍),有利于實驗環(huán)境不太穩(wěn)定(如有用電限制,或者經(jīng)常停電)并需要保持長時間穩(wěn)定的培養(yǎng)條件的用戶選用。

  氣套式加熱是通過遍布箱體氣套層內(nèi)的加熱器直接對內(nèi)箱體進行加熱的,又叫六面直接加熱。氣套式與水套式相比,具有加熱快,溫度的恢復(fù)比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點,特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關(guān)的培養(yǎng)。此外,對于使用者來說氣套式設(shè)計比水套式更簡單化(水套式需要對水箱進行加水、清空和清洗,并要經(jīng)常監(jiān)控水箱運作的情況)。

  2. 溫控系統(tǒng):

  保持培養(yǎng)箱內(nèi)恒定的溫度是維持細胞健康生長的重要因素,因此精確可靠的溫控系統(tǒng)是培養(yǎng)箱不可或缺的重要部分。為了使培養(yǎng)箱更加穩(wěn)定的工作,我們推薦用戶選用具備相互獨立三重溫度控制功能的二氧化碳培養(yǎng)箱,即箱內(nèi)溫度控制、超溫報警控制和環(huán)境溫度監(jiān)控。

  我們知道培養(yǎng)箱的最低工作溫度一般是高于室溫5℃,如果沒有緩慢加熱模式就非常容易在夏天高溫天氣(如室溫30℃左右時)產(chǎn)生箱內(nèi)溫度過高;HF90的獨立超溫報警功能能夠快速準確的在培養(yǎng)箱內(nèi)溫度高于培養(yǎng)溫度1℃時,切斷培養(yǎng)箱的主加熱系統(tǒng),同時聲光報警;HF90的環(huán)境溫度監(jiān)控可以根據(jù)環(huán)境溫度的變化自 動調(diào)節(jié)培養(yǎng)箱外門輔助加熱系統(tǒng)的功率,達到精確控制箱體內(nèi)溫度的目的。

  3. 溫度均一性:

  二氧化碳培養(yǎng)箱箱體內(nèi)的溫度均一性也是用戶需要考慮的主要因素,一般在箱體內(nèi)配備了風(fēng)扇以及風(fēng)道的培養(yǎng)箱的均一度要好很多,同時此裝置還有助于箱內(nèi)溫度、CO2濃度和相對濕度的迅速恢復(fù)。

  當然,風(fēng)扇/風(fēng)道的優(yōu)化也是同等重要的,HF90二氧化碳培養(yǎng)箱獨特設(shè)計的大直徑風(fēng)扇和循環(huán)風(fēng)道能夠保證箱體內(nèi)溫度和二氧化碳濃度的均一性。大直徑風(fēng)扇相比其他品牌培養(yǎng)箱的風(fēng)扇,能夠在低轉(zhuǎn)速(低風(fēng)速)時產(chǎn)生大的空氣循環(huán)流量,在達到均一性目的的同時,降低風(fēng)速、減少箱內(nèi)震動。降低風(fēng)速、減少震動同時也就大大提高了箱內(nèi)細胞培養(yǎng)的成功率。

  二、二氧化碳濃度控制

  1. 兩種控制系統(tǒng):

  紅外傳感器(IR)或熱導(dǎo)傳感器(TCD)進行測量。兩種傳感器都是準確的,但都各有優(yōu)缺點。熱導(dǎo)傳感器監(jiān)控CO2濃度的工作原理是基于對內(nèi)腔空氣熱導(dǎo)率的連續(xù)測量,輸入CO2氣體的低熱導(dǎo)率會使腔內(nèi)空氣的熱導(dǎo)率發(fā)生變化,這樣就會產(chǎn)生一個與CO2濃度直接成正比的電信號。紅外傳感器(IR)它是通過一個光學(xué)傳感器來檢測CO2水平的。IR系統(tǒng)包括一個紅外發(fā)射器和一個傳感器,當箱體內(nèi)的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后,傳感器就可以檢測出紅外線的減少量,而被吸收紅外線的量正好對應(yīng)于箱體內(nèi)CO2的水平,從而可以得出箱體內(nèi)CO2的濃度。由于IR系統(tǒng)是通過紅外線減少來確定箱內(nèi)CO2濃度,而箱體內(nèi)顆粒物能夠反射或部分吸收紅外線,使得IR系統(tǒng)對箱體內(nèi)顆粒物的多少比較敏感,因此IR傳感器應(yīng)用在含HEPA高效空氣過濾器的培養(yǎng)箱內(nèi)比較合適。

  2. CO2測量系統(tǒng)自動校準功能:

  無論哪種CO2測量系統(tǒng)在使用一段時間后都會產(chǎn)生漂移,而產(chǎn)生漂移后直接會導(dǎo)致箱體內(nèi)二氧化碳濃度不能穩(wěn)定在我們的設(shè)定值,致使培養(yǎng)失敗,所以我們在這里強烈建議用戶在選購培養(yǎng)箱時必須要選擇帶有CO2測量系統(tǒng)自動校準功能的培養(yǎng)箱。

  3. CO2濃度均一性:此點與溫度均一性的要求類似,在此就不做贅述。

  三、相對濕度

  箱內(nèi)濕度對于培養(yǎng)工作來說是一項非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。維持足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復(fù)速度(如在開關(guān)門后)才能保證不會由于過度干燥而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。目前大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是通過增濕盤的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的(其產(chǎn)生的相對濕度水平可達95%左右,但開門后濕度恢復(fù)速度很慢)。我們在此建議用戶在選購二氧化碳培養(yǎng)箱的時候盡量選擇濕度蒸發(fā)面積大的培養(yǎng)箱,因為我們知道濕度蒸發(fā)面積越大,越容易達到最大相對飽和濕度并且開關(guān)門后的濕度恢復(fù)的時間越短。

  四、防污染設(shè)計和消毒滅菌系統(tǒng)

  污染是導(dǎo)致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素,因而,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們設(shè)計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面,并結(jié)合自動排除污染裝置來有效防止污染的產(chǎn)生。例如,鑒于CO2培養(yǎng)箱在使用過程中有時會伴有霉菌生長,為確保培養(yǎng)箱免受污染并且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔性,相繼問世了多種消毒滅菌方式,如帶有紫外消毒功能的CO2培養(yǎng)箱;還有的設(shè)計生產(chǎn)了HEPA過濾器能過濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣,可過濾除去99.97%的0.3微米以上的顆粒;此外,還開發(fā)設(shè)計了能使箱內(nèi)達到高溫濕熱的環(huán)境從而殺死污染微生物,達到消毒滅菌目的的培養(yǎng)箱。這些裝置對于細胞培養(yǎng)來說是必不可少,但選擇何種清潔裝置呢?首先,我們考慮的當然是各種方式的滅菌能力,紫外消毒能力是與紫外燈距離目標的距離的二次方成反比,距離越遠,消毒能力越差,所以紫外消毒方式有其局限性,難以達到徹底滅菌的要求;

  HEPA過濾器由于受到過濾膜孔徑的影響,無法去除病毒和一些微小細菌,也有其局限性;相比較而言,高溫消毒是目前比較有效消毒滅菌的方法,高溫消毒又分為兩類,一是傳統(tǒng)的高溫干熱消毒,另一種是先進的高溫濕熱滅菌。

  接下來我們重點說一下高溫干熱和高溫濕熱兩種方法的優(yōu)劣。高溫濕熱由于蒸汽潛熱大,穿透力強,容易使蛋白質(zhì)變性或凝固,因此該法的滅菌效率比干熱滅菌法高。其原因有三:

 ?、俚鞍踪|(zhì)凝固所需的溫度與其含水量有關(guān),含水量愈大,發(fā)生凝固所需的溫度愈低。濕熱滅菌的菌體蛋白質(zhì)吸收水分,所以較同一溫度的干熱空氣中易于凝固。

 ?、跐駸釡缇^程中蒸汽放出大量潛熱,加速提高濕度。因而濕熱滅菌比干熱所需溫度低,如在同一溫度下,則濕熱滅菌所需時間比干熱短。

 ?、蹪駸岬拇┩噶Ρ雀蔁岽?,使其深部也能達到滅菌溫度,故濕熱比干熱收效好一些。

  所以高溫消毒并不是簡單的看消毒溫度,主要是看是否濕熱消毒。另外,從使用角度看,濕熱消毒一般控制在90℃就能達到很徹底的消毒效果,整個消毒過程中培養(yǎng) 箱內(nèi)的所有附件都不用取出,可以全部進行消毒;而干熱消毒為了達到較好的效果,溫度一般都在100℃以上,在這種溫度下消毒培養(yǎng)箱內(nèi)的傳感器、HEPA過 濾器等都要在消毒過程中取出,等消毒結(jié)束再裝上,這樣即麻煩,附件又不能同時消毒,而且增加二次污染的幾率,再者要達到100℃以上的高溫,培養(yǎng)箱的加熱 系統(tǒng)的電熱絲必然要加粗,這會導(dǎo)致培養(yǎng)箱的溫度控制難度增加,均一性變差。所以我們建議用戶在選購二氧化碳培養(yǎng)箱時選擇含高溫濕熱滅菌方式的培養(yǎng)箱。

  五、其它因素

  二氧化碳培養(yǎng)箱的容積也是一個不可忽略的因素,買小了不夠用,大了又浪費又占地方。二氧化碳培養(yǎng)箱的可選容積非常廣,而且每種類型又有不同的容積可選。此時,就需要您在選購前對所需培養(yǎng)箱容積的范圍有一個比較準確的了解,并在此基礎(chǔ)上多預(yù)留一點空間,以保證不時之需。

標簽: 二氧化碳培養(yǎng)箱
二氧化碳培養(yǎng)箱標簽: 二氧化碳培養(yǎng)箱的選擇方法_二氧化碳培養(yǎng)箱組合標題:

二氧化碳培養(yǎng)箱性能特點

  二氧化碳培養(yǎng)箱是細胞、組織、細菌培養(yǎng)的一種先進儀器。是開展免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、遺傳學(xué)及生物工程必備的關(guān)鍵設(shè)備,廣泛應(yīng)用于微生物、農(nóng)業(yè)科學(xué)、藥物學(xué)的研究和生產(chǎn)。

  二氧化碳培養(yǎng)箱性能特點:

  采用國內(nèi)首創(chuàng)流線圓弧型設(shè)計,外殼采用冷軋鋼板制造,表面靜電噴塑;

  本機溫控系統(tǒng)采用微電腦單片機技術(shù),控溫,定時,超溫報警,二氧化碳控制方式為配氣式;

  顯示為雙屏高亮度數(shù)碼管顯示,示值準確直觀,性能優(yōu)越,觸摸式按鍵設(shè)定調(diào)節(jié)參數(shù);

  采用自動抑制系統(tǒng),防止打開箱門造成內(nèi)腔溫度的波動度大;

  溫控傳感器采用的是電容式原裝進口部件;加熱方式有氣套加熱和水套加熱兩種供選擇;

  內(nèi)膽均為鏡面不銹鋼材料制成;半圓形四角易清潔;

  采用門溫控制,可有效防止箱內(nèi)玻璃門結(jié)露現(xiàn)象;

  工作室內(nèi)擱架可隨用戶要求任意調(diào)節(jié)高度及擱架多少;

  具備兩套控制系統(tǒng),當主控系統(tǒng)失效時,副控系統(tǒng)起監(jiān)控作用

標簽: 二氧化碳培養(yǎng)箱
二氧化碳培養(yǎng)箱 二氧化碳培養(yǎng)箱性能特點_二氧化碳培養(yǎng)箱

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