流動(dòng)相相當(dāng)于液相的血液，可以想象對(duì)液相的重要程度。那么流動(dòng)相都需要注意什么呢? 01、過(guò)濾溶劑 溶劑在使用前一定要用0.5μm的過(guò)濾器過(guò)濾，如果使用固體化學(xué)試劑(緩沖鹽)配制流動(dòng)相，過(guò)濾特別重要，不能讓固體微粒污染泵，阻塞進(jìn)樣器和柱頭過(guò)濾片。本實(shí)驗(yàn)室有水溶性和脂溶性?xún)煞N過(guò)濾膜供選擇(反光面朝上)，過(guò)濾水溶性流動(dòng)相時(shí)(如甲醇/水)，先用1～2mL甲醇潤(rùn)濕過(guò)濾膜，有助于快速抽濾。 02、保持儲(chǔ)液瓶的清潔 用普通溶劑瓶作流動(dòng)相儲(chǔ)液器應(yīng)不定期廢棄瓶子，最后一次應(yīng)用HPLC級(jí)的水或溶劑清洗，不能在清洗過(guò)程中留下污跡?！ ?3、保證溶劑的質(zhì)量 一定要用HPLC級(jí)的溶劑，水也應(yīng)達(dá)到HPLC級(jí)，同樣也要使用高純度的緩沖鹽?！ ∫恍┮蛄鲃?dòng)相引起的常見(jiàn)問(wèn)題 01、流動(dòng)相脫氣不充分 流動(dòng)相受熱，或者流動(dòng)相不同組分混合時(shí)會(huì)有氣體產(chǎn)生，氣泡進(jìn)入泵內(nèi)引起壓力波動(dòng)，增加噪音，色譜圖上出現(xiàn)毛刺?？稍囉孟铝蟹椒ń鉀Q問(wèn)題：流動(dòng)相再脫氣;采用更有效的脫氣方法或兩種方法配合使用;改系統(tǒng)內(nèi)混合為系統(tǒng)外預(yù)混合?！ ?2、流動(dòng)相供給不暢 流動(dòng)相用完，管道中吸入氣體引起泵壓力不穩(wěn)。應(yīng)經(jīng)常觀(guān)察儲(chǔ)液器中流動(dòng)相的量，加足流動(dòng)相保證所有的樣品分析完畢。輸液管道上裝沉子沉至瓶底，儲(chǔ)液器蓋上留一小孔正好夾住進(jìn)液管，使其不能上下移動(dòng)?！ ∵^(guò)濾器阻塞引起管道和泵腔空化，壓力不穩(wěn)。過(guò)濾器被微粒所阻塞或長(zhǎng)霉，去掉過(guò)濾器后如果系統(tǒng)運(yùn)轉(zhuǎn)正常，說(shuō)明已找出問(wèn)題，換上新的過(guò)濾器則可。有時(shí)候換上新的過(guò)濾器仍然不暢，那就需要查查流動(dòng)相的制備過(guò)程，或者換大孔徑的過(guò)濾器。不管如何，流動(dòng)相都需要重新過(guò)濾?！ ×魉龠^(guò)高、阻力大，造成空化現(xiàn)象，這是由于過(guò)濾器孔徑、管道內(nèi)徑、流速和溶劑黏度等引起的。如果流速大于10mL/min，常會(huì)出現(xiàn)這種現(xiàn)象?！ ∈褂孟铝蟹椒ń鉀Q： (1)使用低流速; (2)換大孔徑的過(guò)濾器; (3)增加進(jìn)液管道內(nèi)徑; (4)抬高或加壓儲(chǔ)液器; (5)不用過(guò)濾器，但流動(dòng)相一定要先過(guò)濾; (6)儲(chǔ)液器蓋子太緊，在儲(chǔ)液器內(nèi)形成真空，打出的流動(dòng)相不連續(xù)。應(yīng)松開(kāi)蓋子或留有1mm的縫隙; (7)進(jìn)液管道阻塞或彎曲使泵抽不到液，注意調(diào)整進(jìn)液管道或更換新的。其它問(wèn)題包括滲漏或接頭松動(dòng)、泵部件損壞等，都能引起供液不正常?！ ?3、流動(dòng)相和儲(chǔ)液器被污染 由于污染，噪音越來(lái)越大，檢測(cè)器基線(xiàn)上升。污染物可能被泵以穩(wěn)定的濃度打入系統(tǒng)，而再以穩(wěn)定的濃度流出來(lái)，所以在色譜圖中不出多余的峰。用梯度洗脫時(shí)弱流動(dòng)相可以使污染物聚在柱頂，流動(dòng)相強(qiáng)度增加后污染物可能被洗脫出來(lái)一個(gè)大的偽峰。有時(shí)基線(xiàn)噪音突然增大或突然提高，都是因?yàn)榉磸?fù)加進(jìn)新的流動(dòng)相或系統(tǒng)用得太久(通宵)所造成的。新加進(jìn)的流動(dòng)相有污染物或者流動(dòng)相長(zhǎng)霉，繁殖了細(xì)菌?！ ∨K的儲(chǔ)液器會(huì)污染清潔的流動(dòng)相。每種流動(dòng)相備有專(zhuān)用的儲(chǔ)液器，或者定期報(bào)廢儲(chǔ)液器?！ ×鲃?dòng)相污染來(lái)自這幾個(gè)方面 04、試劑質(zhì)量不高，玻璃器皿不合格; 微生物的影響; 配制流動(dòng)相時(shí)操作不當(dāng)?shù)? 因此要求高純度化學(xué)試劑和HPLC級(jí)溶劑; 玻璃器皿按規(guī)定清洗干凈; 為防止微生物生長(zhǎng)，每天要用甲醇清洗系統(tǒng); 懷疑系統(tǒng)內(nèi)生長(zhǎng)了微生物，可用稀硝酸沖洗即可(注意不要損壞柱和管道系統(tǒng)); 真空脫氣時(shí)防止泵油帶入流動(dòng)相; 用清潔的惰性塞子、攪棒、過(guò)濾器和玻璃器皿配制流動(dòng)相; 已經(jīng)污染的流動(dòng)相一定要廢棄掉。
高效液相色譜儀（HPLC）現(xiàn)已成為有機(jī)化學(xué)分析的重要手段之一。同樣，在食品分析中，無(wú)論是殘留分析還是成分分析，HPLC也已成為不可或缺的分析儀器。和其它分析儀器一樣，你若想讓HPLC很好地為你工作、得到可靠的數(shù)據(jù)，首先你要保養(yǎng)好它，使它處于一個(gè)良好的待機(jī)狀態(tài)，這樣你操作它進(jìn)行分析時(shí)就可以比較順利地獲得理想的結(jié)果?！ ×鲃?dòng)相脫氣對(duì)于避免HPLC系統(tǒng)出問(wèn)題，順利得到一個(gè)理想的數(shù)據(jù)是一個(gè)很有效的措施。HPLC系統(tǒng)內(nèi)是不能夠有氣泡存在的。HPLC泵在輸送液體時(shí)要產(chǎn)生很大的壓力，由于氣體的壓縮比與液體相比大的多，因而當(dāng)氣泡存在時(shí)，你將觀(guān)察到瞬間的流速降低和系統(tǒng)壓力下降。如果這個(gè)氣泡足夠大，液相泵將不能輸送任何溶劑，而且如果壓力低于預(yù)先設(shè)定的壓力低限，泵將停止工作。有些泵設(shè)計(jì)可以很好地排除氣泡，而也有一些泵設(shè)計(jì)當(dāng)氣泡存在時(shí)將停止運(yùn)轉(zhuǎn)?！ 〕Ｓ玫拿摎夥椒ㄓ腥缦聨追N： 1、吹氦脫氣法。 利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性，在0.1MPa壓力下，以約60 mL/min流速通入流動(dòng)相儲(chǔ)液容器中10～15min，可以很有效地從流動(dòng)相中排除溶解的空氣，能排除接近80%的氧氣。采用一個(gè)高效分布式噴射流裝置，一體積的氦氣可從流動(dòng)相中將等體積的幾乎全部氣體排除。這意味著1L氦氣通過(guò)1L流動(dòng)相就可完成排氣這個(gè)工作。這種脫氣方法雖然好，但我們國(guó)內(nèi)氦氣價(jià)格較高，很少有實(shí)驗(yàn)室采用此方法。 2、加熱回流法?！ 〈朔ǖ拿摎庑Ч^好。在操作時(shí)要注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑會(huì)丟失，混合流動(dòng)相的比例會(huì)有變化?！ ?、抽真空脫氣法。 此法可使用真空泵，降壓至0.05～0.07MPa即可除去溶解的氣體。但是由于真空脫氣會(huì)使混合溶劑組成發(fā)生變化，從而影響到實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性，因此多用于單溶劑體系的簡(jiǎn)單分析?！ ?、超聲波脫氣法?！ ⒂摎獾牧鲃?dòng)相置于超聲波清洗器中，用超聲波震蕩10～20min。此法的脫氣效果最差。 5、在線(xiàn)脫氣法?！ ‖F(xiàn)在商品的HPLC儀器，均可配在線(xiàn)脫氣機(jī)。在線(xiàn)脫氣使用簡(jiǎn)單，低故障，有效。建議購(gòu)買(mǎi)儀器時(shí)一定要購(gòu)買(mǎi)，有的公司是作為選購(gòu)件，所以與儀器公司談配置時(shí)應(yīng)與公司確認(rèn)。
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