高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎上,引用了氣相色譜的理論,在技術上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4、9~107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達幾萬或幾十萬);同時柱后連有高靈敏度的檢測器,可對流出物進行連續(xù)檢測。
特點
1、高壓:液相色譜法以液體為流動相(稱為載液),液體流經(jīng)色譜柱,受到阻力較大,為了迅速地通過色譜柱,必須對載液施加高壓。一般可達150~350×105Pa。
2、高速:流動相在柱內(nèi)的流速較經(jīng)典色譜快得多,一般可達1~10ml/min。高效液相色譜法所需的分析時間較之經(jīng)典液相色譜法少得多,一般少于1h。
3、高效:近來研究出許多新型固定相,使分離效率大大提高。
4、高靈敏度:高效液相色譜已廣泛采用高靈敏度的檢測器,進一步提高了分析的靈敏度。如熒光檢測器靈敏度可達10-11g。另外,用樣量小,一般幾個微升。
5、適應范圍寬:氣相色譜法與高效液相色譜法的比較:氣相色譜法雖具有分離能力好,靈敏度高,分析速度快,操作方便等優(yōu)點,但是受技術條件的限制,沸點太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)都難于應用氣相色譜法進行分析。而高效液相色譜法,只要求試樣能制成溶液,而不需要氣化,因此不受試樣揮發(fā)性的限制。對于高沸點、熱穩(wěn)定性差、相對分子量大(大于400以上)的有機物(這些物質(zhì)幾乎占有機物總數(shù)的75%~80%)原則上都可應用高效液相色譜法來進行分離、分析。據(jù)統(tǒng)計,在已知化合物中,能用氣相色譜分析的約占20%,而能用液相色譜分析的約占70~80%。
高效液相色譜法(HPLC)是目前應用廣泛的分析、純化、分離有機化合物的有效方法之一。
當今社會中約有80%的已知有機化合物能用高效液相色譜法分離、分析,而且由于此法條件溫和,不破壞樣品,因此特別適合熱穩(wěn)定性差、氣化揮發(fā)困難、沸點高的有機化合物和生命物質(zhì)。
液相色譜儀經(jīng)常應用于環(huán)境分析、食品分析、生命科學、分子生物學、臨床藥品檢測分析等領域。
液相色譜儀由溫度控制系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、高壓輸液泵等組成,是利用被檢測物在兩種液體之間分配比的差異,對被檢測物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。
儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運動時,經(jīng)過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
通用儀器作為國內(nèi)液相色譜儀的優(yōu)秀品牌一直堅持研發(fā)生產(chǎn)出更好更準確的液相色譜儀。他的液相色譜儀產(chǎn)品都擁有自己的技術以及產(chǎn)權。
具有:壓力實時檢測顯示,高壓限、低壓限報警,隨系統(tǒng)壓力變化流速自動補償?shù)墓δ埽灰约按_保檢測器低噪聲、低漂移、超高靈敏度、提高了圖譜的分辨能力和準確率的能力。
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