1、1934年，Moldavan使懸浮的紅細(xì)胞從一個(gè)毛細(xì)玻璃管中流過，每個(gè)通過的細(xì)胞可被一個(gè)光電裝置記錄下來。這就是流式細(xì)胞儀的雛形?！ ?、1965年，Kamentsky用紫外吸收和可見光散射兩個(gè)參數(shù)同時(shí)測(cè)量未染色細(xì)胞，給出細(xì)胞中核酸的含量和細(xì)胞大小。奠定了多參數(shù)流式細(xì)胞測(cè)量的基礎(chǔ)。 3、1967年，Van Dilla和Los Alamos采用了層流流動(dòng)室和氬激光器，開發(fā)出了液流束、照明光軸、檢測(cè)系統(tǒng)三者相互垂直的流式細(xì)胞儀。這成為目前各種流式細(xì)胞儀的基礎(chǔ)。 4、1969年，F(xiàn)ulwyler利用靜電墨水噴射液滴偏轉(zhuǎn)技術(shù)，建立了流式細(xì)胞分選術(shù)。Ehrlich和Wheeless利用飛點(diǎn)掃描技術(shù)和縫掃描技術(shù)使零分辨率的流式細(xì)胞儀變成了低分辨率的流式細(xì)胞儀?！ ?、20世紀(jì)70年代，隨著Kohler和Milstein成功提出了單克隆抗體技術(shù)和熒光標(biāo)記技術(shù)，為特異研究和分析細(xì)胞奠定了良好的基礎(chǔ)?！ ?、1973年，美國(guó)BD公司和美國(guó)斯坦福大學(xué)合作，研制開發(fā)并生產(chǎn)了世界上第一臺(tái)商用流式細(xì)胞儀FACS I?！ ?、20世紀(jì)80年代，流式細(xì)胞儀的數(shù)據(jù)采集、存儲(chǔ)、顯示、分析日趨完善，隨著樣品制備方法的增加，新的熒光染料和細(xì)胞標(biāo)記物的出現(xiàn)，使流式細(xì)胞儀的應(yīng)用范圍逐漸擴(kuò)大?！ ?、20世紀(jì)90年代，與之配套的標(biāo)本制備儀和自動(dòng)進(jìn)樣器的問世，以及適合臨床應(yīng)用的單克隆抗體的增加，使流式細(xì)胞儀逐漸從科研單位進(jìn)入醫(yī)院的中心實(shí)驗(yàn)室和檢驗(yàn)科，成為現(xiàn)代化的臨床檢驗(yàn)儀器的一部分。
流式細(xì)胞儀在醫(yī)學(xué)應(yīng)用非常廣泛，是一種能夠?qū)?xì)胞進(jìn)行相關(guān)處理的儀器，并且能夠?qū)?xì)胞進(jìn)行必要的分析，所以在醫(yī)學(xué)生的應(yīng)用非常的多。下面介紹一下流式細(xì)胞儀的具體應(yīng)用： 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用 1、DNA倍體分析 DNA分析是流式細(xì)胞儀最初且是現(xiàn)在應(yīng)用廣泛檢測(cè)項(xiàng)目。由于惡性細(xì)胞DNA含量通常與正常細(xì)胞不同，存在異倍體細(xì)胞，所以現(xiàn)有很研究評(píng)價(jià)異倍體細(xì)胞與腫瘤惡性度及其預(yù)后的關(guān)系。DNA含量檢測(cè)還可提供細(xì)胞周期方面的信息，這在細(xì)胞生物學(xué)中運(yùn)用很廣泛。特別地，它可表示出細(xì)胞毒性藥物對(duì)細(xì)胞作用過程。這些DNA檢測(cè)還可與細(xì)胞表面標(biāo)志物標(biāo)記同時(shí)進(jìn)行，這樣在細(xì)胞混合培養(yǎng)中，可通常追蹤表達(dá)特異標(biāo)志物的細(xì)胞顯示其生長(zhǎng)周期情況。所有方法都是基于染料能與核酸起特異的化學(xué)反應(yīng)并發(fā)射出熒光，常用的染料為PI，DAPI?！ ≡谠擃I(lǐng)域Partec公司的 CyFlow PA是一枝獨(dú)秀。 2、細(xì)胞生存能力實(shí)驗(yàn) 使用Heochest 33342染料與DNA特異性結(jié)合，后因細(xì)胞活力不同染料的結(jié)合程度也各異，故可評(píng)估細(xì)胞的活性度。 3、計(jì)數(shù)外周血中檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞 使用TO染料能夠特異性地與RNA結(jié)合，結(jié)合系數(shù)高達(dá)3000，故具有很好的性價(jià)比。 4、外周血、骨髓采集物中CD34陽(yáng)性干細(xì)胞計(jì)數(shù)，臨床上用于骨髓移植前干細(xì)胞數(shù)理的測(cè)定。使用標(biāo)準(zhǔn)ISHAG方案，需要DNA或其他核染料占用FITC通道，PE標(biāo)記CD34抗體，PE-CY5標(biāo)記CD45抗體?！ ?、交叉淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn) 檢測(cè)識(shí)別供體血清中免疫球蛋白與受體粒細(xì)胞之間是否存在反應(yīng)有著重要臨床意義，因?yàn)檫@種反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致移植后發(fā)熱、移植后肺損傷及免疫性粒細(xì)胞缺乏癥。流式細(xì)胞儀可檢測(cè)全血樣本與血清孵育后粒細(xì)胞上結(jié)合的人免疫球蛋白。FITC標(biāo)記人免疫球蛋白抗體、PE標(biāo)記粒細(xì)胞表面標(biāo)志物、PE-CY5標(biāo)記HLA抗體?！ ?、血小板自身抗體檢測(cè) 血小板自身抗體識(shí)別人血小板抗原，會(huì)引起各種臨床相關(guān)癥狀，如新生兒自免性血小板減少癥、輸血后紫癜、難治性血小板減少。流式細(xì)胞可快速準(zhǔn)確地檢測(cè)血小板自身抗體。FITC標(biāo)記抗人免疫球蛋白抗體、PE標(biāo)記識(shí)別血小板抗體?！ ?、移植交叉配型 原細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)，主要用于避免移植物超急性排拆反應(yīng)。流式細(xì)胞儀用于監(jiān)測(cè)T或B細(xì)胞是否受到受體血清中免疫球蛋白攻擊，作為HLA配型前的預(yù)實(shí)驗(yàn)。流式細(xì)胞儀因其高精確性已成為該領(lǐng)域內(nèi)的金標(biāo)準(zhǔn)。FITC標(biāo)記抗人免疫球蛋白抗體、PE標(biāo)記識(shí)別T細(xì)胞CD3或B細(xì)胞CD29抗體。 8、檢測(cè)細(xì)胞經(jīng)抗原或細(xì)胞有絲分裂刺激后活化效應(yīng)淋巴細(xì)胞早期活化指標(biāo)CD69可用來檢測(cè)免疫治療效果。流式細(xì)胞使用三色分析可監(jiān)測(cè)淋巴細(xì)胞各亞群活化情況：FITC標(biāo)記的CD3抗體、PE標(biāo)記的CD8抗體、PE-CY5標(biāo)記的CD69抗體?！ ?、細(xì)胞增殖狀態(tài)檢測(cè) 核增殖抗PCNA、Ki67、BrdUrd用于衡量細(xì)胞增殖分裂狀況，在評(píng)估腫瘤預(yù)后有重要意義。為些標(biāo)志物的檢測(cè)一般同細(xì)胞表面標(biāo)志物同時(shí)檢測(cè)。FITC標(biāo)記PCNA或Ki67或BrdUrd，PE或（并）PE-CY5標(biāo)記細(xì)胞表面標(biāo)志物?！ ?0、染色體分析 流式細(xì)胞儀染色分析運(yùn)用兩種特異性染料：Hoechest33258與核苷酸AT結(jié)合；Chromomycin A3與GC相結(jié)合。從而在雙參數(shù)坐標(biāo)上根據(jù)染色體ATCG含量的不同識(shí)別各種染色體。平時(shí)進(jìn)行的染色體分析耗時(shí)且需要操作者極具經(jīng)驗(yàn)，而用流式細(xì)胞儀時(shí)可快速地識(shí)別出異常染色體，如加配分選系統(tǒng)可將這些異常染色體分選出來作進(jìn)一步分析。
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