紫外可見分光光度計(jì)是化驗(yàn)室常用的定量分析儀器之一,型號品種繁多;
如何選擇一臺適用于您的分光光度計(jì),請參考以下的選型方案:
1 從波長范圍選擇
既定出需要的波長范圍,是屬于紫外區(qū)(190nm-340nm),還是可見區(qū)(340nm-1100nm),或者是紫外可見全區(qū)域。
2 從波長帶寬選擇
不同的行業(yè)對于分光光度計(jì)的波長帶寬有著不同的要求,單款越窄儀器的性能越優(yōu)良但是相對價(jià)格也越昂貴。
不是每個行業(yè)都需要有比較窄的帶寬,而是根據(jù)用戶的需求去進(jìn)行選擇,只要適用就是好的。
提到帶寬,就必須提到雜散光,帶寬較窄的情況下,一般雜散光也越小,雜散光確實(shí)也是衡量一臺分光光度計(jì)的主要技術(shù)指標(biāo)。
3 從附加功能選擇
分光光度計(jì)的常見附加功能不外乎,全波長掃描及動力學(xué)掃描(時(shí)間掃描)。
全波長掃描指的是從波長的最低點(diǎn)到最高點(diǎn)或者設(shè)定的波長范圍;
儀器可以自動的把每個設(shè)定波長點(diǎn)的析光度或者透過率,全面的反映在掃描圖譜上,得出樣品在不同波長點(diǎn)的吸收特性。
動力學(xué)掃描也稱為時(shí)間掃描,主要是應(yīng)用于隨時(shí)間變化樣品的性質(zhì)也發(fā)生變化的實(shí)驗(yàn),我們用動力學(xué)掃描就可以比較清晰的看見某些樣品隨時(shí)間變化而變化的特性。
還有一些,雙波長或者多波長的功能,主要是應(yīng)用于一些需要測定幾點(diǎn)不同波長的的樣品。
4 隨機(jī)軟件及工作站
隨著電腦的普及,越來越多的分光光度計(jì)可以攜帶隨機(jī)軟件與電腦聯(lián)機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析計(jì)算甚至于反控;
在選擇分光光度計(jì)的時(shí)候,也可以按實(shí)際需求去選擇是否需要隨機(jī)軟件配置電腦,更方便的開展實(shí)驗(yàn)工作。
只有了解 國產(chǎn)分光光度計(jì)基本結(jié)構(gòu),才能更好地使用分光光度計(jì)。
分光光度計(jì)的儀器組成比較簡單,主要部件包括由光源、單色器、吸收池、檢測器以及數(shù)據(jù)處理及記錄系統(tǒng)等組成。
(1)光源
分光光度計(jì)中光源為儀器提供連續(xù)輻射,理想的光源應(yīng)在整個紫外見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜,具有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用命。
由于不同的光源波長范圍不同,因此,在分光光度計(jì)中在可見光區(qū)和紫外光區(qū)要使用不同的光源。
目前儀器常用的光源有兩種:
鎢絲燈、氫燈或氘燈。
在可見光區(qū)、近紫外光區(qū)和近紅外光區(qū)常用鎢絲燈作為光源,波長范圍約為320-500nm。由于鎢燈的能量輸出大約隨工作電壓的四次方而變化,為了使光源穩(wěn)定,必須嚴(yán)格控制電壓。
此外,為防止在高溫下工作時(shí),鎢蒸氣不斷在冷的燈泡內(nèi)壁沉,在鎢燈泡中引入了少量的碘蒸氣,即碘鎢燈,碘鎢燈相對普通鎢燈使用壽命長些。
(2)單色器
單色器是分光光度計(jì)的核心部分,分光光度計(jì)儀器的主要光學(xué)特和工作特性基本上由單色器決定。
它的作用是將光源發(fā)出的連續(xù)光譜色散成各種三。分光光度計(jì)中的單色器是一個完件——棱鏡或光柵外,還有人射和出射狹縫以及一組反鏡。
根據(jù)工作光譜范圍、色散率、分辨率等性能指標(biāo)的要求,可分別選用棱鏡或柵分光的單色器,也可采用濾光片分光的單色器等。
國產(chǎn)分光光度計(jì)光片是比較簡單、較為廉價(jià)的色散元件,但單色性不好,使測定精度大大受到限現(xiàn)一般用來消除單色器的雜散光。
棱鏡和光柵是目前廣泛使用的色散元件。棱可以作為從紫外到中紅外區(qū)的合適的色散元件,其主要缺點(diǎn)是色散波長的非線性布;而光柵是可以用于紫外、可見、近紅外范圍。
光柵的主要缺點(diǎn)是有次級光譜擾分析,且雜散光的影響比棱鏡更大,故常配濾光片以去除雜散光。
(3)吸收池
吸收池(比色皿)是盛放樣品溶液的容器,具有兩個相互平行、透光、厚度精的平面。
主要有石英池和玻璃池兩種??梢姽鈪^(qū)用玻璃池,紫外光區(qū)須采用石英池。
吸收池可能有多種規(guī)格,典型的厚度是lcm。此外,每套吸收池的質(zhì)料、厚度應(yīng)完全相同,以免產(chǎn)生誤差。
吸收池上的指紋、油污或壁上的沉積物都會顯著地影響其透光性,因此在使用前務(wù)必徹底清洗。
(4)檢測器
檢測器是一種光電轉(zhuǎn)換設(shè)備,將透過吸收池的光信號變成可測的電信號顯示出來。常用的有光電池、光電管或光電倍增管。
光電倍增管是利用二次電子發(fā)射來放大光電流,放大倍數(shù)可高達(dá)108倍,是目前應(yīng)用廣泛但價(jià)格較高的檢測器。較先進(jìn)的儀器有采用二極管陣列作為檢測器。
二極管陣列檢測器不使用出射狹縫,在其位置上放-極管的線性陣列,則分光后不同波長的單色光同時(shí)被檢測。曼響應(yīng)速度快,但靈敏度不如光電倍增管,因后者具有很高的放大倍數(shù)。
(5)數(shù)據(jù)處理及記錄系統(tǒng)
數(shù)據(jù)處理及記錄系統(tǒng)包括放大器、A/D轉(zhuǎn)換單元、微型計(jì)算機(jī)等,;理和儀器自動控制。
國產(chǎn)分光光度計(jì)檢測器產(chǎn)生的光電流以某種方式轉(zhuǎn)變成模擬信號,并線性地進(jìn)行適度放大,放大了的模擬信號;
反饋人A/D轉(zhuǎn)換單元最終通過微型計(jì)算機(jī)進(jìn)行適當(dāng)?shù)臄?shù)據(jù)處理,并通過終端裝置顯示或打印出被測樣品的譜圖。