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waters液相色譜儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 液相色譜操作規(guī)程

時(shí)間：2020-05-16    來源：儀多多儀器網(wǎng)    作者：儀多多商城     
　　1.規(guī)程
 
　　一、waters HPLC系 統(tǒng) 的 打 開 及 關(guān) 閉 順 序
 
　　1.1打 開 順 序
 
　　· 對 于 分 體 式 ： 請 按 泵 、 進(jìn) 樣 器 、 柱 溫 箱 、 檢 測 器 的 順 序 打 開 開 關(guān) ， 待 各 部 分 分別 顯 示 初 始 化 完 畢 后 ， zui 后 打 開 Millennium 32化 學(xué) 工 作 站 。
 
　　泵 與 色 譜 工 作 站 的 連 接：對 于 510 泵，因 為 此 泵 與 色 譜 工 作 站 是 單 向 聯(lián) 系 ， 如 要 使 泵在 Remote 狀 態(tài) 下 由 工 作 站 控 制 ， 首 先 要 在 泵 的 鍵 盤 上 按 Menu 鍵 ， 待 顯 示 屏 切 換 至 Mode 狀態(tài) 下 ， 其 狀 態(tài) 是 Loca ，按 Edit/Enter 鍵 ，在 Local 的 L 前 有 閃 動(dòng) 的 光 標(biāo) 顯 示，按Ù 鍵， Local 轉(zhuǎn) 換成 Rem， 再 按 Edit/Enter 鍵，此 命 令 已 輸 入 進(jìn) 去, zui 后 按 Stop/Run 鍵， 使 泵 處 于Run 狀 態(tài) 這 時(shí) 泵 和工 作 站 的 連 接 即 告 成 功。 泵 的 任 何 動(dòng) 作 都 可 由 工 作 站 來 控 制。還 應(yīng) 注 意 這 一 步 工 作 在 每次 開 機(jī) 時(shí) 都 要 進(jìn) 行。
 
　　對 于 Alliance 2690 系 統(tǒng) ： 先 打 開 Alliance 2690 主 機(jī) 、 檢 測 器 電 源 開 關(guān)，待 初 始 化 完 畢 后 ，再進(jìn) 入 Millennium 32 化 學(xué) 工 作 站。
 
　　1.2關(guān) 閉 順 序
 
　　首 先 退 出 Millennium 32化 學(xué) 工 作 站， 再 關(guān) 閉 系 統(tǒng) 的 其 他 部 分 。
 
　　二、2Millennium 32化 學(xué) 工 作 站
 
　　2.1Millennium 32化 學(xué) 工 作 站 的 進(jìn) 入
 
　　打 開 化 學(xué) 工 作 站 ， 系 統(tǒng) 自 動(dòng) 進(jìn) 入 Program Manager界 面 ， 雙 擊 Millennium 肖 像 ， 這 時(shí) 進(jìn)入Millennium界 面 ， 雙 擊 Session Manager 圖 標(biāo) ， 系 統(tǒng) 將 自 動(dòng) 初 始 化 ， 以 使 工 作 站 和 HPLC整 套系 統(tǒng) 進(jìn) 行 聯(lián) 接 。 初 始 化 后 ， 按 系 統(tǒng) 要 求 鍵 入 你 的 User Name和 Password， 這 時(shí) 你 已 進(jìn) 入 該系 統(tǒng) 。
 
　　2.2Project的 進(jìn) 入 和 建 立
 
　　· Project的 進(jìn) 入： 在 Session Manager窗 口 下 ， 擊 Project肖 像(或 從 View中 選 擇Projects), 在 其 中 有 已 建 好 的 Project， 雙 擊 你 所 需 的 Project肖 像 ， 再 進(jìn) 行 你 想做 的 工 作 。
 
　　· Project的 建 立
 
　　從 File中 選 擇 New， 即 顯 示 New Project的 畫 面 。
 
　　在 Project Name 中 輸 入 你 的 Project 名 稱 。
 
　　在 Initiallze Project 項(xiàng) 目 中 選 擇 Copy 中 的 filter and fields 或 Methods。
 
　　在 From Project 中 選 擇 要 拷 貝 的 現(xiàn) 存 Project。
 
　　選 擇 Tablespace size。
 
　　選 OK， 存 貯 并 退 出 。
 
　　當(dāng) Millennium 軟 件 在 建 立 一 個(gè) 新 的 Project 時(shí) ， 在 屏 幕 上 及 時(shí) 顯 示 出 完 成 建 立 新 Project 的 百分 比 。 當(dāng) 達(dá) 到 100% 時(shí) ， 在 SessionManager 畫 面 即 出 現(xiàn) 一 個(gè) 新 的 Project 肖 像 。
 
　　2.3收 集 數(shù) 據(jù) 的 一 般 過 程
 
　　使 用 Millennuium32收 集 數(shù) 據(jù) 的 一 般 過 程 如 下 ：在 Project 窗 口 內(nèi) 建 立 收 集 數(shù) 據(jù) 所 需 儀 器 的儀 器 方 法； 建 立 包 括 此 儀 器 方 法 的 方 法 組 ； 使 用 此 方 法 組 收 集 數(shù) 據(jù) 。
 
　　本 部 分 包 括 ： 建 立 儀 器 方 法 ， 建 立 方 法 組 ， 收 集 樣 品 。
 
　　· 建 立 /修 改 儀 器 方 法
 
　　從 Sessoin Manager窗 口 ， 打 開 所 需 的 Project。
 
　　選 擇 Method 按 鈕 ， 現(xiàn) 存 的 方 法 的 肖 像 即 出 現(xiàn) 在 屏 幕 上 。
 
　　從 命 令 菜 單 中 選 擇 File， 然 后 選 擇 其 中 的 New Instrument Method， 即 出 現(xiàn) System Open 對 話 框 。
 
　　在 目 錄 中 選 擇 收 集 數(shù) 據(jù) 需 要 使 用 的 色 譜 硬 件 系 統(tǒng) 的 名 稱 ， 如 ： System_1。 按 OK， 這 時(shí)Instrument Method 窗 口 即 顯 示 出 來 。
 
　　窗 口 的 上 部 分 是 該 系 統(tǒng) 的 所 有 儀 器 的 肖 像 。 用 鼠 標(biāo) 器 將 需 要 設(shè) 定 儀 器 參 數(shù) 的 儀 器 部 件激 活 ， 然 后 在 儀 器 肖 像 上 雙 擊 兩 下 ， 即 出 現(xiàn) Instrument Dialog Box 畫 面 。
 
　　對 各 個(gè) 部 件 設(shè) 置 操 作 條 件 ， 或 通 過 輸 入 新 的 參 數(shù) 來 更 改 以 前 的 參 數(shù) 。 例 如 ： 定 義 泵 參數(shù) ， 先 雙 擊 SIM/PCM 的 肖 像 。 填 寫 泵 參 數(shù) ， 按 OK。
 
　　當(dāng) 所 有 參 數(shù) 設(shè) 置 完 成 后 ， 按 OK。 即 回 到 Instrument Method 窗 口 。 選 File 中 的 Save As 存 貯 儀 器方 法 文 件 ， 如 有 需 要 ， 起 一 文 件 名 ， 按 OK。
 
　　選 擇 File 中 的 Exit， 即 回 到 Project 窗 口 。 新 的 儀 器 方 法 肖 像 即 出 現(xiàn) 在 此 窗 口 下 。
 
　　· 建 立 方 法 組 (Method Set)
 
　　儀 器 方 法 編 好 后 ， 必 須 存 于 一 方 法 組 中 ， 才 能 在 Quick Set Control 中 調(diào) 用 。
 
　　在 Project 窗 口 下 選 方 法 肖 像 。
 
　　選 File 中 的 New Method Set， 即 顯 示 出 Method Set 對 話 框 。
 
　　在 此 畫 面 的 Instrument Method 一 欄 ， 選 擇 已 確 定 的 儀 器 方 法 。 其 他 項(xiàng) 目 可 空 著 不 填 。 然 后選 File， Save As。 輸 入 方 法 組 名 后 ， 按 OK。
 
　　選 File， Exit。 即 退 回 到 Project 窗 口 。 新 設(shè) 置 的 方 法 組 肖 像 即 出 現(xiàn) 在 此 窗 口 下 。
 
　　· 收 集 樣 品 ：完 成 以 上 各 步 驟 后 ， 即 可 收 集 樣 品 。
 
　　在 Project 窗 口 下 選 擇 Quick Set Control 肖 像 。 出 現(xiàn) System Open 對 話 框 。
 
　　選 擇 建 立 儀 器 方 法 時(shí) 確 定 的 色 譜 硬 件 系 統(tǒng) ， 按 OK。 即 出 現(xiàn) Quick Set Control 窗 口 。
 
　　在 此 窗 口 下 的 Sample Loading Table 中 用 鼠 標(biāo) 器 按 第 一 行 ， 這 時(shí) Millennium 軟 件 會(huì) 自 動(dòng) 填 充 各項(xiàng) 初 始 參 數(shù) 。 通 過 輸 入 新 值 可 更 改 表 中 的 各 項(xiàng) 參 數(shù) ， 表 中 的 瓶 號(hào)(對 于 高 效 液 相 色 譜 儀的 進(jìn) 樣 表 ，除 另 有 規(guī) 定 外 ， 按 括 號(hào) 法 安 排 進(jìn) 樣 順 序 。 即 第 一 針 為 標(biāo) 準(zhǔn) 品 1作 為 系 統(tǒng) 適 用性 共 進(jìn) 6針 ， 要 求 RSD不 大 于 2%， 隨 后 為 標(biāo) 準(zhǔn) 品 2， 進(jìn) 樣 次 數(shù) 為 2針 ， 然 后 為 樣 品 1到 樣 品 3，各 進(jìn) 2針 。 樣 品 3 后 為 標(biāo) 準(zhǔn) 品 1，依 次 類 推 ， 直 到 將 所 有 樣 品 都 安 排 在 進(jìn) 樣 表 中 ) 進(jìn) 樣 次數(shù) ， 進(jìn) 樣 體 積 ， 運(yùn) 行 時(shí) 間 等 項(xiàng) 目 對 自 動(dòng) 進(jìn) 樣 器 有 控 制 作 用 。
 
　　在 Method Set Report 一 列 中 選 擇 在 前 面 剛 剛 建 立 的 方 法 組 。
 
　　在 運(yùn) 行 方 式 ( mode )中 選 Run Only。
 
　　選 擇 進(jìn) 樣 方 式： 菜 單mode 下 選 單 個(gè) 樣 品 或 樣 品 組 進(jìn) 樣。
 
　　將 Sample Loading Table 中 第 一 行 點(diǎn) 黑 。 擊 Setup Instrument 按 鈕 ， 啟 動(dòng) 系 統(tǒng) 。
 
　　系 統(tǒng) 啟 動(dòng) 后 可 擊baseline monitor 圖 標(biāo)， 即 可 觀 察 基 線 。
 
　　待 基 線 平 穩(wěn) 后 ， 擊 綠 燈 或 樣 品 盤 肖 像 準(zhǔn) 備 進(jìn) 樣 。 出 現(xiàn) Injector wait 提 示 信 息 ， 隨 即 進(jìn)樣。
 
　　在 樣 品 測 試 過 程 中， 系 統(tǒng) 會(huì) 在 Quick Set 窗 口 下 顯 示 瓶 號(hào) 和 進(jìn) 樣 次 數(shù) 及 運(yùn) 行 時(shí) 間 。 并 可在 此 窗 口 下 觀 察 檢 測 器 的 輸 出 情 況 。 屏 幕 上 顯 示 的 檢 測 器 輸 出 是 自 動(dòng) 滿 量 程 方 式 (即 自動(dòng) 按 zui 大 信 號(hào) 滿 格 輸 出 )。
 
　　當(dāng) 收 集 完 色 譜 數(shù) 據(jù) 后 ， 選 擇 File， Exit。 退 出 Quick Set 窗 口 。 樣 品 收 集 完 成 后 ，Millennuium32會(huì) 自 動(dòng) 存 貯 收 集 的 數(shù) 據(jù) 。
 
　　2.4建 立 數(shù) 據(jù) 處 理 的 方 法
 
　　
 
　　在 Millennuium32中 ， 完 成 不 同 的 任 務(wù) 需 編 輯 不 同 的 方 法 ， 如 儀 器 方 法 (收 集 數(shù) 據(jù) )， 處 理 方法 (定 性 定 量 分 析 )， 報(bào) 告 方 法 (打 印 實(shí) 驗(yàn) 報(bào) 告 )等 。
 
　　本 部 分 包 括 ：
 
　　*重 新 調(diào) 出 色 譜 峰 進(jìn) 行 觀 察 。
 
　　*譜 圖 積 分 及 確 定 積 分 表 中 的 參 數(shù) 。
 
　　*輸 入 組 分 表 資 料 。
 
　　*存 貯 數(shù) 據(jù) 處 理 方 法 。
 
　　· 調(diào) 閱 色 譜 圖
 
　　進(jìn) 入 在 其 中 收 集 樣 品 的 Project， 在 此 窗 口 下 選 Channel 肖 像 。
 
　　在 Channel View Table 中 選 擇 欲 進(jìn) 行 色 譜 分 析 的 文 件 行 并 使 其 變 黑。
 
　　在 Tools 下 選 擇 Review 肖 像 ， 這 時(shí) 在 Review Data窗 口 下 即 顯 示 出 你 調(diào) 入 的 色 譜 圖 。
 
　　選 File， New Method。 在 New Method 對 話 框 中 指 定 數(shù) 據(jù) 處 理 的 類 型 ， 如 LC， 選 OK。
 
　　· 色 譜 圖 的 積 分
 
　　選 View， Integration Table。 在 屏 幕 下 部 即 出 現(xiàn) Integration Event Table。
 
　　在 Peak Width， Minimum Area， Minimum Height 方 框 中 輸 入 適 宜 的 數(shù) 值 。
 
　　按 Integration 按 鈕 ， 觀 察 積 分 情 況 ， 并 適 當(dāng) 進(jìn) 行 積 分 參 數(shù) 的 調(diào) 整 。
 
　　· 輸 入 組 分 資 料
 
　　選 View， Component Table。 即 可 見 到 空 的 組 分 表 。
 
　　選 Options， Fill Table From Result， 即 可 自 動(dòng) 填 充 積 分 完 畢 的 色 譜 圖 的 組 分 表 。 也 可 用 手 動(dòng)方 式 修 改 表 中 的 參 數(shù) 。
 
　　按 Calibration/Quantitate 后 ， 選 View， Result Table。 即 可 看 到 積 分 的 結(jié) 果 。
 
　　· 存 貯 數(shù) 據(jù) 處 理 方 法
 
　　在Review Data 窗 口 下，選 File， Save Method。 在 Processing Method Save As 對 話 框 的 窗 口 下輸 入 數(shù) 據(jù)處 理 方 法 名 稱 。
 
　　按 OK， 貯 存 Processing Method。 在 組 分 表 的 上 方 可 看 到 新 的 Processing Method 的 名 稱 。
 
　　選 File， Exit。 即 可 退 出 Review Data 窗 口 ， 回 到 Project 窗 口 。
 
　　2.5重 新 觀 察 色 譜 結(jié) 果
 
　　
 
　　· 進(jìn) 入 你 所 需 的Project 窗 口 。 擊 Result View 肖 像 。
 
　　· 在 Result View Table 中 選 擇 你 想 觀 察 的 色 譜 數(shù) 據(jù) 。
 
　　· 擊 Review 肖 像 ， 你 所 選 擇 的 第 一 個(gè) 色 譜 數(shù) 據(jù) 的 譜 圖 將 在 Review Data 窗 口 下， 其 結(jié) 果 將 顯 示 在 Result Table 中 的 第 一 行 。
 
　　· 按 Next Ch/Inj 的 方 框 即 可 看 到 下 一 針 進(jìn) 樣 的 有 關(guān) 資 料 。
 
　　· 選 File， Exit。 即 可 回 到 Project 窗 口 。
 
　　2.6報(bào) 告 方 法 的 編 輯 及 試 驗(yàn) 報(bào) 告 的 打 印
 
　　· 啟 動(dòng) 報(bào) 告 出 版 系 統(tǒng)
 
　　進(jìn) 入“PROJECT” 窗 口。
 
　　在Views 下 按 一 下 方 法 肖 像。
 
　　選 擇File，New Report Method。 這 時(shí) 即 可 編 輯 新 的 報(bào) 告 方 法。
 
　　在 報(bào) 告 排 版 窗 口 中， 右 邊 為 一 張 模 擬 的 白 紙， 左 上 方 的 列 表 為 排 版 時(shí) 可 放 置 在 右 邊 紙上 的 項(xiàng) 目。 如 圖 譜， 積 分 表， 樣 品 信 息， 儀 器 方 法 等， 左 下 方 為 報(bào) 告 頭 標(biāo) 和 腳 標(biāo)( 如土〕。 選 擇Individual 為 每 個(gè) 結(jié) 果 有 一 個(gè) 報(bào) 告， 選Summary of Result Sets All 方 式 為 打 一 個(gè) 集 中 的報(bào) 告。 按OK。
 
　　· 設(shè) 計(jì) 報(bào) 告 格 式
 
　　按 一 下Chromatogram Groups 肖 像。 在 Chromatogram Groups 列 表 中 選 擇Auto-scaled Chromatogram 。 并 在 報(bào)告 頁 面 上 按 一 下， 用 鼠 標(biāo) 器 將 此 圖 形 放 在 畫 面 合 適 的 位 置 上。
 
　　用 鼠 標(biāo) 器 將 箭 頭 放 在 畫 面 的 邊 緣， 當(dāng) 箭 頭 變 成 雙 箭 頭 時(shí) 將 圖 形 放 大 或 縮 小。
 
　　選 擇Format，Landscape。 可 將 圖 譜 垂 直 放 置。
 
　　按 一 下Method Group 肖 像， 從Method Group 的 列 表 中 選 擇Instrument Method， 并 在 報(bào) 告 頁 面 上 的 合 適處 按 一 下。 這 時(shí) Instrument Method 方 框 將 出 現(xiàn) 在 報(bào) 告 頁 面 上。
 
　　按 一 下Table Groups 肖 像， 在 Table Groups ， 并 在 報(bào) 告 格 式 上 的 合 適 位 置 上 按 一 下。
 
　　選 擇Format，Page Size。 可 改 變 報(bào) 告 尺 寸 的 大 小。
 
　　選 擇Customize，Header。 即 出 現(xiàn)Header 窗 口。 在 此 窗 口 下 選 擇General information 肖 像。在 General information Field 列 表 中 按 一 下Date。 這 時(shí) 在Field Name 的 方 框 中 即 出 現(xiàn)Date 方 框。 可 用 鼠 標(biāo) 器 將此 方 框 移 動(dòng) 到 合 適 的 位 置。
 
　　可 用 文 字， 箭 頭， 方 框 等 工 具 在Header 窗 口 下 增 加 你 感 興 趣 的 內(nèi) 容。
 
　　選File，Save。 輸 入 Header 的 名 稱 (如：My_Header〕， 按 OK， 返 回 到Header 窗 口。
 
　　選File，Exit。 即 回 到Report Publisher 窗 口。
 
　　在 Customize，F(xiàn)ooter。 即 出 現(xiàn) Footer 窗 口。
 
　　按 一 下 General information 肖 像， 在General information Field 列 表 中 按 一 下Page Number 的 方 框。 將 此方 框 放 在 報(bào) 告 頁 面 的 注 腳 位 置 上。
 
　　選File，Save。 輸 入Footer 的 名 稱 ( 如：My_ Footer )， 按OK， 返 回 到Footer 窗 口。
 
　　選File，Exit。 回 到Report Publish 窗 口。
 
　　在Footer 列 表 中 選 剛 編 好 的 腳 標(biāo)。
 
　　· 存 儲(chǔ) 報(bào) 告 方 法
 
　　選File，Save。 輸 入 此 報(bào) 告 的 方 法 名 ( 如：My_ Report ) ， 按 OK， 返 回 到 Report Publisher 窗 口。
 
　　選File，Exit。 即 回 到PROJECT 窗 口。 在 此 窗 口 下 即 可 看 到 My_ Report 報(bào) 告 方 法 的 肖 像。
 
　　· 報(bào) 告 格 式 預(yù) 覽： 報(bào) 告 格 式 設(shè) 計(jì) 好 后， 在 打 印 之 前， 可 在 此 預(yù) 先 看 到 打 印 效果， 如 需 修 改 可 隨 時(shí) 切 換 到 報(bào) 告 出 版 窗 口， 邊 看 邊 修 改， 直 到 滿 意 為 止。
 
　　在PROJECT 窗 口 下， 選Result 肖 像， 即 出 現(xiàn)Result View Table 表。
 
　　在 此 表 上 選 擇 需 要 報(bào) 告 的 結(jié) 果 文 件， 使 其 變 黑。
 
　　按 一 下Preview 肖 像， 即 出 現(xiàn)Report Method Selection 窗 口。
 
　　從 目 錄 上 選 擇 剛 才 已 建 立 好 的 報(bào) 告 方 法， 按 OK。 這 時(shí) 即 出 現(xiàn) 剛 才 所 選 結(jié) 果 的 報(bào) 告。
 
　　在 上 畫 面 上 按NextPage 或PrevPage 即 可 看 到 報(bào) 告 的 下 一 頁 或 上 一 頁。
 
　　按 方 法 編 輯 肖 像 即 可 對 當(dāng) 前 方 法 進(jìn) 行 編 輯。
 
　　按 打 印 肖 像， 即 可 將 此 報(bào) 告 打 印 出 來。
 
　　選 擇File，Exit。 即 可 退 出 報(bào) 告 畫 面， 回 到“PROJECT” 窗 口。
 
　　2.7批 量 進(jìn) 樣 結(jié) 果 的 處 理 及 打 印 報(bào) 告
 
　　
 
　　· 當(dāng) 已 有 確 定 的 處 理 方 法 后 ， 可 用 此 方 法 處 理 數(shù) 據(jù) 。
 
　　在 Channel View Table 表 中 選 擇 你 要 的 樣 品 行 并 將 其 按 黑 。
 
　　在 Tools 下 擊Process and Report 肖 像 。 這 時(shí) 即 出 現(xiàn) Process and Report Options 對 話 框 。
 
　　在 處 理 方 法 一 欄 中 選 擇 Use Specified Prosessing method 并 指 定 處 理 方 法 ， 把 Print 選 擇 框 的 叉扇 掉 。 按 OK。 這 時(shí) 開 始 處 理 你 所 選 的 數(shù) 據(jù) ， 在 屏 幕 下 方 顯 示 出 Result Generator 肖 像 。
 
　　按 Result View 肖 像 ， 處 理 后 的 數(shù) 據(jù) 即 出 現(xiàn) 在 Result View Table 中。
 
　　· 打 印 報(bào) 告
 
　　在 Result View Table 表 中 選 擇 你 要 的結(jié) 果 行 并 將 其 按 黑 。
 
　　在 Tools 下 按 一 下 打 印 機(jī) 肖 像 ， 這 時(shí) 出 現(xiàn) Background Report Generator 對 話 框 選 擇 你 所 要 用 的 報(bào)告 方 法 ， 按 OK。 色 譜 報(bào) 告 即 可 打 印 出 來 。
 
　　2.8使 用 后 應(yīng) 填 寫 使 用 記 錄。

液相色譜填料的粒度選擇

　　現(xiàn)代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇，首先必須對此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。

　　液相色譜填料可以是陶瓷性質(zhì)的無機(jī)物基質(zhì)，也可以是有機(jī)聚合物基質(zhì)。液相色譜填料中的有機(jī)物基質(zhì)主要是硅膠和氧化鋁。無機(jī)物基質(zhì)剛性大，在溶劑中不容易膨脹。

　　液相色譜填料中有機(jī)聚合物基質(zhì)主要有交聯(lián)苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有機(jī)聚合物基質(zhì)剛性小、易壓縮，溶劑或溶質(zhì)容易滲入有機(jī)基質(zhì)中，導(dǎo)致填料顆粒膨脹，結(jié)果減少傳質(zhì)，最終使柱效降低。

　　液相色譜填料的粒度選擇

　　液相色譜填料的粒度主要影響填充柱的兩個(gè)參數(shù)，即柱效和背壓。粒度越小，填充柱的柱效越高；然而粒度越小，柱壓越大，柱壓的增加限制了粒度小于3μm的填料應(yīng)用。在相同選擇性條件下，提高柱效可提高分離度，但不是唯一的因素。如果固定相選擇是正確，但是分離度不夠，那么選用更小粒度的填料是很有用的。3μm填料填充柱的柱效比相同條件下的5μm填料的柱效提高近30%；然而，3μm的色譜柱的背壓卻是5μm的2倍。與此同時(shí)，柱效提高意味著在相同條件下可以選用更短的色譜柱，以縮短分析時(shí)間。另外，可以采用低粘度的溶劑做流動(dòng)相或增加色譜柱的使用溫度，比如用乙腈代替甲醇，以降低色譜柱的壓力。

標(biāo)簽: 液相色譜
液相色譜 液相色譜填料的粒度選擇_液相色譜

液相色譜儀5種常見故障及處理方法

　　液相色譜儀是一種常用的分析儀器，主要由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成，被廣泛用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等領(lǐng)域中。

　　1、柱壓高原因

　　(1)緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內(nèi);

　　(2)樣品污染沉積。處理對于第一種情況先用40～50℃的純水，低速正向沖洗柱子，待柱壓逐漸下降后，相應(yīng)提高流速?zèng)_洗，柱壓大幅度下降后，用常溫純水沖洗，之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘;對于第二種情況，由樣品的沉積引起污染的C18柱，和純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長短由樣品污染的情況而定)，再用換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。

　　2、氣泡溢出

　　流動(dòng)相內(nèi)有氣泡，關(guān)閉泵，打開泄壓閥，打開purg鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進(jìn)入流動(dòng)相，無論打開purge鍵幾次，都無法清除不斷產(chǎn)生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi)，過濾器內(nèi)部由于霉菌的生長繁殖，形成菌團(tuán)，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過濾器進(jìn)入流動(dòng)相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可;亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時(shí)，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開purge鍵清洗脫氣，如仍有氣泡不斷從過濾器冒出，繼續(xù)將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出，說明過濾器內(nèi)部的霉菌菌團(tuán)已被硝酸破壞，流動(dòng)相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥，打開泵，流速調(diào)至1.0～3.0ml/min，純水沖洗過濾器1小時(shí)左右。即可將過濾器清洗干凈。關(guān)閉泄壓閥，純甲醇沖洗半小時(shí)即可。

　　3、既無壓力指示，又無液體流過

　　(1)泵密封墊圈磨損;

　　(2)大量氣泡進(jìn)入泵體。處理對于第一種情況，更換密封墊圈;對于第二種情況，在泵作用的同時(shí)，用一個(gè)50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。

　　4、壓力波動(dòng)大，流量不穩(wěn)定

　　原因系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動(dòng)相的量，保證不銹鋼濾器沉入儲(chǔ)液器瓶底，避免吸入空氣，流動(dòng)相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。

　　5、出峰不佳，峰分叉

　　(1)色譜柱被污染;

　　(2)柱頭填料塌陷。處理對于第一種情況，先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長短由樣品污染的情況而定)，再換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳，則考慮第二種情況。對于第二種情況，擰開柱頭，檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分(污染的填料)，裝入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反復(fù)幾次，直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖洗30分鐘以上。

標(biāo)簽: 液相色譜儀
液相色譜儀 液相色譜儀5種常見故障及處理方法_液相色譜儀

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